Enhancement of monacolin K production via intergeneric protoplast fusion between Aspergillus terreus and Monascus anka

Intergenric protoplast fusion between Aspergillus terreus CA99 and Monascus anka M-3, the high and low producers of monacolin K respectively,was performed for enhancement of monacolin K production. The 24-hour-old mycelia of A. terreus CA99 and M. anka M-3 were treated with 0.5% lywallzyme, 0.3% snailase and 0.3% cellulase at 34℃ for 5 h and at 30℃ for 3.5 h, and their protoplasts formation reached 1.76×107/mL and 1.68×107/mL respectively. Parental protoplasts were irradiated with a 30 W UV light away from 30 cm for 3 min and then mixed. The mixture was incubated with 30% PEG 6000 for 15 min. The reviving fusants were isolated on the regeneration plates. Of the 363 fusants isolated, over 100 showed enhanced monacolin K production compared with the parental strain M. anka M-3. Ten of them produced monacolin K about 1.6-fold of that M.anka M-3 does and the monacolin K titer of two fusants (F49 and F104) increased by about 1-fold. The monacolin K yields of F49 and F104 were 460 μg/mL and 457 μg/mL respectively. In optimized fermentation medium, the monacolin K titer of F49 reached 1216 μg/mL.     

计算机辅助工艺设计的研究与应用

对几种不同含水率（湿基）的叶丝和未膨胀梗丝的填充值进行了测定，运用计算机和数理统计中的回归分析法，建立数学模型，找出二者之间的线性回归方程，结果表明烟丝含水率对烟丝填充值有很大影响；在不同含水率范围内，烟丝填充值与其含水率（湿基）呈线性关系，且斜率不同；不同部位的叶丝与梗丝的填充值随含水率的变化规律相似但不雷同。     

烟草薄层培养早期细胞核形态与核DNA含量变化的研究

通过应用ＤＮＡ专一性活体荧光染色剂Ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８对烟草茎表皮细胞薄层培养物的细胞核进行活体染色，发现在培养早期，细胞核发生了明显变化，由分化时的一般扁圆形和靠壁的位置逐渐变成圆形和居中的位置；核体积增大；染色质结构由致密变得疏松；而后染色质凝缩，发生无丝分裂；经数次分裂之后，细胞形态较一致，通过单细胞核内ＤＮＡ含量的测定，发现细胞分裂之前，核ＤＮＡ含量不增加；而最初几次分裂之后，含量减     

烟草尼古丁去甲基酶基因CYP82E4启动子结合蛋白的鉴定与分析

 以尼古丁去甲基酶编码基因（CYP82E4）上游的启动子功能元件作为诱饵,使用酵母单杂交方法从喷施乙烯利叶片的cDNA融合表达文库中钓取与之相互作用的结合蛋白.研究结果表明,诱饵载体pHIS2/pE4和cDNA融合表达载体pGADT7-Rec2共转化到酵母细胞中的效率为1×10⁶.对文库的筛选结果表明,本研究共获得39个阳性克隆,且阳性克隆的插入片段在850～2500bp之间.将获得的39个阳性克隆进行测序,其中发现1个可能参与基因(CYP82E4）表达调控的锌指蛋白转录因子.下一步将对其功能进行分析,为通过分子育种手段培养低含量去甲基尼古丁的烟草提供实验基础.     

基于嵌入式IPC的卷烟机电控系统设计

国内卷烟机电控系统大部分采用"PLC+高速处理板卡"架构,为了解决该架构稳定性较差的问题,提出了一种基于嵌入式IPC控制的电控系统架构。新架构基于嵌入式IPC高速、高性能的特点,将PLC逻辑控制与高速信号处理算法集成于同一平台,利用Ethernet总线控制技术实现外围子站的组态,从而解决原有多平台架构因兼容性差带来的稳定性问题。测试结果表明:新架构很好地解决了因多平台导致的故障误检误报、系统停机等问题,提高了设备的稳定性和生产效率。     

拮抗烟草疫霉菌的趋化性内生细菌筛选及其对烟草黑胫病的防效

以烟草疫霉菌为靶标，从3 000株烟草叶片内生细菌中筛选出拮抗菌483株，抑菌率在9.55%～55.96%之间.从这483株拮抗菌中筛选出11株趋化性内生生防细菌，鉴定为Brevibacillus brevis、Br.parabrevis、Br. formosus、Br. reuszeri、Pseudomonas aeruginosa、Ps. tremae、Ps. umsongensis和Erwinia rhapontici.温室试验结果显示，Br. brevis Hs8-19,Br. brevis Hs8-13和Ps. tremae Ht3-25单独使用时，对烟草黑胫病的防效分别为62.43%、57.67%和53.43%.当在菌液中添加终浓度为40μmol/L尼古丁时，Br. brevis Hs8-19,Br. brevis Hs8-13和Ps. tremae Ht3-25对烟草黑胫病的防效分别增加了6.11%、4.79%和4.72%.     

固氮菌在白肋烟上的应用

试验采用两种固氮菌肥与氮肥配合施用，用正交实验方法，探讨了各种肥料配比对白肋烟产量和产值的影响，结果表明：白肋烟每株施氮15g，肥力高牌菌肥2g，肥老大牌菌肥1g时能获得理想的产量和产值。     

链霉菌种间原生质体融合的研究(Ⅱ)——融合子56-2菌株的鉴定

通过金霉素链霉菌和龟裂链霉菌原生质体融合选育出的融合子５６－２菌株，其酯酶同工酶谱与双亲有显著差异，产抗生素能力及遗传稳定性均优于金霉素链霉菌３＃，发酵产物四环素符合中国药典的各项指标，并具有抗噬菌体Ｐ５，Ｐ８的能力。