临床分离MRSA中氨基糖苷类双功能修饰酶AAC(6)′-APH(2″)的克隆表达与活性测定

双功能酶AAC(6′)-APH(2″)是一种重要的氨基糖苷类抗生素钝化酶,从临床分离出的6株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的总DNA中克隆得到AAC(6′)-APH(2″)基因,将该基因插入质粒pET-28a中构建表达载体,然后将该重组质粒转入大肠杆菌BL21进行异源表达,在IPTG的诱导下产生大量可溶性目标重组蛋白,该重组蛋白经亲和层析分离纯化,SDS-PAGE鉴定纯度大于90%;建立了此双功能酶的体外测活方法,为建立氨基糖苷类抗生素双功能酶抑制剂筛选模型奠定基础.     

湘江四环素及抗性基因含量特征及其季节变化

采用高效液相色谱质谱法分析了湘江长沙河段水体及底泥中4种常见四环素类抗生素的含量特征及其季节变化,并采用实时荧光定量PCR研究了该水域相应的5种代表性抗生素抗性基因(tet A,tet C,tet G,tet M和tet X)的存在及丰度.结果表明,水体中四环素类抗生素的质量浓度均值在16.23~496.73ng·L-1之间,底泥中四环素类抗生素的质量分数为347.77~3 829.75ng·kg-1,易受季节变化影响.5种目标抗性基因在所有样品中均有检出,其中tet A和tet C的绝对拷贝数及相对丰度较高,为湘江长沙河段的优势抗性基因.相关性分析表明:冬季水体中的tet A和tet C含量与底泥中的含量显著相关,几种目标抗生素与抗性基因之间并不存在明显线性关系.     

核糖体晶体结构的研究历程——2009年度诺贝尔化学奖成果介绍

2009年度诺贝尔化学奖授予了美国科学家Venkatraman Ramakrishnan、Thomas A. Steitz和以色列科学家Ada E. Yonath,以表彰他们＂对核糖体结构和功能的研究＂。高分辨率的核糖体晶体结构使得人们能够在原子水平深入精确地理解核糖体的分子机制,并且为基于结构的合理化抗生素设计打下了坚实基础。以色列女科学家Ada E. Yonath是整个核糖体晶体结构研究领域的核心人物,她10多年坚持不懈地进行多种细菌核糖体的提纯与晶体生长工作,才使得核糖体高分辨率晶体结构解析成为可能。本文对2009年度诺贝尔化学奖的研究工作进行简要介绍。     

Spectrofluorimetric determination of tetracycline using Eu3+ chelation and cetyltrimethylammonium bromide

The fluorescence of tetracycline was greatly enhanced by chelation with Eu³⁺ in Tris-HCl buffer (pH8.5). The addition of cetyltrimethylammonium bromide, a cationic surfactant, further enhanced the fluorescence of tetracycline-Eu³⁺ chelates. This spectrofluorimetric method for the determination of tetracycline yielded a linear responses in the range of 10 nmol/L–10 μmol/L. The detection limit was 5 nmol/L (or 2.22 ng/mL). The recovery of tetracycline spiked in serum at levels of 1 and 0.09 μg/mL was 97.9% and 97.8%, respectively. This method is fast, sensitive and suitable for the determination of tetracycline in biological specimens. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China Biography: Huang Zu-yun (1963-), male, Ph D.     

樱桃离体培养中抗生素对细菌污染的抑制作用

采用不同浓度抗生素,头孢噻吩钠(Carb.)和羧苄青霉素(Cef.) ,处理继代培养中被细菌污染的樱桃试管苗.结果表明,随抗生素浓度的增加,试管苗的污染率和污染程度均降低,对试管苗生长的抑制逐步增强.在抗生素浓度100～200mg/L条件下,能有效的抑制细菌的生长繁殖,且对试管苗生长抑制不明显.     

城市剩余污泥基吸附剂对水中两种喹诺酮类抗生素的去除

以城市污水处理厂剩余污泥为原料, 通过HNO₃活化、NaOH活化以及H₂O₂氧化改性制备吸附剂(sewage sludge-based adsorbent, SSA), 研究其对水中环丙沙星(CIP)和洛美沙星(LOM)的去除及影响因素。采用扫描电子显微镜和傅里叶红外转换光谱对吸附剂表面形貌及官能团进行表征, 采用控制变量静态吸附实验方法, 考察吸附剂投加量、温度、溶液pH和离子强度等因素对吸附剂去除两种抗生素的影响。结果表明: 实验条件下, 经过0.1 M HNO₃活化后的改性吸附剂对两种抗生素的去除效果最好, 改性后吸附剂表面粗糙的结构可为抗生素的吸附提供更多的位点, 表面含氧官能团可以通过形成氢键增强对水中有机物的吸附。当抗生素浓度为10 mg/L时, 吸附剂对CIP和LOM的吸附量分别为8.95和7.28 mg/g, 最高去除率分别为90%和73%。吸附剂对CIP和LOM的吸附过程均符合准二级动力学方程, Langmuir等温方程能够很好地描述吸附剂 对两种抗生素的吸附行为, 主要为单分子层化学吸附。经5次循环使用后, 吸附剂对CIP和LOM的去除率仍可达84%和67%。研究结果可为抗生素污染控制提供一条经济有效的技术途径。     

水中磺胺类抗生素的光降解及富里酸对其光降解的影响

磺胺类抗生素是水环境中广泛存在的抗菌药物,光化学降解是其消减的重要途径.通过对两种磺胺类抗生素磺胺二甲基嘧啶和磺胺甲噁唑的光化学降解动力学研究,考察了其在纯水中的自敏化光降解过程以及溶解性有机物富里酸对其光化学降解的影响.结果表明,这两种磺胺类抗生素在纯水中的光化学降解反应均符合准一级动力学,但两者的自敏化光化学降解机理不同.水环境中富里酸浓度的大小会对其光化学降解产生重要影响:对于磺胺二甲基嘧啶,水中富里酸浓度较高(20,50,100mg/L)时会促进它的光降解,浓度较低时(2mg/L)不利于其光降解;对于磺胺甲噁唑,低浓度富里酸(0.2,2mg/L)会促进其光降解,高浓度富里酸(20,50,100mg/L)则抑制其光降解.     

The role of conjugative transposons in spreading antibiotic resistance between bacteria that inhabit the gastrointestinal tract

There is huge potential for genetic exchange to occur within the dense, diverse anaerobic microbial population inhabiting the gastrointestinal tract (GIT) of humans and animals. However, the incidence of conjugative transposons (CTns) and the antibiotic resistance genes they carry has not been well studied among this population. Since any incoming bacteria, including pathogens, can access this reservoir of genes, this oversight would appear to be an important one. Recent evidence has shown that anaerobic bacteria native to the rumen or hindgut harbour both novel antibiotic resistance genes and novel conjugative transposons. These CTns, and previously characterized CTns, can be transferred to a wide range of commensal bacteria under laboratory and in vivo conditions. The main evidence that gene transfer occurs widely in vivo between GIT bacteria, and between GIT bacteria and pathogenic bacteria, is that identical resistance genes are present in diverse bacterial species from different hosts.     

浙江师范大学医院门诊抗生素应用情况分析

对浙江师范大学医院抗生素的应用情况进行了统计分析,结果发现:(1)所用的抗生素价廉效佳,应用一种抗生素的处方占应用抗生素总处方数的76%,比较合理;(2)应用抗生素的处方数占处方总数的50%,有滥用抗生素的倾向;(3)抗生素的应用存在不合理的情况,如用量不足、应用过多、激素应用过多、联合用药不合理等.     

铜绿微囊藻对5种抗生素敏感性的研究

研究了铜绿微囊藻对链霉素、氯霉素、氨苄青霉素、G418和卡那霉素5种常用抗生素的敏感性．结果表明．铜绿微囊藻对这5种抗生素都较为敏感，其中尤以链霉素和氨苄青霉素的抑制效果最好，它们完全抑制铜绿微囊藻生长的浓度都不超过1．0μg／mL，而氯霉素、G418和卡那霉素对藻细胞的致死浓度也不超过10μg／mL．这说明5种抗生素均可作为铜绿微囊藻遗传转化的筛选压力．