鸡传染性支气管炎病毒分子生物学的研究进展

叙述了国内外对传染性支气管炎病毒(IBV)的基因组结构及转录过程；IBV的结构蛋白及生物学功能；IBV诊断的现代生物技术手段；IBV基因工程疫苗与免疫预防等。     

大肠杆菌guaC基因的克隆及高效表达

以E.coli MC4100染色体DNA为模板使用PCR扩增技术克隆了鸟苷酸还原酶基因guaC，该基因全长1044bp，编码相对分子质量为37ku的蛋白质。将该基因直接克隆于PET—16b质粒的T7启动于下游，得到质粒pEXP1。转化E．coli BL21(DE3)，经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，获得了高效的表达。含表达质粒的菌体胞内粗提液经酶活分析表明，鸟苷酸还原酶的活性为不含质粒的宿主菌的80-85倍。     

Smad3基因剔除小鼠的基因型鉴定与繁殖性能研究

以前的研究显示Smad3基因剔除 (Smad3ex8 ex8)导致小鼠发生渐进性的白细胞增多症、牙周炎、胃炎、肠炎以及粘膜表面附近脓肿形成的慢性感染。对有症状的Smad3ex8 ex8小鼠淋巴结的组织学及免疫表型分析显示T细胞有增强的增殖能力及活化的表型。进一步的研究表明Smad3ex8 ex8小鼠胸腺细胞及外周T细胞彻底失去了对TGF β的应答。此外 ,Smad3ex8 ex8突变纯合子小鼠还表现出典型的骨关节炎、骨质疏松和创伤愈合速度加快表型。因此 ,Smad3ex8 ex8突变纯合子小鼠有可能作为研究粘膜免疫缺陷和骨性关节炎等疾病发生的分子机制的模型动物 ,为了…     

杆状病毒表达的hZP3 B细胞表位嵌合肽的免疫活性研究

为研究杆状病毒系统表达的人透明带ZP3的B细胞表位嵌合肽(BCP)的免疫原性及其抗血清与人透明带的免疫交叉反应，重组z3bcp病毒用于感染sf9细胞以表达BCP。Tricine—SDS—PAGE用于分离感染液中的小相对分子质量表达产物，表达产物用于免疫小鼠制备抗血清，免疫细胞化学试验用于检验抗血清与人卵泡透明带的交叉反应性。结果显示，矽细胞被z3bcp病毒感染后，培养液中分离出一条相对分子质量约为6000的特异带，而正常矽细胞中没有等同的带。免疫细胞化学试验结果显示，该特异肽的抗血清能与人透明带特异结合，表明人透明带BCP嵌合肽在杆状病毒系统中成功表达，表达产物具有抗原性，抗血清能与人透明带特异结合。     

内皮细胞抑制素在毕节酵母中的表达与活性分析

采用PCR技术从人胎脑cDNA库中扩增了人内皮细胞抑制素基因。经DNA序列分析后将扩增的基因克隆至酵母载体pPICgK，获得的重组质粒pPIC9K-EDN转化毕节酵母GSll5，构建表达内皮细胞抑制素的酵母工程菌P.pastoris GSll5(pPIC9K-EDN)。SDS-PAGE分析结果显示：人内皮细胞抑制素在重组酵母GSll5(pPIC9K-EDN)中获得高效表达。用30L发酵罐构对建的工程菌进行高密度发酵，经甲醇诱导48h，生物量达到250OD，分泌量为150mg/L，发酵液经SP Streamline，SP Sepharose FF阳离子交换柱和SephamseHeparin Hi Trap柱纯化，产物纯度达到98％。纯化产物具有免疫活性并能抑制bFGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。     

本能与生物进化

较为详细地论述了达尔文主义及非达尔文主义对本能与进化之间的关系问题的分析，对本能能否遗传的问题进行了初步探讨。     

Therapeutic angiogenesis induced by human hepatocyte growth factor gene in hindlimb ischemia of dogs

A preclinical study of treating peripheral srtery occlusive disease(PAD) was performed by using a hepatocyte growth factor(HGF) gene-expressing vector,plasmid pUDKH,in a dog model with complete ischemia of one hindlimb.After ligation of femoral artery of one hindlimb,pUDKH was transferred directly into the ischemic limb muscles.The angiogenic activity of the plasmid pUDKH was evaluated.On D 30 after injecting once of pUDKH at differ-ent doses into local muscles immediately after operation,the degree of augmentation of collateral vessel formation was significantly greater than that treated by blank vector.In addition,the blood flow rate of femoral artery in dogs treated with pUDKH was recovered on D90,while the folw rate was only 1/5 tp 1/3 in control dogs.The pulse amplitude of pUDKH-treated dogs was recovered on D90,but it was hardly detectable in most of the control dogs.The side effects of intramuscular transfection of pUDKH were also investi-gated,and no significant positive change was found.It is suggested that angiogenesis induced by HGF gene has the potential for clincal use in the treatment of peripheral arte-rial diseases.     

神经干细胞的研究及应用前景

神经干细胞可持续增殖、分化产生神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。神经干细胞的这种特性为进行中枢神经退行性病变和损伤的治疗打下了基础。本文综述了神经干细胞的增殖与自我更新、分离与分化、胚胎干细胞定向诱导、神经干细胞的移植及其在体研究等研究现状，并对神经干细胞临床应用前景做出展望。     

细胞分裂素在mRNA和蛋白质水平上同时促进rbcS基因的表达

将紫萍半叶状体首先在不含细胞分裂素的培养液上于黑暗条件下培养10d，然后转移到长日照条件下、分别在含有或不含6—苄基嘌呤的新鲜培养液上培养．对半叶状体在培养过程中干重、叶绿素和可溶性蛋白含量方面的变化进行了分析，并且用Northern　blot的方法拉测了rbcS mRNA水平的变化，用SDS—PAGE分离和考马氏亮蓝染色的方法检测了其编码蛋白(1，5—二磷酸核酮糖羧化酶／加氧酶的小亚基，SSU)水平的变化．结果表明，6—苄基嘌吟显著地促进了半叶状体干重、叶绿素和可溶性蛋白含量、rbcS基因mRNA及其编码蛋白SSU水平的增加．由于在没有外源细胞分裂素的情况下，rbcS基因mRNA水平的增加并不能引起SSU水平的增加，所以认为细胞分裂素对该基因表达的促进作用同时发生在mRNA和蛋白质水平上．     

肝片吸虫抗原基因转基因苜蓿再生的研究

用直接转化法，将构建有肝片吸虫保护性抗原基因FH3的植物表达载体pBI121-FH3,导入感受态的根瘤农杆菌EHA105；以重组的根瘤农杆菌为介导，用叶盘法转化苜蓿外植体，筛选得到抗Kan转化外植体；抗性外植体通过诱导丛生芽和诱导生根，再生出完整植株，提出植株总DNA进行Southern blot，结果表明，FH3基因已经整合入苜蓿基因组中。