"两步法"体外培养山羊卵母细胞的初步研究

体外成熟培养的卵母细胞经本外受精后，囊胚发育率远低于体内成熟卵母细胞，原因之一是由于体外成熟卵母细胞的不充分获能造成的，有假说认为：卵母细胞在体外培养过程中，如果延长GV期，可促进卵母细胞进一步获能，从而提高发育潜能。本文以山羊卵子为研究对象，探讨了山羊卵泡各种成分以及异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制以及抑制解除后减数分裂的影响，结果显示，山羊50％Q卵泡液、100％卵泡液、半卵泡、打孔整体卵泡以及完整卵泡对山羊卵母细胞的核成熟抑制率分别为：0.00%、9.38%、60.47％、78.26%和70.09%，随后，对经山羊半卵泡、打孔整体卵泡、完整卵泡抑制培养后的卵子进行恢复培养发现，卵子核成熟率分别为：64.29%、3.49%和4.13%，山卵母细胞与半卵泡共培养24h后进行0h、12h、20h、24h和30h的恢复培养，核成率分别为：0.00%、20.00%、61.90%、64.29%和43.75%，表明山羊半卵泡可以有效抑制山羊卵母细胞使之处于GV期，并且这种抑制作用可以恢复，恢复培养时间以20h和24h较为适宜，初步研究异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制的影响发现，50％牛卵泡液、1005牛卵泡液、50％绵羊卵泡液、100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制率分别为3.7%、21.88%、10.00%、58.82%，表明，100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制效果较好。     

绵羊小腔卵泡卵母细胞的分离及相关实验

用绵羊小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞进行了一系列实验,获得小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞生发泡的有效分离方法.结果显示,常规的卵母细胞脱水收缩方法、离心方法、其它卵母细胞的电融合方法均不适用于小腔卵泡卵母细胞.     

绵羊体外成熟,体外受精卵的体外发育及移植后的产羔

体外成熟、体外受精后的绵羊卵在体外长期培养或在2～4细胞期和桑堪～囊胚期移植给受体母羊,观察了培养卵的发育和移植后的受胎率。方法是将采自屠宰场的绵羊卵巢在1～12小时内带回实验室,抽取卵母细胞。从中选取卵丘细胞层完整的卵子,在二氧化碳培养箱内,用含有10％NSS(或FCS)、hCG和E_2,并以Hepes缓冲的M199培养24～26小时。再用以IonophoreA23187诱导获能处理过的新鲜公羊精于进行体外受精.7～10小时后移入发育培养基,即含有10％FCS(或NSS)和丙酮酸钠的Hepes缓冲的M199内继续培养,受精后将部分发育为2～4细胞胚和桑堪～囊胚期胚手术移植给受体母羊。另一部分卵子则在受精后48～72小时的不同时间内统计其卵裂卵的出现率,并继续培养7～12天详细观察卵裂卵的发育情况。在受精后48～72小时卵裂卵的出现率,FCS和NSS组分别为39.6％145/366)和52.4％(182/347),前者显著低于后者;将61枚2～4细胞期胚和桑椹～囊胚期胚分别移植给20只受体母羊,有10只受胎。共产羔11只,受胎率为50％;在发育培养液内继续培养的482枚卵裂卵中有312枚(64.7％)发育为桑椹～囊胚期胚(其中包括部分孵化囊胚)。     

性成熟对养殖雌性异育银鲫血液生理指标的影响

以雌性异育银鲫为研究对象,对其性成熟前后(卵巢发育分别为Ⅳ期和Ⅴ期)红细胞数量(RBC)、血红蛋白(Hb)含量、红细胞比容(Ht)、红细胞渗透脆性及红细胞沉降率(ESR)进行测定。结果表明,雌性异育银鲫卵巢从Ⅳ期发育至Ⅴ期,血液中的RBC、Hb含量和Ht值均显著(p<0.05)降低,其中Ht值降低尤为明显(p<0.01);红细胞渗透脆性的变化不是很明显,开始溶血的浓度几乎没有变化,而完全溶血的浓度则有所升高,说明红细胞的渗透脆性有所增大;1h的红细胞沉降速度明显加快,2 h的则略有增加。     

Yeast Golgi apparatus – dynamics and sorting

The yeast Saccharomyces cerevisiae is one of the best-studied organisms to understand molecular mechanisms of membrane traffic, but as far as the organization of the Golgi apparatus is concerned, yeast is only just beginning to yield clues about how dynamic and flexible the organelle is.     

体外受精过程中多精受精发生机制

对哺乳动物体外受精（IVF）过程中多精受精的发生原因进行了阐述，指出多精受精的发生是影响各种哺乳动物体外受精效率的重要原因，其中在猪和人的IVF中表现得尤为突出。大量研究表明，除了物种的特异性以外，不完全的卵母细胞胞质成熟、异常透明带、高精子浓度、受精培养基中不适当的添加物以及在受精过程中的其他一些异常因素都与多精受精密切相关。     

不同叶幕结构对赤霞珠葡萄生长发育的影响

为探索酿酒葡萄赤霞珠不同叶幕结构对葡萄果实品质的影响,自2001年至2002年对河北省秦皇岛市酿酒葡萄赤霞珠适宜的叶幕结构进行了研究。试验试材为2.5m×0.5m栽植密度,1.60m架高的双篱架赤霞珠,四根横梁距地面距离从下到上依次是40,80,120,160cm时,在葡萄上架时进行以下处理:A横梁上铁丝间水平距离分别为:35,60,100,150cm。B横梁上铁丝间水平距离分别为:30,50,90,120cm。C横梁上铁丝间水平距离分别为:20,40,70,100cm。D横梁上铁丝间水平距离分别为:50,90,100,110cm。通过对不同架式赤霞珠枝叶生长、果实发育、枝条成熟等指标调查测定,结果表明:处理间光合强度、光照度、叶片生长发育、枝条生长、果实品质等多项调查测定指标没有规律性的显著差异。上口间距100cm和120cm的处理有利于葡萄枝条成熟,120cm处理的产量较高。150cm处理的架面不易保持稳定。     

体外培养绵羊卵母细胞超微结构的变化

实验利用透射电镜研究了根据卵泡大小和卵丘细胞层多少分类后类绵羊卵母细胞在体外成熟增培养前后超微结构的变化,结果表明,小卵泡卵经过体外培养其线粒体、皮层颗粒等细胞器均未达到熟卵母细胞中这两种超微结构的分布状态;大、中两类卵泡卵经过体外培养细胞成熟较好,     

A new method to reconstruct hydrocarbon-generating histories of source rocks in a petroleum-bearing basin——the method of geological and geochemical sections

Via investigating typical Palaeozoic and Mesozoic petroleum-bearing basins in China by using thermal maturation theories of organic matter to improve the conventional Karweil's method,a new method to reconstruct hydrocarbon-generating histories of source rocks has been suggested.This method, combining geological background with geochemical information makes the calculated VRo closer to the measured one. Moreover, it enables us to make clear the hydrocarbon generation trend of source rocks during geological history. The method has the merits of simple calculation and objective presentation, especially suitable to basins whose sedimentation and tectonic movements are complicated.     

The role of kinesin, dynein and microtubules in pancreatic secretion

The regulated secretion of pancreatic zymogens depends on a functional cytoskeleton and intracellular vesicle transport. To study the dynamics of tubulin and its motor proteins dynein and kinesin during secretion in pancreatic acinar cells, we infused rats with 0.1 μg/kg/h caerulein. Electron and fluorescence microscopy detected neither dynein nor kinesin at the apical secretory pole, nor on the surface of mature zymogen granules. After 30 min of secretagogue stimulation, kinesin and the Golgi marker protein 58 K were reallocated towards the apical plasma membrane and association of kinesin with tubulin was enhanced. Disruption of acinar cell microtubules had no effect on initial caerulein-induced amylase release but completely blocked secretion during a second stimulus. Our results suggest that mature zymogen granule exocytosis is independent of intact microtubules, kinesin and dynein. However, microtubule-dependent mechanisms seem to be important for the replenishment of secretory vesicles by redistribution of Golgi elements towards the apical cell pole. J. Schnekenburger and I.-A. Weber have contributed equally to this work.