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311.
甜蛋白Monellin在巴斯德毕赤氏酵母中的胞内表达 总被引:1,自引:0,他引:1
将PCR扩增得到的Monellin基因片段插入Pichia pastoris胞内表达质粒Ppic3.5k‘,然后转入Pichia pastoris SMD 1168受体菌中,用G418筛选高拷贝菌株,并进一步对其进行PCR鉴定,获得的阳性克隆菌株经甲醇诱导60h,SDS-PAGE结果显示菌株破壁液中含有表达的Monellin,其大小约为11ku,并具有甜度。 相似文献
312.
用限制酶将pSK-TTR质粒上TTR基因切下,分别插入分泌型载体pPIC9和pPIC9K,将重组的pPIC9K-TTR用BglⅡ酶切后,转化pichia pastoris GS115菌株,筛选获得G418高抗性转化子,转化子经摇瓶发酵,上清液用SDS-PAGE检测,有明显的rTTR表达,经DEAE-sepharose F.F.离子交换柱和Superdex75分子筛层析,得到蛋白线纯度大于95%的rTTR,经Western Boltting,分子质量和等电点测定等证明,毕赤氏酵母的表达rTTR与人血浆提取的TTR极为相似。 相似文献
313.
细胞周期调控因子的研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
细胞周期调控是细胞周期在不同时相的调控点受到调节因子的调控,其中有二个调控点最重要,G1/S期,G2/M期,已有二类细胞周期调控因子被发现,分别是细胞周期蛋白依赖性激酶CDK(cell dependent kinase)和细胞周期蛋白(cyclin),它们之间的相互作用调控细胞周期的进程。 相似文献
314.
质粒pEGFP-1是一种不含启动子序列的哺乳动物细胞表达载体,将系列缺失的TNFα基因启动子5‘UTR(untranslated region)和3‘UTR插入pEGFP-1中,构建了一组重组质粒,转染L929细胞后,发现当报告基因EGFP的上游含有包括5‘UTR在内的TNFα基因启动子序列时,重组质粒在L929细胞中均能表达EGFP,但是,当EGFP基因3‘端同时含有TNFα基因的3‘UTR时,重组质粒转染L929细胞后,均不能表达EGFP,因此,在L929细胞中,TNFα基因的3‘UTR对基因表达具有抑制作用,进一步研究发现,在L929细胞中,TNFα基因的3‘UTR对基因表达的抑制作用需要其5‘UTR的共同参与,而且,RT-PCR实验表明,LPS在其他细胞中对TNFα基因起诱导作用的机制在L929细胞中不存在。 相似文献
315.
汞的生物毒性及其防治策略 总被引:2,自引:0,他引:2
汞是一种剧毒环境污染物。汞与生物大分子上的活性点结合,使其失去活性,导致病变。 相似文献
316.
用酶水解鸡肉 ,通过单因素实验确定胰蛋白酶 1、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰酶 2、胃蛋白酶水解鸡肉的最适条件 ,并确定在它们的最适条件下 ,胰蛋白酶和木瓜蛋白酶是单酶水解较好的酶。在双酶水解中 ,发现胰蛋白酶 1与酸性蛋白酶在各自最适条件下组合水解鸡肉水解率最高 ,进一步确定双酶水解的条件为胰蛋白酶先在 5 0℃ ,p H8.5 ,加酶量 40 0 0 U/ g蛋白质 ,固液比 1∶ 4,水解 3h,后酸性蛋白酶在 45℃ ,p H2 .5 ,加酶量 40 0 0 U/ g蛋白质水解 2 h。在这种组合下酶解 ,水解产物的水解度为 40 .5 % ,蛋白回收率为 81.0 % 相似文献
317.
小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白7原核表达载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
胰岛素样生长因子结合蛋白7(简称IGFBP7)广泛存在于多种正常的组织中,但在相应的肿瘤细胞中的含量极微。试验表明,它在肿瘤发生的不同阶段抑制其生长。采用RT-PCR和Nest-PCR方法,从正常的小鼠脾脏中扩增得到IGFBP7 cDNA片段,测序正确后,克隆于融合表达载体pRSETC中构建原核表达重组体。 相似文献
318.
胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP7)是胰岛素样生长因子结合蛋白超家族(IGFBPs)中一名新成员。与其他结合蛋白一样,它能与胰岛素样生长因子(IGFs)相结合,携带、转运IGF,延长IGF的半衰期,调控IGF的生物活性;更为重要的是,IGFBP7具有许多不依赖于IGF的生物作用,可参与多种类型的组织细胞的生长、发育、分化衰老与癌变等病理生理学过程。 相似文献
319.
己烯雌酚对小鼠子宫内膜层粘连蛋白表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
研究己烯雌酚 (DES)影响下小鼠子宫内膜层粘连蛋白 (LN)的表达变化 .2 6只雌性昆明小鼠随机分为三组 :未孕对照组 ,小剂量 (0 .2 8μgDES /g体重 )注射组 ,大剂量 (1.1μgDES /g体重 )注射组 .用免疫组化SP法和图像分析技术进行LN定位、定量测定 .正常小鼠子宫内膜LN在上皮基膜、血管内皮基膜均有表达 .注射己烯雌酚后 ,LN表达部位基本不变 ,表达量有明显增加 (P <0 .0 5 ) ,并随己烯雌酚剂量增加而增强 (P <0 .0 5 ) .通过影响LN的表达 ,可能是雌激素调控胚泡着床的机理之一 . 相似文献
320.
微波对K562/MDR细胞凋亡及热休克蛋白70表达的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
研究微波引起白血病耐药细胞株K562/MDR的凋亡以及对热休克蛋白70表达的影响。使用MTT方法检测细胞存活率,AnnexinV/PI双参数法检测K562/MDR细胞的凋亡率,流式细胞仪检测热休克蛋白70的表达。结果表明,微波可起K562/MDR细胞的凋亡,经0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min(保持43℃),37℃培养24h后,细胞凋亡率分别为10%、13.6%,而水浴加热引起的凋亡率仅为3.8%,微波照射影响细胞内热休克蛋白70的表达,在43℃时,0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min抑制HSP70的表达,实验说明微波能引起K562/MDR细胞的凋亡,该凋亡与微波引起的热休克蛋白表达的改变可能有联系。 相似文献