抗心律失常药物筛选研究进展

抗心律失常药物治疗是心律失常的基础治疗,大规模随机双盲试验表明抗心律失常药物存在总有效率不高,致心律失常副作用和对患者生存率改善作用不佳等问题. 就抗心律失常药物发展历程、存在的问题、研究进展和药物发现的新策略进行综述。     

人LDHA原核表达、纯化及体外抑制剂筛选模型的建立

在多数肿瘤细胞中高度表达的乳酸脱氢酶A(LDHA)与肿瘤的发生、发展和预后密切相关,筛选LDHA小分子抑制剂可提供一种富有潜力的靶向抗肿瘤策略.本研究以pET-28a为载体,构建了人LDHA表达质粒并于大肠杆菌BL21(DE3)中稳定表达,产量达到2.65mg/L.基于LDHA的催化反应建立了以丙酮酸钠和还原型烟酰胺腺嘌呤二核甘酸(NADH)为底物的筛选模型.实验结果表明:模型的LDHA最适质量浓度为60ng/mL,以质量分数0.25%草酸铵为阳性对照,筛选模型的Z因子为0.812.至此,本研究建立了LDHA抑制剂体外生化筛选模型,其成本低、可操作性强,符合高通量筛选要求,为发现新颖的LDHA抑制剂奠定了基础.     

宏基因组技术及其在厌氧消化研究中的应用

在介绍基因（组）富集、基因（组）DNA提取、文库构建及筛选等宏基因组技术的基础上,论述了宏基因组技术在厌氧消化研究中应用的重要性,认为该技术可成为研究微生物群落多样性的首选技术之一,有助于了解厌氧消化微生物的多样性、生态功能和动态变化,揭示厌氧消化微生物学机理,提高厌氧消化效能等.同时宏基因组技术为微生物资源的深层次开发利用提供了技术平台,并在工业、农业、海洋等领域具有广泛的应用前景.     

基于动态效应的序贯分支验证仿真实验及应用

针对序贯分支仿真筛选实验中静态效应验证方法(V-SE)实验效率低且在仿真因子较多时实验效力难以保证的两方面不足,提出了基于动态效应(V-DE)和基于不重要因子(V-UF)的两种验证方法,V-DE在元模型估计中采用饱和设计并在配对检验中使用动态效应检验统计量,VUF仅对不重要因子的两组极端水平进行实验而不需估计元模型.蒙特卡罗仿真的三种方法对比实验以及基于实际背景仿真案例的应用表明,V-DE和V-UF在获得理想实验效力的同时极大提高了仿真实验的效率,大大降低了仿真工作者的实验成本,具有良好的实际应用价值.     

抗弓形虫噬菌体单链抗体库的构建及筛选

采用弓形虫可溶性抗原攻击的小鼠,取小鼠脾脏从中提取细胞总RNA,通过RT-PCR扩增鼠源抗体VH和VL基因,并采用重叠PCR (SOE-PCR)方法构建ScFv基因,将其克隆入噬粒载体pCANTAB5E中,转化于感受态大肠杆菌TG1,通过辅助噬菌体M13K07援救构建噬菌体单链抗体库.从20个噬菌体克隆中筛选到15个具...     

转化三七提取物为人参皂苷Rg3的真菌分离鉴定

从培养人参(Panar ginseng C.A.Meyer)的土壤中筛选出23株菌,分别进行三七(Panax Notoginseng)提取物转化实验.经过摇瓶发酵后,采用TLC法与HPLC法对其发酵液提取物进行分析.研究结果表明,能够转化三七提取物为高活性人参皂苷的微生物菌株有9株,其中以菌株TR-20的转化作用最强....     

高产胞外多糖红曲菌株的筛选及形态学鉴定

从浙江省各地采集到的红曲米中分离纯化得到111株红曲菌,通过摇瓶发酵实验初步筛选出胞外多糖产量在5.0 g/L以上的6株红曲菌,并对它们进行了形态学分类鉴定.通过3次重复液体发酵实验,结合平板上菌丝的生长速度和液体发酵菌丝体的生物量,最终筛选出一株胞外多糖产量高达5.28 g/L的红曲菌株MP-66.     

一株高产灵菌红素粘质沙雷氏菌的筛选与鉴定

通过筛选自然生境中的产色素菌株,从淡水鱼体中分离得到一株高产红色色素的Sm-128菌株.经形态观察、生理生化实验和16S rDNA基因序列分析,鉴定Sm-128菌株为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens).结合紫外吸收光谱及薄层色谱分析,证实Sm-128菌株所产色素为灵菌红素,粗品产量达475 mg/L.     

高效薄层扫描法测定乳粉中乳精和蔗糖的含量

用高效薄层扫描法，以正丙醇：浓氨水：术（１２：４：１）为展层剂，在λ＝３００ｎｍ处同时测定乳粉中乳糖、蔗糖，用该法测定乳糖与蔗糖回收率分别为１００．４％和１０４．５％，变异系数分别为３．２３％和１．５１％．     

辣椒疫霉菌拮抗细菌的筛选、鉴定及防效测定

从天津、河北、山东、山西、福建、河南及江苏等地蔬菜根际土壤中分离细菌1万余株,从中筛选出对辣椒疫霉菌Phytophthora capsici有明显拮抗作用的细菌802株,进一步用立枯丝核菌Rhizoctonia solani、番茄灰霉菌Botrytis cinerea及瓜果腐霉菌Pythium aphanidermatum为靶标筛选出对以上病原真菌有较好拮抗作用的菌株62株。对辣椒疫病防效温室盆栽实验结果表明,6个菌株防效在70%以上,其中菌株TB1340防效最高,达到82%。菌株TB1340生物学特性测定结果表明其具有较强的产生几丁质酶、纤维素酶和β-1,3-葡聚糖酶活性。经16S rRNA基因序列分子鉴定结合形态学观察,菌株TB1340被初步鉴定为芽孢杆菌Bacillus sp.。