猕猴桃种间体细胞杂种细胞质DNA遗传的初步分析

提取猕猴桃体细胞杂种叶片总DNA,PCR和限制性内切酶,分析了叶绿体基因组的trnT(UGU)和5'trnL(UAA)外显子之间的a～b间隔区DNA片段和光合系统Ⅱ D1蛋白基因(psbA)片段,以及线粒体基因组的ORF25片段的遗传特征.结果表明,狗枣猕猴桃(A.kolomikta)与中华猕猴桃(Actinidia chinensis)的对称体细胞杂种具有与中华猕猴桃相同的a～b间隔区DNA片段,叶绿体DNA遗传为非随机分离.还讨论了cpDNA遗传与猕猴桃种间的亲缘关系.     

Hybrid plant regeneration from interfamilial somatic hybridization between grapevine (vitia vinifera L.) and Red Thorowax (Bupleurum scorzonerifolium willd)

The protoplasts of Red Thorowax ( Bupleurum scorzonerifolium) irradiated by ultraviolet light (UV) at an intensity of 260μW/cm2 for 0, 1,2 and 3 min respectively were fused with that of grapevine ( Vitia vinifera). The regenerated 19 clones, every one derived from a single fused cell, were identified as hybrids by phenotype, isozyme, chromosome and 5S rDNA spacer region analysis. The results reveal that all of them are somatic hybrids. 11 hybrid calli including asymmetric and symmetric products regenerated somatic embryos and young leaves after 5 months of culture, of which 4 hybrid cell lines derived from asymmetric fusion regenerated plants with roots after 8-10 months of culture. Inspection of chromosome showed that regeneration of whole plant was related to the decrease of chromosome number. Identification of 5S rDNA spacer region of the plants confirmed that they were interfamilial hybrid plants.     

影响体细胞核移植重构胚发育的因素

目前已有多种动物被成功克隆,但存在着诸多未知因素,使体细胞核移植重构胚发育至囊胚阶段的比例过低,克隆动物存在早衰等异常现象.该文围绕这产生这些现象的根本原因、高度分化的体细胞核移入卵质后所发生的分子事件以及其影响因素如体细胞的来源和培养代数、细胞周期、核质相互作用、细胞核再程序化、线粒体等方面对体细胞核移植重构胚发育的影响等进行综述.     

外源激素对防风体细胞胚发生和发育的影响

目的探讨生长素和细胞分裂素对防风体细胞胚发生和发育过程的影响。方法组织培养和石蜡切片。结果0．5mg／L2，4-D是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度，0．5mg／LNAA在胚性愈伤组织的长期继代培养中替代0．5mg／L2，4-D可减少畸形胚的发生，NAA浓度降至0．2mg／L时促进体细胞胚的发生和分化；生长素加一定比例的细胞分裂素(6-BA或KT)可有效促进体细胞胚的发生；通过逐步降低生长素和细胞分裂素的浓度，可促进体细胞胚的分化和生长；体细胞胚在无附加激素或附加激素浓度分别低于0．2mg／LNAA和0．5mg／L6-BA的MS培养基上，均能发育成完整的植株。结论一定浓度的生长素是诱导防风胚性愈伤组织的关键因素，细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起协同作用。     

紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育条件研究

本文通过组织培养方法,探讨生长素和细胞分裂素在紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育过程中的作用。结果表明0.5mg/LNAA是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度,添加一定比例的6-BA可有效促进体细胞胚的发生;在附加激素浓度分别低于0.1mg/LNAA和0.5mg/L6-BA的MS培养基上,体细胞胚能发育成完整的植株。因此,一定浓度的生长素是诱导紫叶酢浆草胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起增效作用。     

欧当归原生质体再生植株

从继代后3～5天的欧当归幼叶胚性细胞悬浮系游离的原生质体,分别以KM8P、MS、改良MS、NT、D2、DPD及B5为基本培养基进行浅层液体培养,以改良MS进行平板培养和固液双层培养。在激素组合和浓度(2.4-D0.2mg/l,KT0.5mg/l,NAA1.0mg/l)及渗透稳定剂(0.5M甘露醇)相同的条件下,在KM8P中的植板率(40％)显著高于其它培养基中的植板率(0—15％)。在KM8P中(0.35M葡萄糖作渗透稳定剂),不同激素组合及浓度植板率不相同,上述激素组合中最高(50％)。葡萄糖作渗透稳定剂时0.3M优于0.4M,同时优于相同浓度的甘露醇和蔗糖。改良MS浅层培养和双层培养植板率几乎相同(15％),而平板培养银低(1％)。在KM8P中(激素同上,0.35M葡萄糖,CH250mg/l,CM 10ml/l),25天后原生质体形成肉眼可见的小愈伤组织。及时转移到固体愈伤组织增殖培养基上,诱导出胚性和非胚性两种愈伤组织,分别转移到分化培养基上后,两者分別通过体细胞胚胎发生和器官发生途径获得了完整再生植株。     

水稻籼粳杂种多倍体的研究

以秋水仙碱诱导的水稻籼粳杂多倍体植株中，部分植株的体细胞呈现具有整倍体和非整倍体染色体数细胞嵌合现象，其中四倍体细胞最高可占35．3％，其余均为染色体数低于48条的各种细胞，与二倍体植株相比，这些植株的叶表皮气孔增大，气孔数减少，花粉粒直径增大都是十分显的，与多倍体植株无明显区别，并对这类植株根尖体细胞中存在具各种染色体数目细胞嵌合现象可能的原因进行了分析。     

番木瓜胚珠高频率体胚发生和植株再生

将番木瓜(Carica papaya L.)受精胚珠接种于MS IAA1mg/L BA2mg/L GA_3 2mg/L S(蔗糖)3％和1/2MS 谷胺酰胺400Mg/L CW(椰子汁)20％ S6％的培养基中,诱导愈伤组织,愈伤组织继代培养于MS CW 2％ S6％ 2.4-D 2mg/L的培养基上。进行了几种激素配比和基本培养基(MS和改良MS)对诱导胚性愈伤组织、体胚发生和植物再生培养基的比较实验。结果表明:在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L BA 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％培养基中获得理想胚性愈伤组织和体胚,在改良MS 硫酸腺嘌呤160mg/L NAA 1mg/L KT 0.5mg/L GA_3 1mg/L S4％产生正常具三裂片和根系的小植株。进行番木瓜体胚包埋、制成人工种子,实验获得小苗,并移栽成功。     

紫花苜蓿高频体细胞胚与次生胚再生体系的建立

通过系统地对紫花苜蓿体细胞胚发生以及次生胚发生途径中若干影响因子的比较研究,建立了紫花苜蓿高频体细胞胚和次生胚再生体系.结果表明,体细胞胚再生体系及次生胚再生体系均具有严格的基因型依赖性,不同的品种间以及同一品种内的不同株系间再生频率存在较大差别;MSO培养基可作为胚状体成苗培养基,但次生胚在MSO培养基中成苗率较低而再次形成新的胚状体;改良无激素SH培养基可有效终止次生胚的发生,并诱导次生胚成苗.此外,从6个紫花苜蓿品种中筛选到3个具有较强胚状体再生能力的品种,6个高胚状体发生能力的株系,2个具有较强的次生胚发生能力的株系,为进一步的遗传转化奠定了基础.