大肠杆菌菌毛抗原K99基因的亚克隆及核苷酸序列测定

利用PCR技术 ,从含有大肠杆菌菌毛抗原K99基因的质粒pX5K中扩增出 0 .4kb的K99菌毛抗原基因 ,然后将其亚克隆到pGEM T easy载体上 ,并转化至受体菌JM10 9中 ,采用碱性裂解法提取质粒DNA后 ,经NcoI和EcoRⅠ双酶切分析和核苷酸序列分析 ,证明插入的K99基因片段具有正确的核苷酸序列     

马铃薯卷叶病毒中国株(PLRV-Ch)ORF2a基因3′端的克隆和序列分析

用设计合成的一对特异性引物，以马铃薯卷叶病毒中国株PLRV-Ch的RNA为模板，经反转录PCR扩增，将获得的ORF2a的3′端1kb cDNA克隆于pUCl9中，构建成重组质粒pLR7，经PCR检测、酶切检测，表明获得了ORF2a的3′端1kb cDNA克隆．从两端进行了两次序列分析，将获得的核苷酸序列与国外报道的四个PLRV分离株的相应区域的同源性进行了比较．结果表明它们具有高度同源性．文中对核苷酸中存在的可能移码序列及其下游的茎环结构(或假节结构)，以及上游特征性三次重复序列进行了分析和讨论，发现上游特征性三次重复序列连续排列可形成几个连续的互补双链区和发夹结构，这一结构可能与移码有关．     

马铃薯卷叶病毒中国株(PLRV-Ch)ORF2a基因5′端的克隆和序列分析

用设计合成的一对特异性引物,以马铃薯卷叶病毒中国株PLRV-Ch的RNA为模板,经反转录PCR扩增,将获得ORF2a的5′端0.6kbcDNA克隆于pUC19中,构建成重组质粒pLR8.PCR检测和酶切检测表明,获得了ORF2a的5′端0.6kbcDNA克隆,从该cDNA两端进行了两次序列分析,并将获得的核苷酸序列与国外报道的4个PLRV分离株的相应区域的同源性进行了比较,5个序列间具高度同源性.     

人类基因组中单核苷酸多态性(SNPs)的研究与应用

多数人类基因组的变异来自于单个核苷酸的置换,被称为单核苷酸多态性（SNPs）,其研究在基因定位,遗传疾病,生物的起源、进化及迁移等方面的理论研究中具有重大意义,本文就SNP的分类、特性、检测方法、应用及最新研究进展等方面的内容进行综述。     

Reaction dynamics between the photonuclease triplet-excited vitamin-K3 and guanine nucleotide

Nanosecond laser pulse photolysis was used to investigate the excited-state dynamics of the photonuclease vitamin-K3 (VK3). A spectral band peaked at 285 nm was newly observed and attributed to the triplet-excited state of VK3. In studying the photochemistry between the photonuclease VK3 and guanine nucleotide (dGMP), we obtained spectroscopic evidence for the photo-initiated formation of both VK3 radical anion and dGMP radical cation, and thus proved the charge transfer reaction between the triplet-excited VK3 and the ground-state dGMP.     

分子进化的几个普适性质全国理论生物物理研讨会(武汉,1999)上的报告

第２ 至第６ 节为全国理论生物物理研讨会（武汉,１９９９）上的报告,论述了分子进化中的５ 个普适性质：分子手性,遗传密码,核苷关联的短程为主性及其进化相关性,以最大信息原理概括突变和选择的进化机制,由二维结构序列决定的蛋白质框架结构．第一节为作者在开幕式上致词的一部分,讨论了理论生物学在生命科学中的地位与作用,特应听众要求,发表于此．     

Integration of rolling circle amplification and cationic conjugated polymer for the homogeneous detection of single nucleotide polymorphisms

A novel, homogeneous and sensitive assay for the detection of single nucleotide polymorphisms (SNPs) by integration of rolling circle amplification (RCA) and cationic conjugated polymer (CCP) has been developed and tested. Mutant DNA serves as the template for specifically circularizing a padlock probe (PLP) with a sequence that is complementary to the mutant DNA. Afterwards, the mutant DNA directly acts as the primer to initiate the RCA reaction in the presence of phi29 DNA polymerase that generates a long, tandem single-strand DNA product. During the RCA reaction, fluorescein-labeled dUTPs are incorporated into the RCA products. When the CCP is introduced, efficient FRET from CCP to fluorescein occurs as a result of the strong electrostatic interactions between the CCP and the DNA produced by RCA. The wild-type DNA contains a single base mismatch with PLP with the result that the PLP is not circularized, RCA is not triggered and inefficient FRET results. By measuring the change of the emission intensities of CCP and fluorescein, it was possible to detect the SNP in a homogeneous manner. The method is sensitive and specific enough to detect 0.1 pmol/L mutant DNA and to determine a mutant allele frequency as low as 2.0%.     

甲状腺素对金黄地鼠肝LDL受体影响的研究

报道了甲状腺素对金黄地鼠血脂和肝ＬＤＬ受体的影响，探讨了甲状腺素降低血清脂质的机制．雄性金黄地鼠３０只随机分为对照组和甲状腺素组，前者喂基础饲料加０．１２％的胆固醇，后者再加喂０．１０％的甲状腺素．３５天后，测定血脂和肝脏ＬＤＬ受体．结果表明，与对照组相比，甲状腺素组血清ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ－Ｃ和ＶＬＤＬ－Ｃ均明显下降，ＨＤＬ－Ｃ虽有升高，但尚无显著性差异．体外结合实验发现，甲状腺素组金黄地鼠肝匀浆与１２５Ｉ－ＬＤＬ的特异性结合位点（３８．０３±１．０３ｎｇ１２５Ｉ－ＬＤＬ／ｍｇ肝匀浆蛋白）显著高于对照组（２６．２０±１．９２ｎｇ１２５Ｉ－ＬＤＬ／ｍｇ肝匀浆蛋白），而１２５Ｉ－ＬＤＬ与两组动物肝匀浆蛋白结合的亲和力无明显差异，提示甲状腺素降低血脂与肝ＬＤＬ受体增加密切相关．     

肌动蛋白的聚合动力学研究进展

肌动蛋白的聚合和解聚动力学过程与其功能的行使有密不可分的关系:肌动蛋白如要在细胞内行使其功能就一定涉及到其聚合动力学过程.肌动蛋白的聚合过程可分为4个步骤:肌动蛋白单体的活化;肌动蛋白单体聚合成核;肌动蛋白纤维生长的过程;聚合达到动态平衡,肌动蛋白纤维不再生长.一些影响肌动蛋白聚合过程的因素,比如,核酸和肌动蛋白相关蛋白也在文中做了讨论.其目的在于更深入地了解生物大分子如何组装成更复杂的体系以及这些体系在细胞中怎么行使功能.