全文获取类型
收费全文 | 729篇 |
免费 | 36篇 |
国内免费 | 107篇 |
专业分类
系统科学 | 1篇 |
丛书文集 | 15篇 |
教育与普及 | 4篇 |
理论与方法论 | 4篇 |
现状及发展 | 26篇 |
综合类 | 822篇 |
出版年
2022年 | 10篇 |
2021年 | 5篇 |
2020年 | 9篇 |
2019年 | 11篇 |
2018年 | 5篇 |
2017年 | 14篇 |
2016年 | 11篇 |
2015年 | 17篇 |
2014年 | 26篇 |
2013年 | 27篇 |
2012年 | 34篇 |
2011年 | 45篇 |
2010年 | 25篇 |
2009年 | 49篇 |
2008年 | 44篇 |
2007年 | 50篇 |
2006年 | 53篇 |
2005年 | 49篇 |
2004年 | 61篇 |
2003年 | 46篇 |
2002年 | 51篇 |
2001年 | 43篇 |
2000年 | 50篇 |
1999年 | 25篇 |
1998年 | 23篇 |
1997年 | 15篇 |
1996年 | 9篇 |
1995年 | 13篇 |
1994年 | 11篇 |
1993年 | 5篇 |
1992年 | 8篇 |
1991年 | 6篇 |
1990年 | 7篇 |
1989年 | 5篇 |
1988年 | 4篇 |
1987年 | 1篇 |
1986年 | 3篇 |
1985年 | 2篇 |
排序方式: 共有872条查询结果,搜索用时 484 毫秒
261.
原核表达载体pHsaE1αβ的构建和人丙酮酸脱氢酶的表达与纯化 总被引:1,自引:1,他引:0
以质粒pQE9为原型载体, 将编码hPDH的α和β亚基的cDNA串联克隆到该载体上,
成功地构建了hPDH基因的表达载体pHsaE1αβ. 并在大肠杆菌中表达了hPDH, 通过
亲和层析法进行纯化, 对一些生物化学性质进行表征. 相似文献
262.
牛β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,BLG)启动子控制人生长激素(h GH)基因的表达载体p BLGH62可以在转基因小鼠的乳腺上皮细胞中高效表达.为了探索利用此表达载体在培养的细胞中生产人生长激素的可能性,将p BLGH62转染非乳腺细胞-人胚肾293细胞用胰岛素、地塞米松和催乳素进行诱导.结果显示,在细胞培养液中检测到人生长激素,说明p BLGH62能在293细胞中表达并能分泌到细胞外.但是,激素诱导对表达量的影响不明显.此外,人生长激素基因存在着可变剪接现象. 相似文献
263.
264.
通过EMS诱变获得一个拟南芥突变体shrunken pollen grain1,spg1.根据横切片的观察结果,与野生型相比较,突变体观察到异常的花粉粒.遗传学的实验表明:spg1突变现象由一个隐性的单基因控制.通过图位克隆的方法,spg1突变位点定位在3号染色体的分子标记3-AL138638-6632和3-AL353865-6814之间大约427kb的区间内.生物信息学的分析表明,在这个区间内没有任何已知的与育性相关的基因.以上结果说明SPG1是一个控制拟南芥雄性不育的新基因. 相似文献
265.
利用PCR技术扩增了SHV-12 ESBLs目的基因,并将目的基因亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-SHV-12转化于表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳分析.结果表明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相对分子质量为30 KDa,经蛋白质印迹检测证... 相似文献
266.
转化生长因子β1(TGF β1)是一种高度保守的多效细胞因子。通过分子克隆得到了斜带石斑鱼Epinephelus coioidesTGF β1 cDNA全长序列,全长为2 477 bp,开放阅读框为1 161 bp,编码一种含386个氨基酸的多肽。Realtime PCR分析表明,TGF β1基因在健康斜带石斑鱼所取组织中均有表达,肾脏中表达最高,其次是头肾和脾脏。用PolyI:C或ConA刺激斜带石斑鱼头肾淋巴细胞,TGF β1表达量明显上升,且在刺激4 h后达到最高值。用PolyI:C刺激16、24 h后,TGF β1几乎不表达,而用ConA刺激实验组,TGF β1表达量一直高于对照组。结果说明,斜带石斑鱼TGF β1基因结构和表达特征与其他硬骨鱼类具有高度相似性。 相似文献
267.
利用单一特异引物聚合酶链反应技术,将马铃薯DNA中天冬氨酸蛋白酶抑制剂家族一成员的5′上游区分离,并克隆进pUC18质粒SmaI位点中.用32P中标记的单一特异引物──PrimerA为探针,经斑点杂交得一阳性克隆.DNA测序获得含有马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因5′上游区的插入物的核苷酸序列.从这序列结构中见到TA富含区,并发现典型的调控序列TATA和CAAT.此上游序列与国外所得到的天冬氨酸蛋白酶抑制剂的上游区相比较在序列和TATA及CAAT盒的位置上有着很大的不同. 相似文献
268.
短柄五加(Acanthopanax brachypus)rbcL基因的结构分析 总被引:2,自引:0,他引:2
克隆了含完整短柄五加rbcL基因的3.2kb EcoRI片段,测定了该基因的核苷酸序列.所测核苷酸序列总长度为1924bp,其中编码区1428bp,编码475个氨基酸的蛋白质.测定的基因5’上游区共278bp,包含原核性质-35区(TTGCGC),-10区(TACAAT)及类似真核的TATA box元件(TATATA).5’前导区长194bp,其中SD序列为GGAGG,紧邻起始密码子上游.测定的3’下游区共218bp,含2个相邻的转录后可形成茎环结构的反向重复序列.短柄五加rbcL基因编码区推导的氨基酸序列与烟草、菠菜、豌豆、苜蓿、玉米、水稻、松树、地钱、衣藻和Anacystis的同源性分别为93.5%、94.11%、94.53%、94.74%、89.68%、92.21%、92.21%、92.63%、87.58%和80.84%.本文还对不同植物rbcL基因的启动区及部分5’和3’非编码区进行了比较分析. 相似文献
269.
木聚糖酶Ⅱ(Xylanase Ⅱ)是瑞氏木霉中两种主要的内切木聚糖酶之一.序列分析显示其1.1kh的启动子区含有多种丝状真菌转录因子结合位点,可受多种激活因子、抑制因子、增强子的转录调控.以编码β-葡糖苷酸酶(GUS)的E.coli uidA基因为报告基因,分别与木聚糖酶Ⅱ启动子及功能区(-312~-1080)缺失启动子融合,构建报告质粒pXIIPU与pXIIP△EXU,引入瑞氏木霉蛋白酶缺陷株Trichoderma reesei RutC30U4.先后对转化子进行发酵实验,测定GUS活性。结果显示功能区-312~-1080缺失后的启动子活性是原启动子活性的19%.结果表明在缺失的木聚糖酶Ⅱ启动子-312~-1080区仍存在调节转录活性的顺式作用元件,值得进一步研究. 相似文献
270.
利用DNA重组技术,将杆状病毒极早期基因iel启动子基因克隆至重组质粒pGEM-Se39中,成功地构建了重组真核表达质粒pGEM-IE1-Se39。 相似文献