人尿激酶原纤原受体识别区嵌合突变体的构建与表达

采用同源转座方法,构建了在尿激酶原K区138～139位点插入了赖氨酸甘氨酸天冬氨酸(KGD)序列的2种尿激酶原嵌合体基因(proUK-KGDW, proUK-KGDS),并以昆虫细胞SF9为宿主获得了高效表达,表达量在33.34 μkat·mL-1, 细胞密度为106·mL-1,表达高峰期表达产物占细胞总蛋白的15%以上.表达产物展示出较高的纤溶活性,并具有良好的人尿激酶原免疫原性,同时,经SDS-PAGE试验检测,昆虫细胞分泌的突变体相对分子质量符合理论预期,为5.4×104,绝大多数为单链态形式.经过离子交换、分子筛层析及超滤浓缩等步骤对突变体蛋白进行了初步纯化,光浊度法试验表明含有KGDW序列的尿激酶原突变体具有较强的血小板聚集抑制活性,而含有KGDS序列的突变体几乎不具有任何活性,表明羧基端边侧序列对KGD展示正常的受体结合活性影响较大.溶解圈试验表明2种突变体均保留了较高的纤溶活性,说明插入序列不影响尿激酶原的酶切活性.     

高灵敏分光光度法测定微量铌

基于铌钼杂多酸与丁基罗丹明B(BRB)和聚乙烯醇(PVA)可以形成稳定的离子缔合物,建立了在水相中直接测定微量铌的新方法.研究了缔合物的形成条件,方法的灵敏度高,其ε值为 7.5×10~5L·mol~(-1)·cm~(-1),已成功地应用于钢中铌的测定.     

曲酸作为化妆品添加剂的增白作用机理研究

以曲酸为效应物,研究对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的影响.结果表明,曲酸对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用,其效应为可逆抑制效应.测定导致单酚酶活力和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为31.0和20.0μmol/L.曲酸对酪氨酸酶的单酚酶的迟滞时间有明显的延长效应,60μmol/L曲酸使得单酚酶的迟滞时间从52s延长到390s.曲酸对二酚酶的抑制作用表现为混合型抑制类型,抑制常数KI和KIS分别为13.0和100.0μmol/L.曲酸和酶的结合导致天然酶的内源荧光的量子产率下降,但荧光发射峰没有位移.通过曲酸对酪氨酸酶的抑制作用研究阐明曲酸作为化妆品添加剂的增白作用机理.     

儿童头发中微量元素（Fe、Zn、Pb）的测定与比较

用原子吸收光谱法测定儿童头发中的微量元素Zn、Fe;用分光光度法测定Pb,并将市区、农村等地的儿童头发中的Zn、Fe、Pb元素的含量进行比较,探讨营养、环境污染等诸多因素对儿童身体、智力发育造成的影响。     

邻氨基噻唑偶氮类试剂质子化机理的研究

邻氨基噻唑偶氮类试剂［１～３］在不同酸度下呈现不同的颜色,关于其质子化发生的位置以及先后次序至今尚未见文献报道．本文通过量子化学计算,结合分光光度法对这类试剂质子化行为进行了研究．１实验方法１．１吸收光谱测定移取１．０ｍＬ１．０×１０－３ｍｏｌ／ＬＴ...     

沼水蛙皮肤抗菌肽Temporin—HZ的结构和功能研究

应用反相高效液相色谱和质谱联合使用手段,从沼水蛙皮肤分泌液中分离到一种新型的Temporin家族成员—Temporin-HZ,经过Edman降解氨基酸序列分析和串联质谱研究,Temporin-HZ的一级结构最终确定为Phe-Leu—Pro-Leu-Leu-Phe-Gla-Ala-Ile-Ser-His-Leu-Leu-NH2。抗菌活性分析表明,Temporin-HZ对大肠杆菌和白色念珠菌生长无明显抑制,但对金黄色葡萄球菌有抗菌作用。     

Alcohol dehydrogenase 2 is a major hepatic enzyme for human retinol metabolism

The metabolism of all-trans- and 9-cis-retinol/ retinaldehyde has been investigated with focus on the activities of human, mouse and rat alcohol dehydrogenase 2 (ADH2), an intriguing enzyme with apparently different functions in human and rodents. Kinetic constants were determined with an HPLC method and a structural approach was implemented by in silico substrate dockings. For human ADH2, the determined K_m values ranged from 0.05 to 0.3 μM and k_cat values from 2.3 to 17.6 min⁻¹, while the catalytic efficiency for 9-cis-retinol showed the highest value for any substrate. In contrast, poor activities were detected for the rodent enzymes. A mouse ADH2 mutant (ADH2Pro47His) was studied that resembles the human ADH2 setup. This mutation increased the retinoid activity up to 100-fold. The K_m values of human ADH2 are the lowest among all known human retinol dehydrogenases, which clearly support a role in hepatic retinol oxidation at physiological concentrations. Received 12 October 2006; received after revision 6 December 2006; accepted 8 January 2007     

聚苯乙烯型氧化哌啶树脂的制备及对苯酚的吸附性能

制备了大孔哌啶弱碱树脂,并经过氧化氢（H2O2）氧化得到大孔氧化哌啶树脂,氧化哌啶树脂对水的亲和性增加,对苯酚的吸附性能增强,动力学吸附性能也好于哌啶树脂．树脂对环己烷中苯酚的动力学吸附符合二级动力学方程,计算得到的吸附量与实验结果相符．     

黄金菊总黄酮提取工艺研究

通过4因素3水平的正交试验。结合紫外分光光度法。确定了黄金菊中总黄酮的最佳提取工艺为20倍量的水先浸泡0．5h再加热回流3次,每次3h．为了节省能源提高效率最佳提取时间调整为2h,并验证调整后的工艺,结果表明,总黄酮提取率为5．255％,平均回收率为101．45％,RSD为1．975％（n=5）,此结果为黄金菊药效的进一步研究和资源开发利用提供科学依据．     

夫西地酸联合抗生素抑制脓肿分枝杆菌的研究

为了探究针对脓肿分枝杆菌的抑菌方案,本研究采用MABA法测定夫西地酸等药物对脓肿分枝杆菌标准菌株及临床分离株的最小抑菌浓度MICs,棋盘稀释法测定联合抑菌作用,以及平板涂布法测定最小杀菌浓度MBCs.结果表明,单用夫西地酸、阿奇霉素、头孢曲松钠、贝达喹啉对脓肿分枝杆菌标准株的MIC90与MBC分别为50、6.25、3.13、3.13 μg/mL与 50、12.5、3.13、6.25 μg/mL, 夫西地酸联用阿奇霉素的协同指数FICI从0.09~2.0不等;夫西地酸对脓肿分枝杆菌具有良好的体外抑菌活性,且夫西地酸与阿奇霉素联用后对标准株与临床株表现出明显的协同效应,相比单药作用极大地降低药物的MIC及MBC;其与头孢曲松钠联用后对标准株与临床株分别表现出协同、相加作用;与贝达喹啉联用后对标准株与临床株分别表现出相加、无关作用.