重组腺相关病毒基因药物三种滴度的比较与分析

采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(Q-PCR)和转导方法对重组腺相关病毒(rAAV)的衣壳滴度、基因组滴度、转导滴度进行定量,并比较衣壳滴度/基因组滴度(P/GC)和基因组滴度/转导滴度(GC/TU).实验结果表明:3批rAAV的平均衣壳滴度为3.65×10¹³ P·mL^-1,平均基因组滴度为8.67×10¹¹ GC·mL^-1,平均转导滴度为9.85×10⁹ TU·mL^-1,P/GC平均值为41.70,GC/TU平均值为88.20,P/GC和GC/TU平均值接近于AAV2标准品,说明文中方法的制备工艺成熟、稳定,制备的rAAV感染活性较高.     

Fluorescent immunosensor based on fluorescence resonance energy transfer between CdSe/ZnS quantum dots and Au nanorods for PRRSV detection

An ultrasensitive and selective sandwich-type fluorescent immunosensor based on fluorescence resonance energy transfer (FRET) between CdSe/ZnS quantum dots (QDs) and Au nanorods (AuNRs) was developed for the rapid detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV). Modified CdSe/ZnS QDs and AuNRs were bioconjugated with primary antibodies M and GP5, respectively. When the target antigen was present, a well-known sandwich-type form CdSe/ZnS QDs-M antibody-antigen-GP5 antibody-AuNRs was produced, and thus reducing the distance between the QDs and NRs. As a result, FRET occurred and the fluorescence intensity of CdSe/ZnS QDs decreased, and this decrease was used to determine the antigen concentration. Ultrasensitive detection of PRRSV at low concentrations in swine serum was achieved with a limit of detection of 0.55 TCID₅₀/mL and a linear detection range of 10¹–3.5 ?× ?10⁴ TCID₅₀/mL. Therefore, the fluorescent immunosensor is selective and highly sensitive; specifically, it can detect PRRSV at low concentrations in swine serum over a large concentration range. This proposed detection method can facilitate the development of high-performance fluorescent immunosensors for the detection of PRRSV and other antigens.     

龙虎山猕猴(Macaca mulatta)麻疹病毒感染的探讨

采用HI(血凝抑制试验)法,比较在不同生境中,龙虎山猕猴麻疹病毒抗体阳性率的差异:小群关养组的阳性率为90.9%;半野生猴组阳性率为28.3%;野生猴组阳性率为2.4%。不同性别及不同年龄猴麻疹病毒抗体阳性率没有显著性差异(P>0.01)。半野生猴组阳性率逐年递增。对建立无麻疹、B病毒等病毒感染繁殖种群提出初步意见。     

图书馆网络安全问题探究

分析了图书馆网络存在的种种不安全因素，介绍了计算机网络安全技术，提出了加强图书馆网络安全的一些措施，包括采用防火墙技术；改进网络协议；防治网络计算机病毒；备份数据等。     

电子邮件系统的安全隐患及解决方法

电子邮件在获得广泛应用的同时，在安全性方面受到的威胁也越来越大。分析了邮件传输过程中常见的一些安全隐患，并结合大学校园网的实际环境提出了综合解决方法——采用PGP加密技术和邮件网关实现邮件系统的安全防护。经实践表明该方法使邮件在传输过程中安全系数得到很大提高。     

Modification of a viral satellite DNA-based gene silencing vector and its application to leaf or flower color change in Petunia hybrida

Gene silencing conserved in plants and animals is mediated by mechanisms that involve sequence- specific RNA degradation[1,2]. Gene silencing has been proven to play an important role in the study of gene function. Recently, a procedure known as virus ind…     

常见计算机病毒及抵御方法

各种电脑病毒的发作日益频繁,经常困扰广大计算机用户。为了更好抵御病毒的侵袭,我们必须从病毒是什么?躲藏何处?它的感染方式,入侵途径等全面了解病毒的实质、形成。从而找到行之有效的抵御方法、杀毒方法。保证计算机用户有一个良好的运行环境。     

昆虫病毒对脊椎动物性细胞的致突变性研究

应用显性致死试验方法来检测3种昆虫病毒(EpNPV、DtGV、DpCPV)对哺乳动物性细胞的致灾变性,以期全面评价3种昆虫病毒的“潜在性危害”.研究结果表明,EpNPV、DtGV、DpCPV对雄性小白鼠的生殖细胞无致突变作用,故不产生遗传性危害。     

反向线性探针杂交技术检测慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐药研究

目的:建立起简单、快速、灵敏、准确的慢性乙型肝炎病毒拉米夫定耐药位点的反向线性探针(reverse line probe,RLP)检测方法.方法:根据HBV野生及耐药基因序列设计通用探针、3'、5'对称加有poly-C的特异性探针和5'标记生物素的扩增引物.将探针线性固定在硝酸纤维膜上,使HBV PCR扩增产物与探针进行杂交.通过优化杂交条件,建立RLP检测方法.利用该方法对重庆地区86个慢性乙肝病人进行检测,同时与直接测序结果比较.结果:半巢式PCR可对103拷贝/ml的血清样本进行有效特异扩增,新建的RLP检测方法可对PCR扩增产物在1 ng/ml以上,或血清样本中突变型DNA占野生型DNA比例为5％以上的均可有效检测,86例临床的检测灵敏度为100％,野生型和耐药型的检测准确性分别为98.09％(103/105)、100％ (43/43),与直接测序法比,RLP检测野生与耐药混合型准确性更好.结论:反向线性探针杂交检测方法检测HBV拉米夫定耐药位点方便、灵敏、准确,是HBV拉米夫定治疗有效的监控工具,该方法适合临床应用.     

靶向TTF-1的siRNA腺相关病毒载体组装验证

为了解决靶向TTF-1的siRNA导入肺腺癌细胞的问题,设计了3条靶向NCI-H1975细胞TTF-1基因的siRNA,并将其分别构建到腺相关病毒上.在293细胞中装配病毒,收获病毒原初液后进行超滤浓缩、层析柱纯化,测定病毒滴度.重组病毒感染肺腺癌细胞系NCI-H1975,通过Western-Blot实验检测siRNA效果,利用凋亡实验验证细胞生物学效应.Western-Blot实验测得siRNA有较好的干扰效果,凋亡实验测得肺腺癌细胞NCI-H1975产生了凋亡,从而证明具有感染性的靶向TTF-1的siRNA腺相关病毒载体组装成功.