TDP对铜—甘氨酸络合物催化抗坏血酸有氧氧化动力学的影响

本文考察了在TDP处理后,铜—甘氨酸络合物催化抗坏血酸有氧氧化的动力学规律。发现在该条件下的各类反应遵守米氏规律,其最大反应速率明显升高。并对其反应机理提出了一种解释。     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶同工酶的分离及其对底物的特性

用CM-纤维素柱从花椰菜的游离型过氧化物酶提取液中分离得到6个酶峰,分别出现于不同洗脱浓度的NaCl洗脱液中,它们都具有过氧化物酶和吲哚乙酸氧化酶活性。从结合型过氧化物酶提取液中分离得到5个酶峰,其中被115mmol.l~(-1)NaCl洗脱的为一高活性吲哚乙酸氧化酶峰,它的过氧化物酶活性很低。其余的酶峰都具有两种酶的活性。用不同的底物测定同工酶的活性,得到很不相同的结果。不同的同工酶的最适pH因底物不同而异,愈创木酚为pH5.0～6.0,咖啡酸为pH4.5～5.0,阿魏酸为pH8.5～9.0,但各同工酶之间没有明显差异。     

莲藕中多酚氧化酶的性质

以冷冻丙酮制备莲藕多酚氧化酶丙酮粉，用分光光度法研究pH值、温度、底物浓度、抑制剂对酶活性的影响.结果表明，以邻苯二酚为底物，莲藕ppo的最适pH值为7.0，最适温度为35 ℃；Km为22.7 mmol/L，Vm为0.625 OD/min，100 ℃热处理25 s可钝化ppo的活性；抗坏血酸、亚硫酸钠为强烈抑制剂，1.75×10^-4的抗坏血酸和3.00×10^-4 的亚硫酸钠能有效抑制ppo的活性.     

TS制剂对桑树萎缩病的防治机理

用植物病毒防治剂（ＴｈｅＶｉｒｏｃｉｄｅｆｏｒＰｌａｎｔ）—ＴＳ制剂喷洒感病桑树植株后,用聚丙烯酰胺凝胶电泳对叶片多酚氧化酶、过氧化物酶进行同功酶比较,发现处理株多酚氧化酶的酶带数和对照株相同,均为４条,但酶带位置、强弱有差异;处理株过氧化物酶有４条基本酶带,而对照株有３条酶带,处理株出现一条新酶带．处理株多酚氧化酶活性感病后期比感病初期提高１．６倍,对照株酶活性提高１倍,而过氧化物酶活性感病后期比感病初期下降６０％,而对照株酶活性下降８０％．用紫外分光光度计测蛋白质含量,处理组为０．３ｇ／Ｌ,对照组为０．３８ｇ／Ｌ,表明经ＴＳ制剂处理比对照桑萎缩病的病株蛋白质含量降低．     

生物传感器用于葡萄酒中葡萄糖含量测定的研究

将葡萄糖氧化酶(GOD)固定再生丝素蛋白在中,制得葡萄糖氧化酶传感器。该传感器在pH=7.0的磷酸缓冲溶液中,葡萄糖浓度在1.0×10-4 —2.5×10-3mol/L范围内呈良好线性关系。检测限5.0×10-5 mol/L,响应时间1分钟。该传感器用于葡萄酒中葡萄糖含量的测定,与酶-比色法测得结果一致。     

酶形式差异的三酶系统一步法转化头孢菌素C制备7-氨基头孢烷酸

【目的】对酶形式差异的三酶系统一步法裂解头孢菌素C(CPC)制备7-氨基头孢烷酸(7-ACA)进行研究。【方法】对重组大肠杆菌分别进行摇瓶和发酵罐高密度表达,获得最高酶活后使用两个形式差异的三酶系统一步法转化CPC制备7-ACA。【结果】相较于摇瓶发酵,发酵罐发酵获得的酶活更高,发酵罐上对重组大肠杆菌的高密度表达发现,补料流加总量为400mL的甘油混合液(15%甘油+7.5%鱼蛋白胨,W/V),发酵72h后菌浓度达到32.79g/L、最高的戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶(GA)和过氧化氢酶(CAT)活力分别为7 099.85U/L和15 776.20U/L。利用一个三酶系统包括固定化D-氨基酸氧化酶(DAAO)、游离GA和CAT,一步法催化CPC获得的7-ACA生成率为87.28%;而另一个三酶系统包括固定化DAAO、冻融细胞GA和CAT一步法催化CPC获得的7-ACA生成率为87.10%。【结论】两种酶形式差异的三酶系统一步法制备7-ACA的得率大致相等。GA对α?酮己二酰-7-氨基头孢烷酸(AKA-7-ACA)的特异性和水解能力较差,限制了该工艺运用。     

环境胁迫和乙烯对番茄ACO1基因表达的影响

克隆番茄ACC氧化酶1(LeACO1)基因特异片段,以此作为探针,与经过干旱和干旱后复水、淹水、伤害、不同温度等胁迫环境及乙烯处理的番茄总RNA进行Northern杂交,杂交结果表明,LeACO1基因的表达被干旱抑制,被复水、外源乙烯强烈诱导;淹水处理对叶片中该基因的表达无影响,而强烈诱导其在茎中的表达;37℃高温处理可以诱导LeACO1基因在番茄茎中的表达;伤害对该基因的表达没有明显影响.     

基于多壁碳纳米管修饰的葡萄糖生物传感器

用循环伏安法在玻碳电极表面电沉积了一层稳定的甲苯胺蓝聚合物膜,以此作为电子传递介体,结合多壁碳纳米管、壳聚糖(CHIT)、葡萄糖氧化酶(GOD)混合包埋制备出一种新型葡萄糖生物传感器.实验结果显示,用此法制备的传感器对葡萄糖的线性响应范围为5.0×10-6~2.0×10-2mol/L,线性相关系数为0.9969,检测限为1×10-6,响应时间为3.2 s,并具有抗尿酸、抗坏血酸等干扰的特点.     

丙酮酸氧化酶方法在血清ALT检测中的应用

目的：探讨丙酮酸氧化酶法在测定血清丙氨酸氨基转移酶中的作用．方法：利用丙酮酸氧化酶氧化丙酮酸生成过氧化氢,过氧化氢与2,4,6三溴-3-羟基苯甲酸和4-氨基比林在过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物的原理．结果：该方法线性范围达200U／L,与紫外酶偶联速率法比较,相关系数r=0．989,y=1．075x＋1．031,n=80．结论：该方法具有线性范围大、灵敏、操作简便、快速、结果准确、重复性好、抗干扰能力强等优点,适合血站大批量标本的检测．     

栗子多酚氧化酶催化动力学及抑制机理的研究

用丙酮从栗子中提取多酚氧化酶, 用分光光度法测出酶催化反应的最佳条件是ｐＨ 值为６ ．３ , 温度为２５ ℃, 反应活化能等于２４ ．３６ ｋＪ·ｍｏｌ－ １ , 米氏常数ＫＭ＝ １ ．０５４ ×１０ － ２ｍｏｌ·Ｌ－１ ; 研究了八种抑制剂对酶活性的抑制作用,其中柠檬酸的抑制机理是属于可逆竞争性抑制, 求得与抑制有关的常数ＫＩ＝ １ ．３４ ×１０ － ２ｍｏｌ·Ｌ－ １ , 对果蔬的保鲜有重要的指导意义