高效转染HepG2细胞的逆转录病毒载体系统的构建及应用

为构建含绿色荧光蛋白(EGFP)和人胰岛素原基因的逆转录病毒表达载体,并检测其在人肝癌细胞HepG2中的表达,将IRES-EGFP片段克隆到含调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体(pLXSN-GI-Ins)中,构建得到表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.经脂质体介导转染HepG2细胞后,各孔分别加入含有30.0 mmol/L葡萄糖的培养液继续培养24 h,在荧光显微镜下观察EGFP基因的表达,检测细胞上清液中的胰岛素值.数据显示,成功构建逆转录病毒表达质粒pLXSN-GI-Ins-EGFP.转染HepG2细胞后48 h,表达EGFP基因的细胞数目占总细胞数目的比值为(38.0±5.0)%.结果表明,构建了含EGFP和调控元件的人胰岛素原基因逆转录病毒表达载体,并且能够在HepG2细胞中成功表达.     

黑豆中抗真菌蛋白的纯化及活性鉴定

利用硫酸铵分级沉降、亲和色谱Affi-gel和离子交换色谱SP-Toyopearl从黑豆种子中分离出一种抗菌蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定达到电泳纯.利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳标准蛋白迁移率与分子量对数的关系,计算出该抗菌蛋白的分子量为93.3 kDa,还原和非还原状态下均显示单一区带,说明该抗真菌蛋白为单倍体蛋白.抑菌试验结果表明,此纯化的蛋白对植物致病菌瓜果腐霉病菌、棉花枯萎病菌、苹果轮纹病菌、葡萄灰霉病菌和菜豆根腐病菌等5种真菌的生长具有不同的抑制作用.     

硒对蜜环菌多糖和蛋白质质量分数的影响

采用不同的硒的质量分数对蜜环菌进行了补硒培养,研究了硒对蜜环菌丝体蛋白质和胞内外多糖质量分数的影响.结果表明:在本实验设计的浓度范围内,硒能够促进胞外多糖的分泌,但胞内多糖质量分数先升后降,在5mg/L时达到最高水平;在0~20mg/L范围内,蛋白质含量与硒处理浓度呈正相关,之后呈下降趋势.     

4种植物多酚对生物大分子的保护作用

为了研究多酚类化合物对生物大分子氧化损伤的保护作用,采用MDA测定、SDSPAGE、琼脂糖电泳,检测了4种多酚对由自由基引起的脂质过氧化、蛋白质氧化降解、DNA断裂的保护作用.结果表明:槲皮素在抑制脂质过氧化中作用最突出,在保护蛋白质氧化降解中香草醛作用最强;芦丁在保护DNA的氧化性损伤中最有效.说明4种化合物在不同的抗氧化体系中有不同的活性.     

快速测定特定水体中细菌总数的微波破壁水解-荧光衍生法

建立了一种快速测定特定水体中细菌总数的化学方法.利用微波辐射能,破坏细菌细胞壁并辅助水解蛋白质成为氨基酸,而后用荧光胺（FLA）衍生,测定衍生物的荧光强度,进而推算细菌总数.细菌微波破壁水解的最佳实验条件为：水解液中HCl浓度4 mol/L、微波功率400 W、辐射时间10 min.最佳衍生条件为：pH值2.0～2.2,3 mL试液中加入10-3mol/L FLA溶液1.0 mL（FLA与氨基酸的分子比高于130：1）、衍生温度4℃.方法的测定相对标准偏差为3.64%（n=6）,对于大肠杆菌菌液样品,本文所建立的化学方法与标准方法的测定结果无显著性差异.本法可望开发成特定水体样品中细菌总数的快速测定法.     

Sorption Behaviour of Acid Dyes by Soybean Protein/Poly （vinyl alcohol） Blend Fibre

The sorption behaviour of acid dyes by soybean protein/poly（vinyl alcohol） blend fibre was studied. The quantity of dye sorbed by the fibre increased markedly with the decrease in the pH of dyebath and reduced with the addition of neutral electrolyte when the pH was below 4.5, Acid dyes exhibited higher sorption rate constant and lower half dyeing time for the fibre than for spun silk and wool, which was related to the special morphological structure of the fibre, At pH 4, the sorption of disulphonated acid dyes with higher molecular weight followed the dual sorption mechanism of Langmuir plus Nernst-type partitioning well as they interacted with the fibre through electrostatic forces, hydrophobic forces and hydrogen bonds. It is considered that soybean protein and PVA components should be simultaneously dyed by disulphonated acid dyes with higher molecular weight.     

电喷雾电离质谱及其在多糖和蛋白质中的应用

介绍了电喷雾电离质谱(主要包括电喷雾电离质谱的组成、基本原理、离子化的影响因素)及其在多糖和蛋白质中的应用。随着电喷雾电离质谱在生物大分子研究领城的普及和仪器自动化程度的不断提高,该技术的发展将会更加迅速。     

大豆蛋白纤维/莫代尔混纺针织物力学性能分析

采用多功能织物强力机等实验仪器对5种不同混纺比例的大豆蛋白纤维/莫代尔混纺针织物的性能进行了测试分析.结果表明,随着大豆蛋白纤维含量的增加,大豆蛋白纤维混纺针织物的断裂强力有增加的趋势,断裂伸长率也随之增加;大豆蛋白纤维/莫代尔混纺针织物的顶破强力随大豆蛋白纤维含量的增加而下降;大豆蛋白纤维混纺针织物的撕破强力逐渐下降,尤其是在大豆蛋白纤维质量分数为100%时,织物的撕破强力最小;大豆蛋白纤维混纺针织物的纵向、横向弯曲长度逐渐下降,而其柔软性提高;大豆蛋白纤维/莫代尔混纺针织物的起毛起球性逐渐增加,织物磨损时的质量损失率逐渐增大,说明大豆蛋白纤维混纺针织物的耐磨性逐渐下降,在大豆蛋白纤维含量为100%时,即纯大豆蛋白纤维织物的耐磨性最差.     

动物感光器中的G蛋白及其偶联的光信号转导

G蛋白偶联的信号转导系统是细胞跨膜信号转导的重要途径，在动物的光感觉生理中，G蛋白在信号的转导和放大过程中起了重要的作用，有关这方面的研究已是动物光感觉研究中的一个热点，作者介绍了国内外这方面的研究进展，以及研究的方法，并对动物感光器中G蛋白的类型、性质和功能作了简要的概括。     

大豆蛋白织物的催化漂白

探讨漂白预处理工艺条件，清洗助剂及氧漂工艺条件对大豆蛋白织物漂白效果的影响。得到预处理工艺：FeSO415%(o.w.f）、pH值4－5、70℃处理35min；洗涤条件：0．5g/L的次亚磷酸钠，70℃清洗；漂白条件：稳定剂LJC5g/L、pH值7－8、85℃漂白50min。按上述工艺漂白，效果较为满意。