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81.
报道了Ce离子对人工设计合成的26bp的单链OligoDNA的水解断裂作用.Ce(Ⅲ)需要有氧气存在的条件下,氧化生成Ce(Ⅳ)后才能切断OligoDNA,系统研究了各种条件下Ce(Ⅳ)对OligoDNA的切断反应,在酸性、碱性条件下都能水解切断OligoDNA,在近中性时切断作用最强。随着反应温度的升高、浓度的增大大反应时间的延长,切断反应越来越明显,并提出了反应机理,建立了用变性聚丙烯酰胺胺凝 相似文献
82.
83.
K2S2O8-luminol 化学发光体系检测银纳米粒子寡聚核苷酸探针研究 总被引:1,自引:1,他引:0
实验将3' 端修饰巯基的寡聚核苷酸标记在纳米银粒子上,并基于银纳米粒子溶解后产生的 Ag+对K2S2O8-luminol 化学发光体系的催化作用,对标记寡聚核苷酸的银纳米粒子进行了定量检测.探讨了各种实验条件对该体系的影响并建立了最佳分析条件.其线性范围为5×10-9~1×10-6 g/mL,检出限(3σ)为2.0×10-9 g/mL.该方法操作简便,灵敏度高,为进一步的DNA杂交分析提供了一种新的检测手段. 相似文献
84.
目的研究人类及部分实验动物DRB3.2基因核苷酸序列的同源性。方法利用PCR技术扩增得到牛的DRB3.2基因片段,并测定其核苷酸序列;从GenBank中下载人类、猕猴、绵羊、山羊、猪的相应基因片段;利用DNAMAN软件进行碱基组成分析、同源性分析和构建分子进化树。结果所分析的物种该基因片段大小为267bp,没有发现碱基的缺失以及插入现象;A、T、G、C四种碱基以及G+C的含量在不同物种之间相差较小。就某种动物来说,G的含量最高,T的含量最低,G+C的含量要明显高于A+T含量;人类与猕猴、绵羊、山羊、牛、猪的同源性分别为91.8%、82.8%、82.4%、81.3%、81.6%。结论不同物种MHC-DRB3.2基因核苷酸序列的同源性都比较高;在研究人类有些疾病时,猕猴是其它实验动物不可替代的;DRB3.2基因是研究生物进化和系统发育分析的一个理想遗传标记。 相似文献
85.
GST酶的提取纯化及特性分析 总被引:4,自引:0,他引:4
通过硫酸铵分级盐析、Sephadex G-25 脱盐、A-25柱层析、丙酮沉淀、Sephadex G-75及Sephadex G-200等一系列分离纯化手段,从小麦幼穗抽提液中分离得到了电泳纯的谷胱甘肽转移酶.结果表明,1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)浓度变化的体系中,该酶表观Km=10.42 nmol/L;谷胱甘肽(GSH)浓度变化的体系中,表观Km=299 μmol/L. 相似文献
86.
CRISPR/Cas9系统在植物遗传改良及功能基因研究中有着非常重要的作用。本研究中,根据拟南芥糖基转移酶家族中同工酶UGT79B2/79B3的前体序列,设计针对靶基因UGT79B2/79B3的特异的sgRNA引导序列,构建ugt79b2/79b3-Cas9双突变植物表达载体,并转化到根癌农杆菌GV3101中。将含有目标载体的GV3101活化后,花浸染法浸染拟南芥。以后代阳性株系DNA作为模板,送公司测序。99株阳性转基因株系中分子鉴定发现有24株发生突变,其中只有1株发生ugt79b2/79b3双突变。该研究结果为拟南芥糖基转移酶ugt79b2/79b3突变体的功能开发提供了基础研究与方法支持。 相似文献
87.
分别从金皮F2代猪的肝脏、第十肋背最长肌中提取总RNA,并根据报道的猪L-CPT ⅠcDNA和M-CPT Ⅰ cDNA序列分别设计引物1和引物2,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得两条长度分别为733 bp和510 bp的片段,克隆于pUCm-T Vector后进行序列分析.结果表明,长度为733 bp的片段为L-CPT Ⅰ基因cDNA的部分序列,编码243个氨基酸,而长度为510 bp的片段则为M-CPT Ⅰ基因cDNA的部分序列,编码169个氨基酸.得到的两条基因片段与报道的猪L-CPT Ⅰ cDNA和M-CPT ⅠcDNA部分序列同源性分别为99.59%和99.61%. 相似文献
88.
将野油菜黄单胞菌(Xanthomonascampestris)NRRL-B-1459菌株的缩酮丙酮酸转移酶基因,在pRK2073辅助质粒的协助下,经三亲本接合法,导入野油菜黄单胞菌NK01小菌落的抗性突变株(NK01·S·1)中,测定各接合子的产胶率、黄原胶粘度及丙酮酸含量,得到一系列优于原始菌株的接合子,其中四株的产胶率、丙酮酸含量及黄原胶粘度分别较出发菌株提高7.28~10.60%、40.24~41.42%和10.79~22.30%. 相似文献
89.
根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSET A的BamH I和EcoR I位点,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTC诱导获得高效表达,SDS—PAGE蛋白电泳表明在39.9kD处出现超强特异带,占总蛋白的51%。以Ni-NTA-Conjugate抗体进行Western blot分析证明该39.9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western blot检测结果显示,该抗体与表达的融合蛋白和嗜水气单胞菌中提取的36.9kD外膜蛋白均呈阳性反应,表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性,从而为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论依据。 相似文献
90.