特异性siRNA对大鼠肝星状细胞TIMP-1表达的影响

观察金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）小干扰RNA真核表达载体转染肝星状细胞株HSC-T6后TIMP-1基因表达的情况。构建携带绿色荧光蛋白（GFP）基因的小干扰RNA真核表达载体pGCsi-U6／TIMP-1 shRNA,利用该载体介导四个特异性和一个非特异性的TIMP-1 shRNA,分别为TIMP-1 shRNA1、TIMP-1 shRNA2、TIMP-1 shRNA3、TIMP-1 shRNA4和TIMP-1 shRNA—NON。采用阳离子脂质体介导法转染HSC-T6细胞,激光共聚焦显微镜观察GFP表达,荧光实时定量PCR方法检测TIMP-1 mRNA表达情况。质粒转染HSC—T6细胞后,激光共聚焦显微镜观察转染组细胞内均见绿色荧光,未转染组未见绿色荧光;mRNA水平检测显示：与正常对照组相比,TIMP-1 shRNA1、TIMP—1 shRNA2和TIMP-1 shRNA4对TIMP-1基因表达较强的抑制作用,尤TIMP-1 shRNA1抑制作用最强（P〈0．01）。pGCsi—U6介导的TIMP-1 shRNA1能更加有效的抑制肝星状细胞中TIMP—1的表达。     

Carbon tetrachloride modulates the rat hepatic microsomal UDP-glucuronyl transferase activity and membrane fluidity

Summary Modulations in rat hepatic microsomal UDP-glucuronyl transferase activity have been observed during carbon tetrachloride (CCl₄) poisoning, with a large decrease in the enzyme cooperativity and increase in the membrane fluidity, occurring 30 min after administration. The results strengthen the possibility that an increase in microsomal membrane fluidity may be an early key event in liver injury induced by CCl₄.Acknowledgments. This work was supported by funds of the University of Athens.     

miR-194-5p通过Wnt5a抑制肝星状细胞活化

为研究miR-194-5p对肝星状细胞(HSCs)活化的影响及作用机制,采用CCK-8、β-半乳糖苷酶染色、Transwell、划痕、集落形成实验和RT-qPCR、Western blot分别检测miR-194-5p对LX-2细胞生物学特性、细胞活化标志物和靶基因表达的影响,并用生物信息学和双荧光素酶报告实验确定miR-194-5p靶基因.结果显示：miR-194-5p抑制LX-2细胞增殖、细胞集落形成、迁移能力以及LX-2细胞中活化标志物的表达,促进LX-2细胞衰老;Wnt5a为miR-194-5p的直接靶基因.研究表明miR-194-5p通过靶定Wnt5a抑制LX-2细胞活化,miR-194-5p和Wnt5a可能是治疗肝纤维化新的靶点.     

p16基因在原发性肝癌中丢失的研究

为了解抗癌基因Ｐ＾１６在原发性肝癌中的变异情况，采用判别技术研究３４例原发性肝癌及其癌组织。结果显示、１例原发性肝癌存在Ｐ＾１６Ｅｘｏｎｌ纯合子缺失，１５例原发怀肝癌存在Ｐ＾１６Ｅｘｏｎ２纯合子缺失，其余的１９例肝癌及所有的癌周组织无Ｐ＾１６基因纯合子失，研究结果表明Ｐ＾１６基因的缺失与原发性肝癌的发展发展密切相关，并提供了肝癌第９号染色体基因变的依据。     

Hepatic hydroxylation of melatonin in the rat is induced by phenobarbital and 7,12-dimethylbenzy[a]anthracene — implications for cancer etiology

The protective function of the pineal hormone melatonin in the etiology of cancer and carcinogenic activation is increasingly well-established. Low melatonin levels seem to parallel cancer growth. The question arises as to which factors cause the depression of melatonin levels and what the direct effects are. Melatonin is known to be metabolized in the liver by hydroxylation and subsequent conjugation yielding 6-sulfatoxymelatonin as a main product. Nevertheless, the microsomal monoxygenases catalyzing the first step have been poorly investigated. To further characterize these enzymes, typical inducers of three different sub-classes, namely phenobarbital, 7,12-dimethylbenz[a]anthracene, and 17-estradiol, were administered to female Fischer rats. Circadian urinary excretion patterns of melatonin and 6-sulfatoxymelatonin were determined over a 24-hour period on the third (second) day of induction. Liver homogenates were used to monitor the in vitro conversion of melatonin or 6-hydroxymelatonin to 6-sulfatoxymelatonin. Results of both approaches showed the microsomal monoxygenases catalyzing the 6-hydroxylation of melatonin to be strongly inducible by phenobarbital and to a lesser degree by the polyaromatic hydrocarbon 7,12-dimethylbenz[a]anthracene. The dramatic depletion of circulating melatonin as a result of these induction patterns and its possible implications for oncogenesis are discussed.     

能谱CT碘基图对肝细胞癌化疗栓塞术后瘤体血供的分析

目的:探讨能谱CT碘基图对肝癌肝动脉化疗栓塞术(TACE)后肿瘤血供的判断作用.方法:随机抽取65例肝脏肿瘤患者能谱CT成像资料进行回顾分析,均病理诊断为肝细胞性肝癌,且在TACE术后3周进行肝脏能谱CT检查.所有患者均获得常规混合能量图像和能谱图像,通过后处理工作站对能谱图像进行碘基图像重建,再对栓塞术后瘤体进行碘浓度测量、比较.结果:在65例肝癌化疗栓塞术后患者中,5例(第1组)患者动脉期瘤体的IC病灶与周围正常肝组织的IC肝脏之间有统计学意义(P0.05),门脉期的IC病灶与IC肝脏之间没有统计学意义(P0.05),动脉期与门脉期LNR有统计学意义(P0.05);其他60例(第2组)患者动脉期瘤体的IC病灶与周围正常肝组织IC肝脏之间没有统计学意义(P0.05),门脉期的IC病灶与IC肝脏之间没有统计学意义(P0.05),动脉期与门脉期LNR没有统计学意义(P0.05).数字血管减影检查(DSA)复查证实只有5例(第1组)患者瘤体仍有动脉供血,60例(第2组)患者瘤体没有动脉供血.结论:能谱CT碘基图能判断肝细胞性肝癌肝动脉化疗栓塞术后肿瘤瘤体血供情况,为临床进一步治疗提供有价值的影像依据.     

趋化因子IL-8和受体CXCR1,CXCR2在胃肠和肝肿瘤中的表达

为研究趋化因子IL-8和受体CXCR1、CXCR2在胃肠和肝肿瘤中的作用,应用免疫组织化学和RT-PCR的方法检测了趋化因子IL-8和受体CXCR1、CXCR2在食道癌、胃癌、结直肠癌和肝癌中的表达。在胃肠肿瘤中,CXCR1在癌细胞的细胞核膜和细胞质中表达,CXCR2在癌细胞的细胞质中表达。在肝癌中,CXCR1和CXCR2在癌巢中有表达而在邻近的肝组织中无表达。应用RT-PCR的方法检测了受体CXCR1、CXCR2的转录,其结果证实了免疫组织化学的结果。在胃肠和肝肿瘤中检测到了IL-8的表达。进一步分析表明在胃肠和肝肿瘤中IL-8与CXCR1/CXCR2共表达(p=0.0448)。实验结果说明趋化因子IL-8和受体CXCR1、CXCR2可能在胃肠和肝肿瘤的发生和发展中起作用。     

肝硬化肝切除术后肝再生及评估指标研究

原发性肝癌是我国的常见病、多发病,且90%的患者合并有肝硬化,肝切除术是主要的治疗方法,而肝脏在受到损害或切除之后,可以显示出强大的再生能力,这一现象早已被人们所发现并研究.就肝硬化肝切除术后肝再生、肝再生受损机制以及肝再生评估予以综述.     

兔肝胆汁中微量元素的含量及刺激兔耳“肝胆穴”对其含量的影响

用电感耦合等离子直读光谱仪测定正常家兔肝胆汁中微量元素含量,结果发现兔肝胆汁中含有23种元素,其中14种元素浓度高于检出下限,大多为金属元素,亦有少量非金属元素。这结果与黑色胆石成分基本一致。在刺激兔耳肝胆穴后,观察到肝胆汁中一些必需金属元素如铜、铁、镁等的含量都有所下降,尤以钠浓度下降明显。以上结果为进一步探讨耳压法预防结石症产生提供了依据。     

犬门腔静脉吻合术的操作及在实验医学的用途

31条犬施行门腔静脉吻合术,术后24小时内死亡6条,其他25条均获长期存活。经验与体会是:吻合口位置宜低,作吻合处的下腔静脉和门静脉分支仅游离其两旁的浆膜;用心耳钳阻断门腔静脉血流,且钳刃越薄越好;吻合口前后壁均用一般连续缝合;吻合口必须大于1.5公分。本手术在实验医学的用途是:作为外科性急性肝昏迷动物模型的第一步造型手术;研究慢性肝脑病时中枢神经组织化学和病理形态学改变;研究肝移植供肝灌注液的最佳温度和成分;研究和选择用于肝保存的细胞膜稳定剂;研究血浆各种氨基酸在肝脑病时的作用。