DAP 玻璃化冷冻液对小鼠2-细胞胚胎的冷冻保存

摘要: 目的探索和优化小鼠2-细胞胚胎冷冻效果,建立小鼠胚胎冷冻保存技术以及超低温保存模型动物胚胎实验室所需的相关技术。方法选择3 个品系( C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － ) SPF 级4 周龄雌性小鼠,运用超数排卵、体外受精、玻璃化冷冻法,以及二细胞期胚胎复苏、体外培养等技术方法,观察上述实验效果。结果C57BL/6、ApoE － / －、NOS3 － / － 3 个品系小鼠超数排卵平均值分别为42. 98 个/只、27. 93 个/只、23. 11 个/只,体外受精2-细胞期胚胎率分别为68. 79%、32. 70%、23. 08 %,胚胎冷冻复苏后胚胎回收率72. 77%、80. 87%、83. 33%,存活率分别为56. 92%、54. 84%、70%,存活胚胎体外培养发育到囊胚比率分别为72. 37%、60. 78%、25%。结论选择4 周龄小鼠,按预定相同的技术方法做超数排卵、体外受精、胚胎冻存、胚胎复苏,呈现出较好效果,C57BL/6 小鼠优于基因工程小鼠,基本建立起小鼠2-细胞胚胎冷冻保存技术。     

2,4-D和6-BA对水稻愈伤组织培养力的影响

以梗稻“日本晴”成熟种子诱导愈伤组织,统计愈伤诱导率及绿苗分化率,分析培养基中2,4-D和6-BA的不同浓度配比对培养力的影响,得到二者的最适配比,愈伤组织的质量和组织培养中再生植株的频率都有较大提高．实验结果表明：2,4-D是诱导愈伤组织必不可少的因子,与6-BA配合使用对愈伤组织的培养效果更好．对“日本晴”而言,当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．5mg／L时愈伤组织的诱导率最高;当2,4-D为2．0mg／L,6-BA为0．2mg／L时,绿苗分化率和培养力最高．     

不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响

通过比较几种常用的化学激活方法对小鼠卵母细胞的孤雌激活和孤雌生殖胚胎体外发育的影响,从而筛选出小鼠卵母细胞孤雌激活的适宜方法.选取成熟小鼠卵母细胞,随机分为以下9组进行激活处理:①离子霉素(I)+6-二甲氨基嘌呤(D);②I+D+细胞松弛素B(CB);③I+放线菌酮(C);④I+C+CB;⑤φ(乙醇)=7%的乙醇(E)+D;⑥E+D+CB;⑦E+C;⑧E+C+CB;⑨Sr2++CB.比较了这9种化学激活方法以及SrCl2的作用时间和卵龄对小鼠卵母细胞激活效果的影响.实验结果表明:小鼠卵母细胞孤雌激活率与激活措施和卵龄有关;小鼠卵母细胞可以被I+D+CB或SrCl2+CB有效激活,激活率及孵化囊胚发育率均高于其他激活方法(P0.05),且以SrCl2+CB最为有效.hCG注射后20h为小鼠卵母细胞进行SrCl2激活的最适卵龄,其最佳处理时间为4h.对小鼠卵母细胞而言,6-DMAP比放线菌酮的激活效果好.     

漫长而艰辛的“试管婴儿”之路——2010年度诺贝尔生理学或医学奖成果简介

 “试管婴儿之父”罗伯特·爱德华兹（Robert G. Edwards）获得2010年度诺贝尔生理学或医学奖,以表彰他在体外受精（IVF）技术方面的杰出贡献。早在20世纪50年代,爱德华兹便提出通过体外受精治疗人类不育的设想：即从女性卵巢内取出卵子,与精子在细胞培养皿中完成受精,然后再移植回母体子宫内发育。他们经过漫长而艰辛的努力实现了这一目标,1978年世界第一例“试管婴儿”出生。这项技术给全世界大约10%的不育症夫妇带来希望。一门新的医学领域（辅助生殖技术）由此诞生,开启现代医学的新世界。     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

激素和添加物对蝴蝶兰组培快繁的影响

以蝴蝶兰人工授粉的果荚种胚和组培苗的叶片、茎尖为外植体,进行组织培养快速繁殖研究.结果表明,果荚种胚是最好的外植体材料,1个果荚可培育出上万个原球茎.种胚诱导原球茎最佳激素组合为:6-BA 0.3mg/L+NAA 0.2 mg/L;原球茎增殖最佳激素组合为:6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;2%蔗糖和10%香蕉泥可以显著促进原球茎增殖;原球茎分化最佳激素组合为:6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;诱导生根IBA 0.5mg/L最佳;炼苗后移栽苗成活率达95%以上.优化后的蝴蝶兰组织培养条件,可为蝴蝶兰快速繁殖工厂化生产提供参考.     

Development and characterization of interspecific hybrids between <Emphasis Type="Italic">Oryza sativa</Emphasis> and <Subscript>O. latifolia</Subscript> by <Subscript>in situ</Subscript> hybridization

Oryza sativa and O. latifolia belong to the AA and CCDD genomes of Oryza, respectively. In this study, interspecific hybrids of these species were obtained using the embryo rescue technique. Hybrid panicle traits, such as long awns, small grain, exoteric large purple stigma, grain shattering and dispersed panicles, resemble that of the paternal parent, O. latifolia, whereas there is obvious heterosis in such respects as plant height, tillering ability and vegetative vigor. Chromosome pairing and the genomic components of the hybrid were subsequently investigated using genomic in situ hybridization （GISH） and fluorescent in situ hybridization （FISH） analysis. Based on the mitotic metaphase chromosome numbers of the root tips investigated, the hybrid is a triploid with 36 chromosomes. The genomic constitution of the hybrid is ACD. In the meiotic metaphase Ⅰ of the hybrid pollen mother cell, poor chromosome pairing was identified and most of the chromosomes were univalent, which resulted in complete male sterility in the hybrid.     

The internal structure of Early Cambrian fossil embryo Olivooides revealed in the light of Synchrotron X-ray Tomographic Microscopy

Countless fossil embryo Olivooides and the hatched larvae,juveniles and adults(the latter two kinds are Punctatus) are recovered by means of acid maceration from the fine-crystalline to medium-crystalline phosphatic limestone and phosphatic micrite of Early Cambrian Kuanchuanpu Formation at the Shizhonggou section,near Kuanchuanpu Village,Ningqiang County,Shaanxi Province,China.Using the technique of Synchrotron X-ray Tomographic Microscopy,the 3D internal structure of Olivooides and Punctatus is reconstructed.The morphological and statistic analyses are also given to the stellae structure of Olivooides and Punctatus,which indicates that this structure is a result of adaptive evolution to a lifestyle of fast-attaching after hatching,probably with the function of mucilage secretion.The internal structure of Punctatus is described and discussed.The ovum-like structure,a common internal feature of Punctatus,is considered as the taphonomic structure,rather than eggs or other biological structure.This structure is thought to be formed after the burial of the animal and before or during the mineralization.The original internal structure of Punctatus is assumed to be tabulae-filled,with soft body grown on them.     

正确认识鼠在传播人狂犬病中的流行病学意义

本文在穷尽式检索国内外狂犬病文献的基础上,分析了鼠在传播人狂犬病中的疫源作用,综述了国内外鼠狂犬病测毒研究,介绍了有关国家与世卫组织对鼠传狂犬病的防治建议,探讨了我国应采取的防治意见,调查了国内对鼠传狂犬病的某些夸张宣传及认识偏差,并试图究其根源,加以拨正。     

七星鲈胚胎发育与水温关系的研究试验

2006年12月15日至18日在福建东山岭南育苗场进行七星鲈(Lateolaberx japonicus)胚胎发育与水温关系的研究试验.试验设定水温为16～24℃,每个温度梯度为1℃,每个实验组设2个重复,每组加入受精卵100粒.结果显示,温度对七星鲈胚胎发育速度的影响非常明显,七星鲈胚胎发育进程随着温度的降低而延长,...