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181.
Si3N4/TiN纳米多层膜的超硬效应 总被引:11,自引:0,他引:11
采用磁控反应溅射工艺制备了Si3N4/TiN陶瓷纳米多层膜,运用X射线衍射、航向电镜和显微硬度仪等对纳米多层膜的微结构、应力状态和硬度进行测试。研究结果表明,Si3N4/TiN多层腹中,Si3N4层为非晶态,TiN层为晶态,Si3N4/TiN多层膜的显微硬度既受调制周期^的影响,同时又与调制比有关,当调制比lsi3N4/lTiN=3和调制周期^=12.0nm左右时,多层膜的显微硬度达到最大值,其数 相似文献
182.
细胞神经网络(CNN)设计的关键是找出其模板参数(Cloning template),所提出的一种基于遗传算法的细胞神经网络模板设计算法,经实验证明是可行的. 相似文献
183.
盐生盐杆菌含耐盐相关基因DNA片段的克隆 总被引:3,自引:0,他引:3
将盐生盐杆菌总DNA的BamHI不完全酶切片段与质粒pUC19连接成重组质粒,并以重组质粒转化E.coli JM101.经X-Gal-IPTG法筛选白色重组子,结合高盐平板检测,已经获得了3株比原受体菌的耐盐性提高30%-67%的转化子。重组质粒酶切电泳分析表明,被克隆的盐生盐杆菌含耐盐相关基因的DNA片段长度在1.0-3.5kb之间。 相似文献
184.
扩展青霉碱性脂肪酶cDNA的克隆和表达 总被引:2,自引:0,他引:2
采用TRIzol试剂一步法所抽提的总RNA的D(260)/D(280)值为1.82,甲醛变性电泳呈现真核微生物所特有的28S rRNA和18S rRNA条带。根据扩展青霉所产碱性脂肪酶(Lip PE)N末端20个氨基酸残基序列和真核生物mRNA3‘端具有poly(A)等所提供的生物信息,采用RT-PCR技术和3‘-RACE法扩增了Lip PE成熟肽编码区和3‘非编码区的cDNA,直接将该PCR产物克隆至pUCm-T载体中。序列分析表明,该碱性脂肪酶含有258个氨基酸,其中保守的五肽序列为Gly-His-Ser-Leu-Gly。进一步采用Clot Tech公司的SMART^TM PCR cDNA文库构建试剂盒,扩增、克隆和测定了自转录起始点至编码区的cDNA片段,从而完成了Lip EP完整cDNA的分析测定。最后将编码完整脂肪酶蛋白的cDNA克隆至pGEX-5X-3表达载体中,在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测结果表明,所表达的GST-Lip EP融合蛋白分子质量约为53ku;免疫印迹(Western Blotting)技术证明了所克隆的cDNA确为编码扩展青霉WMC20718脂肪酶的基因。 相似文献
185.
植物甜蛋白thaumatin基因重组表达质粒的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
利用NDA重组技术,将植物甜蛋白thaumatin基因克隆至植物表达载体pBI121中,成功地构建了重组植物表达质粒pBI121-th。 相似文献
186.
187.
188.
Cloning and expression analysis of human reticulon 4c cDNA 总被引:2,自引:0,他引:2
189.
190.
定点突变内皮抑素Zn2+的结合位点及突变基因的克隆表达 总被引:1,自引:1,他引:0
从人胚肝组织中提取总RNA, 以逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法获得人内皮抑素编码序列, 采用定点突变技术将His2和His4双突变为Leu2和Val4. 将突变基因cDNA插入含有T7启动子的质粒pET-28b中构建表达质粒pMendo, 转化大肠杆菌BL21(DE3), 筛选表达菌株BL21-Mute, 表达菌株经IPTG诱导后以包涵体方式产生大量内皮抑素突变蛋白. SDS-PAGE分析表明, 表达的重组蛋白占菌株可溶性蛋白质的30%. 复性、 纯化的内皮抑素突变蛋白纯度达到98%, 失去抑制人脐静脉内皮细胞增殖的活性. 相似文献