番茄同工酶的比较和分离

①对茄科七个种的过氧化物酶酶谱作极点排序的结果,与分类体系相一致,并且Lycopersicon 的两个亚属间分化是明显的。②番茄芽期酶谱适合于品种间的比较,过氧化物酶和细胞色素氧化酶的酶谱排序结果近似,F_1的排序都接近于母本,而酯酶的排序则处于双亲的中间。意味着前两种酶可能与细胞质因素有关。③F_2的过氧化物酶酶谱分离中有2条带与标记的分离相关联,但研究标记的染色体已知并无基因座位。④细胞色素氧化酶有2条带呈现分离,前者显示为细胞质遗传现象,后者显示为9∶7互补遗传现象,并与标记性状分离完全对应,意味着互补因子存在在标记染色体上的可能性。     

降解胆固醇的假单胞菌DGC-2的发酵培养基和培养条件

从动物粪便样品中分离出一株胆固醇氧化酶活力较高的DGC-2菌株,经鉴定为假单胞菌.利用单因子实验和正交试验对DGC-2菌株产胆固醇氧化酶摇瓶发酵的培养基及培养条件进行优化.其产酶的最适培养基为:蔗糖5 g/L,酵母粉3 g/L,牛肉膏1 g/L,吐温-80 1 g/L,胆固醇1 g/L,NH4NO31 g/L,KH2PO40.25 g/L,MgSO4.7H2O 0.25 g/L,FeSO40.001 g/L;最适培养条件为:初始pH6.5,接种量8.0%(v/v),32℃培养50h.在最适培养基及最适培养条件下,胆固醇氧化酶的活力可达到712 U/L.     

基于金纳米的第3代平面型葡萄糖传感器的研究

在制备亲水金纳米颗粒的基础上，与明胶一起固定葡萄糖氧化酶（GOD），制得具有纳米增强效应的葡萄糖传感器。实验表明：纳米颗粒能够大幅度地提高固定酶的催化活性，提高响应灵敏度，且电极响应迅速，一般在5s之内就能测得稳定的电流响应值。讨论了纳米颗粒在酶固定化及其对葡萄糖响应中所起的作用，为基于直接电子传递的第3代生物传感器折研制和开发、以及扩展纳米颗粒的应用领域提供了技术参考信息。     

Involvement of NADPH oxidase NtrbohD in the rapid production of H2O2 induced by ABA in cultured tobacco cell line BY-2

The mechanisms for the production of hydrogen peroxide （H2O2） induced by abscisic acid （ABA） were investigated in suspension culture cells of tobacco BY-2 cells. The results showed that the immediate generation of H2O2, which was mainly derived from super-oxide dismutase-catalyzed dismutation of superoxide radical, was significantly induced by ABA. Furthermore, treatment of the cultured tobacco cells with ABA resulted in a time-dependent quick increase in plasma membrane （PM） NADPH oxidase activity, which coin- cided on time and magnitude with the elevation in ABA-induced accumulation of H2O2. Moreover, these enhanced effects were pro- nouncedly inhibited by two NADPH oxidase inhibitors, diphenylene iodonium and imidazole, suggesting that PM NADPH oxidase is involved in the rapid accumulation of H2O2 in cultured tobacco cells. In addition, analysis of the expression level of NtrbohD, a PM NADPH oxidase gene in tobacco, by RT-PCR and protein gel blot revealed that the gene at both mRNA and protein levels was upregulated by ABA, indicating that NtrbohD participates in the ABA-stimulated rapid production of H2O2 in tobacco culture cells. Taken together, these findings suggest that ABA induces the rapid accumulation of reactive oxygen species via NADPH oxidase in sus-pension culture cells of tobacco, and that NADPH oxidase and H2O2 appear to be important components in ABA signal transduction pathway in plants.     

不同烟草品种罹黑胫病后几种酶活性的变化

文章就黑胫病表现不同抗性的两烟草品种接种黑胫病菌后,对其叶片内苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)的活性进行了测定。结果表明,接种后抗病品种的PAL、PPO及POD活性水平皆明显高于对照,感病品种的PAL、PPO及POD活性水平也高于对照,但接种后抗病品种的PAL、PPO及POD活性水平前期增加速度明显高于感病品种。另外,接种后抗病品种和感病品种与各自对照相比皆未出现新的酶带,只是几个酶带的强弱发生了变化。     

复合污染底泥植物修复过程中多酚氧化酶活性变化

为了确定不同植物对复合污染底泥的修复效果,采用室外盆栽试验,比较了不同植物修复方式、互作条件下多酚氧化酶活性。结果表明:(1)植物-菌根真菌以及植物-菌根真菌-土著细菌联合修复方式,能够提高多酚氧化酶的活性,促进植物生长并吸收底泥中污染物;(2)玉米和黑麦草互作过程中,玉米-菌根真菌联合修复方式修复效果较好。黑麦草和紫花苜蓿互作过程中,黑麦草-菌根真菌修复方式的效果较好;(3)低温对酶活性影响较大。研究结论有助于确定复合污染底泥的最佳修复方式。     

中华芦荟多酚氧化酶的分离纯化

采用丙酮粉沉淀抽滤法从中华芦荟中提取多酚氧化酶.提取的粗酶液经30%~80%硫酸铵分级沉淀,透析除盐,DEAE-Sephadex A-50阴离子交换柱层析,后经PEG 6000浓缩,得到纯化的多酚氧化酶,其纯化倍数为13.28.纯化后的酶液经SDS-PAGE电泳分析,采用考马斯亮蓝R-250染色显示为单一蛋白带,分子量约为54.1 KD.     

基于葡萄糖氧化酶的纳米反应器的构建和应用

蛋白酶在调节和维持生命系统的正常功能方面发挥着重要作用，因而被广泛应用于疾病的诊断和治疗.裸露的天然蛋白酶具有易失活、变性、无法直接进入细胞等缺点，极大地限制了其应用和发展.因此，构建高效、安全、可运输蛋白酶进细胞的纳米载体是一个迫切需要解决的问题.以葡萄糖氧化酶（GOx）为结构模板，合成了纳米级的沸石型金属-有机框架材料，构建了一种基于GOx的纳米反应器.该纳米反应器的蛋白负载量较高，而且可以很好地保存蛋白酶活性，发挥催化作用.细胞学实验结果证明：该纳米反应器可以有效进入肿瘤细胞，并定位在溶酶体处，消耗细胞内的葡萄糖，并产生过氧化氢（H₂O₂），从而导致癌细胞的死亡.构建的纳米反应器为功能蛋白质的细胞内递送提供了一个新的安全、高效的平台.     

牡丹不同类型总酚含量与PPO活性研究

以19个不同花型或花色的牡丹品种为试材,通过测定牡丹外植体总酚含量和多酚氧化酶(PPO)的活性,探讨了影响牡丹组培褐化的内在诱因,以期为牡丹的组织培养提供参考.     

响应面法优化黑曲霉产葡萄糖氧化酶条件

运用响应面法对黑曲霉(Aspergillus niger)产葡萄糖氧化酶以及发酵条件进行了优化。根据单因素实验结果,利用Plackett-Burman设计对影响其产酶相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的3个因素：葡萄糖,玉米浆和碳酸钙。用最陡爬坡试验逼近以上3个因子的最大响应区域后,采用Box-Behnken设计以及响应面分析法,确定其优化后发酵条件为(g/L)：葡萄糖172.11、玉米浆11.05、碳酸钙52.29、牛肉蛋白胨3.5、（NH₄）H₂PO₄ 0.5、KCl 0.15、MgSO₄·7H₂O 0.125、FeSO₄·7H₂O 0.125,220r/min,30℃培养48h。优化后的葡萄糖氧化酶酶活达786.3U/g,比在种子培养基中酶活350.5U/g提高了2倍左右。