Small heat shock proteins: molecular structure and chaperone function

Small heat shock proteins (sHSPs) associate with nuclei, cytoskeleton and membranes, and as molecular chaperones they bind partially denatured proteins, thereby preventing irreversible protein aggregation during stress. sHSP monomers consist of a conserved α-crystallin domain of approximately 90 amino acid residues, bordered by variable amino- and carboxy-terminal extensions. The sHSPs undergo dynamic assembly into mono- and poly-disperse oligomers where the rate of disassembly affects chaperoning. The α-crystallin domain contains several β-strands organized into two β-sheets responsible for dimer formation, the basic building block of most sHSPS. The amino-terminal extension modulates oligomerization, subunit dynamics and substrate binding, whereas the flexible carboxy-terminal extension promotes solubility, chaperoning and oligomerization, the latter by inter-subunit linkage. Crystallization studies have revealed sHSP structure and function. Additionally, site-directed mutagenesis, biophysical investigations, functional studies and the discovery of relationships between mutated sHSPs and diseases have illuminated the role of sHSP within cells. Received 8 May 2005; received after revision 24 June 2005; accepted 19 July 2005     

辣椒抗菌蛋白cDNA的分离与表达的初步分析

本研究从经辣椒疫霉侵染处理的辣椒叶片cDNA文库中分离获得了一个辣椒抗菌蛋白cDNA阳性克隆,其长度为255bp,含有长度为85个氨基酸的开放读码框架,与其它植物抗菌蛋白或几丁质酶有不同程度的同源性,推测为辣椒抗菌蛋白,命名为CansLTPS.cDNA-AFLP分析表明,CansLTPS的转录受UV-B照射和辣椒疫霉侵染的诱导,外源脱落酸(ABA)、乙烯(ETH)、水杨酸(SA)等可不同程度的诱导CansLTPS基因的转录,而MeJA处理对CansLTPS基因的转录表达影响不大,表明CansLTPS基因可应答生物和非生物逆境胁迫,其上游可能涉及ABA、ETH、SA等介入的信号传递途径.     

流动注射分光光度法测定蛋白质的含量

在pH2.20的Clark-Lubs缓冲介质中,刚果红与蛋白质作用,在室温下能迅速结合形成复合物,其最大吸收波长为500nm.用流动注射分光光度法研究了该结合反应的最佳条件,并在此基础上建立了测定蛋白质的新方法.检测牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HAS)的线性范围均为2～90μg.mL-1,检测限分别为0.42μg.mL-1和0.44μg.mL-1,测定频率达65次.h-1.本方法具有简便、快速、选择性好、灵敏度高等特点,应用于尿液及人血清中总蛋白的测定,结果与考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

基于SVM的革兰氏阴性菌分泌系统蛋白识别方法

本文提出了一种基于SVM快速识别革兰氏阴性菌分泌系统蛋白的方法.该方法以氨基酸组成和位置特异性得分矩阵为最优特征集,充分考虑了蛋白质的序列信息及进化信息.实验结果表明,本文提出的方法对革兰氏阴性菌分泌系统蛋白具有较好的预测性能,可作为细菌分泌系统研究的有益补充.     

蒙古沙冬青根蛋白的提取及双向电泳体系的建立

以蒙古沙冬青根为实验材料,采用TCA/丙酮沉淀法和Tris-饱和酚提取法分别提取根可溶性蛋白.用Bradford法测定蛋白质浓度,计算蛋白提取率,并对所提取的蛋白样品进行双向电泳检测及电泳体系优化.结果表明,选择Tris-饱和酚法提取蛋白,采用24cm、pH5～8的IPG胶条,上样量900μg,可获得分辨率高、重现性好的双向电泳凝胶图.     

爱滋病病毒全序列回文结构的研究

统计分析了爱滋病病毒全序列中中间间隔S从0到100、侧翼序列长度L从4开始的所有回文结构,通过分析不同S、L的回文结构的频数以及AT含量,发现回文结构的AT含量普遍高于全序列的AT含量.有三种辅助蛋白(Vif、Vpu、Nef)存在于病毒颗粒内,我们找出编码这三种蛋白的DNA序列,并统计出它们的回文结构,分析它们的AT含量及回文数密度(平均每1000个碱基中包含的回文数),并与丙型肝炎病毒序列回文结构进行对比.发现编码Vpu (HIV-1特有的蛋白)蛋白序列的回文结构在AT含量,和回文数密度方面均显示其特性.由此推测高AT含量的回文结构在HIV-1中起到重要作用.     

温敏型分子印迹量子点生物传感器用于检测牛血红蛋白

制备了一种基于分子印迹量子点的温敏型生物传感器(QD@MIPs),用于牛血红蛋白(BHb)的快速检测.实验结果表明,制备的QD@MIPs对BHb具有快速的荧光响应,吸附平衡时间为15 min.在最优条件下,BHb的荧光猝灭与其浓度成正比,在0.15～2.30μmol/L的浓度范围内有良好的线性关系,相关系数为0.986 9,检出限为0.097μmol/L.此外,制备的QD@MIPs具有温敏性质,这一特性使其在生物分析中可以通过改变温度快速吸附和释放模板蛋白.     

大脑两半球机能不对称性在汉字辨认中的特点

针对汉字在来源、结构等方面的特点,作者全面地选取了包括等量名词及虚词性的单个汉字和包括等量具体名词和抽象名词的双字词为刺激材料,采用中性刺激物阿拉伯数字为对照刺激材料,以刺激材料的不同呈现时间,应用半视野速示技术深入探讨中国人对汉字辨认的大脑两半球机能特点.对150名右利手的大学生的研究结果表明:尽管呈现时间不同(100、50、20、10、5ms).但对左、右视野单侧呈现的单个汉字、双字词及阿拉伯数字的正确辨认率均无显著性差异.这表明对汉字的辨认大脑两半球的功能是均势的.本文讨论认为它是由汉字特点及汉字信息处理的特殊方式所致.     

硫酯蛋白家族保守区域分析

硫酯蛋白家族(thioester-containing proteins,TEPs)广泛分布于动物界,在动物非特异性免疫反应中发挥了重要的作用,然而其家族成员多,分子进化关系复杂.本研究从基因数据库中挑取已收录TEPs家族各成员的氨基酸全序列,包括α2-巨球蛋白、补体3、补体4、murinoglobulins、卵巨球蛋白、妊娠区带蛋白,α-1-抑制因子等.多重序列比对分析TEPs家族各成员间功能位点和保守区域的变化,构建系统进化树分析TEPs家族分子进化.TEPs家族除保守的GC*EQ**硫酯键区域及两侧的脯氨酸残基,还有7个完全保守的氨基酸残基及G*****Q*T,FPETW,QTD,KPTVK等保守区域.上述分析结果可为深入研究TEPs家族分子进化及动物非特异性免疫进化提供参考.     

配电变电站典型接线的可靠性非同调元件辨识

由于配电变电站接线形式、断路器等设备可靠性参数及负荷水平等因素,电力系统中可能存在可靠性非同调元件。辨识出可靠性非同调元件并使其退出运行可有效改善系统可靠性。给出了配电变电站可靠性非同调的定义,以及可靠性非同调概率、频率及非同调电量等指标用以描述系统的可靠性非同调程度,基于变电站电气主接线可靠性评估原理给出配电变电站非同调元件辨识方法。理论分析和算例表明：配电变电站高压侧母联断路器在单台变压器容量满足负荷需求时可能成为可靠性非同调元件,且断路器等设备可靠性参数对系统可靠性非同调特性具有一定影响。