Apoptosis of RKO induced by catechins and GA through Ca<Superscript>2+</Superscript> and LIP

The anti-tumor effects of catechins and gallic acid （GA） in-vitro was investigated in this paper. Fluo-3AM, Calcium-AM （Ca-AM）, 2＇, 7＇ -dichlorofluorescein-diacetate（DCFH-DA）, 4＇ ,6-dia- midino-2- phenylindole （DAPI） and Ca-AM plus colbat were used to characterize intracellular calcium, labile iron pool （LIP）, reac- tive oxygen species （ROS）, nuclei morphology and mitochondrial permeability transition pore （mPTP） opening, respectively. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to quanti- tare catechins and GA in the cultural medium. The results indi- cated that each of them showed dose response inhibition of cell growth, provoking nuclei condensation, intracellular calcium ele- vation, mPTP opening, LIP reduction, and cytochrome c （Cyt-C） to release into cytosol. The caspase inhibitors, 2-aminoethox- ydiphenol borate （APB） or Fe3＋ could inhibit lethal effects of GA and （-）-epigallocatechin （EGC）, but failed to affect （-）-epigalloca- techin gallate （EGCG） and （-）-epicatechin gallate （ECG）. Level of ROS presented negative growth while their concentration de- creased in the medium. In conclusion, our findings suggest that viability of RKO decreased because of their good correlation with elevation of calcium and loss of L1P and ROS in cytosol.     

具有抑菌活性的海藻多酚联合提取工艺优化研究

采用超声波、微波联合浸提方式提取海藻多酚,通过正交实验确立了多酚提取工艺条件,并以平板打孔抑制法测定了海藻多酚粗提物对7种细菌和4种真菌的抑菌活性。结果表明:采用料液比(匀浆:乙醇,g/mL)1:7,乙醇浓度85%,浸提温度70℃,浸提次数2次,浸提时间4 h,提取效果最佳,海带多酚提取率为2.08%。海藻多酚对供试的2种革兰氏阳性菌和5种革兰氏阴性菌都有一定程度的抑制活性,量效关系均呈剂量依赖型,最小抑菌浓度为10~40μg/mL。其中对大肠杆菌、绿脓杆菌抑制效果较明显,对青霉、白色念珠菌亦有抑制作用。     

凝胶剂中脂溶性茶多酚的含量测定

目的:建立凝胶剂中脂溶性茶多酚的含量测定方法,为制定脂溶性茶多酚凝胶剂质量控制标准提供依据。方法:以无水乙醇为提取溶剂,酒石酸亚铁为显色剂,采用比色法,在540 nm处测定含量。结果:脂溶性茶多酚在0～250 mg.(100 mL)-1浓度范围内线性关系良好(R2=0.9991),平均回收率为102.80%,相对标准偏差为0.93%(n=9)。结论:本法简单、精确、重复性好,可用于凝胶剂中脂溶性茶多酚的含量测定。     

蓝莓不可萃取多酚的纯化及组分分析

对蓝莓果实中不可萃取多酚进行了提取、分离和纯化,并利用高效液相色谱对其组成成分进行了分析。结果表明,7种大孔树脂中HPD-100C对蓝莓不可萃取多酚的吸附率和解吸率都相对较高;采用大孔树脂HPD-100C进行动态纯化,再利用高效液相色谱分析其组分,得出蓝莓不可萃取多酚中主要物质为飞燕草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药花色素、锦葵色素,与可萃取多酚相似,说明两者具有相似组分。     

茶多酚对AOM/DSS诱导高脂饮食小鼠结直肠癌的影响

探讨茶多酚(TP)对长期高脂饮食小鼠结肠炎相关性结肠癌(CAC)发生发展的影响及其可能机制。将5周龄BALB/c小鼠50只随机分为对照组、HFD组、AOM/DSS组、HFD+AOM/DSS组和HFD+AOM/ DSS+TP组,采用三次循环腹腔注射氧化偶氮甲烷(AOM)以及饮用2%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立CAC模型。通过实时荧光定量PCR检测TNF-α、IL-6、COX-2、 IL-4、IL-10、β-catenin和C-myc 的mRNA表达水平;通过Western Blotting 检测β-catenin、P-GSK3β和GSK3β蛋白表达量;通过HE染色观察结直肠形态结构,免疫细胞浸润程度。结果表明：与HFD+AOM/DSS组相比茶多酚上调了TNF-α、IL-6、COX-2、β-catenin和C-myc的表达(P<0.05),下调了IL-4、IL-10的表达(P<0.05),促进了β-catenin的降解,显著降低AOM/DSS诱导CAC小鼠模型结直肠肿瘤的发生、抑制了结直肠缩短、维护了肠道屏障的完整。说明茶多酚能缓解炎症反应并抑制了Wnt信号系统的活化,对CAC有明显抑制作用。     

几种天然材料对茶多酚和咖啡因的吸附与分离特性

用HPLC法测定表没食子儿茶素没食子酸酯(EpigaUocatechin-3-gallate,EGGG)和咖啡因含量,分光光度法测定总茶多酚含量,研究了几种天然材料对茶提取物中茶多酚和咖啡因的吸附与分离特性.谷壳和丝瓜络对茶多酚的吸附率分别为65%和62%,稍低于最佳吸附大孔树脂DM130(73%)和最佳分离树脂聚酰胺树脂(81%)的吸附率;对咖啡因的吸附率分别为24%和18%,介于DM130(68%)和聚酰胺(15%)之间.红砖粉、矿石粉末和河沙对茶多酚和咖啡因的吸附率都很低,分别为38%,29%,3%和24%,15%,15%.用1 BV水、20%乙醇、40%乙醇和3 BV 80%乙醇梯度洗脱,测定了它们对EGCG和咖啡因的柱层析分离效果.DM130不能将两者分离开,94%～96%的EGCG和咖啡因同时存在于40%和80%的乙醇相中.聚酰胺树脂能够很好地分离这两种成分,90%咖啡因在水和20%E,醇洗脱相中,而90%EGCG在80%乙醇相中.谷壳和丝瓜络对EGCG和咖啡因的分离效果介于DM130和聚酰胺之间.谷壳为吸附剂时,92%咖啡因在水,20%和40%乙醇相中,84%的EGCG在80%乙醇相中.丝瓜络吸附剂时,87%咖啡因在水,20%和40%乙醇相中,76%的EGCG在80%乙醇相中.调整和控制好洗脱条件和洗脱剂用量,可较好地分离EGCG和咖啡因.结果表明,谷壳和丝瓜络可用作EGCG和咖啡因的吸附分离材料,具有对环境和健康安全、廉价易得等特点.     

牛大力种子萌发过程中的生理生化变化

本文在于研究种子萌发过程中生理生化变化规律,为牛大力(Callerya speciosa)种苗培育提供理论支撑。对牛大力种子萌发时期可溶性糖、抗氧化酶活性、游离氨基酸、蛋白酶、总酚含量进行测定,研究牛大力种子萌发不同时期的各项生理生化指标的动态变化,并比较他们之间的相关性。在牛大力种子萌发过程中,22d时可溶性糖含量达到最高值,为0.430 mg·g-1,随后持续降低。超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性在22d达到最高值,分别为300.28,810U·g-1 FW,过氧化物酶(POD)活性在萌发过程第17d达到最高值,为240U·g-1 FW,这3种抗氧化酶活性均呈现先升高后下降的趋势;游离氨基酸呈先升后降再陡然上升的趋势;蛋白酶活性在第22d时达到最大值,为1.101mg·g-1·h-1,呈先升后降的趋势;总酚含量在0d时最高,为77.81μg·g-1,随后出现无规律性变化,但总体呈降低趋势。相关性分析表明,牛大力种子萌发过程中,物质和能量代谢与POD、CAT及蛋白酶等的作用有很大关系;POD、CAT在种子萌发过程中不仅能消除植物体内产生的过氧化氢等有害物质,也可能在一定程度上参与了种子的其他代谢活动;总酚在种子萌发过程中通过抑制SOD酶活性影响牛大力种子的萌发。     

Modulation by polyamines of apoptotic pathways triggered by procyanidins in human metastatic SW620 cells

We showed previously that inhibition of polyamine catabolism with the polyamine oxidase inhibitor MDL 72527 (MDL) potentiates the apoptotic effects of apple procyanidins (Pcy) in SW620 cells. Here we report that Pcy caused an activation of the intrinsic apoptotic pathway through enhanced polyamine catabolism and mitochondrial membrane depolarization. MDL in the presence of Pcy caused a profound intracellular depletion of polyamines and exerted a protective effect on mitochondrial functions. MDL potentiation of Pcy-triggered apoptosis was reversed by addition of exogenous polyamines. In addition, MDL in combination with Pcy activated the extrinsic apoptotic pathway through enhanced TRAIL-death receptor (DR4/DR5) expression. Potentiation of Pcy-triggered apoptosis by MDL was inhibited when cells were exposed to specific inhibitors of DR4/DR5. These data indicate that the depletion of intracellular polyamines by MDL in the presence of Pcy caused a switch from intrinsic to extrinsic apoptotic pathways in human colon cancer-derived metastatic cells. Received 15 January 2008; received after revision 19 February 2008; accepted 7 March 2008     

响应面法优化紫叶李皮中总多酚的提取工艺及其抗炎活性

为了优化紫叶李(Prunus cerasifera)皮中总多酚(PTP)提取工艺并研究其抗炎活性,在单因素实验的基础上,以总多酚得率为考察指标,乙醇体积分数、提取时间、提取温度、料液比为考察因素,采用Box-Behnken实验设计结合响应面分析法优化PTP的提取工艺,通过二甲苯致耳肿胀法、蛋清致足趾肿胀法测定PTP的抗炎活性.实验结果表明,PTP的最优工艺条件:乙醇体积分数69%、提取时间1.5 h、提取温度81 ℃、料液比1∶31(g∶mL),该工艺下得率为55.3 mg/g.PTP能抑制小鼠耳廓及大鼠足趾炎症.结论是该提取工艺稳定可靠,得率较高,且PTP具有明显的抗炎活性.     

炙升麻与几种升麻属植物抗氧化活性研究

目的:了解常见升麻属植物抗氧化活性,探讨中药材升麻炮制过程中酚酸类成分与抗氧化活性的变化。方法:采用DPPH法与HPLC法对8种亚洲、北美洲升麻属植物共计26个样品进行抗氧化活性与酚酸类成分分析,以了解氧化活性与酚酸类成分之间的关系。结果:绝大部分样品IC50>150μg.mL-1;炙升麻在炮制过程中酚酸类成分会发生变化,且工艺流程对结果影响很大,抗氧化活性也会受到进一步影响。结论:升麻属植物样品总体上抗氧化活性不高;中药材升麻植物来源具有多样性,不同的样品间在抗氧化活性方面存在较大差异;炙升麻在炮制过程中酚酸类成分会发生改变,从而导致其抗氧化活性与原植物相比发生较大变化,是否影响升麻的药性与药效值得进一步研究。