Involvement of NADPH oxidase NtrbohD in the rapid production of H2O2 induced by ABA in cultured tobacco cell line BY-2

The mechanisms for the production of hydrogen peroxide （H2O2） induced by abscisic acid （ABA） were investigated in suspension culture cells of tobacco BY-2 cells. The results showed that the immediate generation of H2O2, which was mainly derived from super-oxide dismutase-catalyzed dismutation of superoxide radical, was significantly induced by ABA. Furthermore, treatment of the cultured tobacco cells with ABA resulted in a time-dependent quick increase in plasma membrane （PM） NADPH oxidase activity, which coin- cided on time and magnitude with the elevation in ABA-induced accumulation of H2O2. Moreover, these enhanced effects were pro- nouncedly inhibited by two NADPH oxidase inhibitors, diphenylene iodonium and imidazole, suggesting that PM NADPH oxidase is involved in the rapid accumulation of H2O2 in cultured tobacco cells. In addition, analysis of the expression level of NtrbohD, a PM NADPH oxidase gene in tobacco, by RT-PCR and protein gel blot revealed that the gene at both mRNA and protein levels was upregulated by ABA, indicating that NtrbohD participates in the ABA-stimulated rapid production of H2O2 in tobacco culture cells. Taken together, these findings suggest that ABA induces the rapid accumulation of reactive oxygen species via NADPH oxidase in sus-pension culture cells of tobacco, and that NADPH oxidase and H2O2 appear to be important components in ABA signal transduction pathway in plants.     

羧酸二茂铁为介体的生物传感器的研究

本文采用羧酸二茂铁碳糊修饰电极为基体电极，以牛血清白蛋白和戊二醛为交联剂将葡萄糖氧化酶固定在此电极上，并敷一层浸有Ｎａｆｉｏｎ的尼龙网，制成葡萄糖生物传感器。这种介体修饰电极传感器用于测定葡萄糖浓度，其线性范围在５．０×１０－４～１．４×１０－２ｍｏｌ／Ｌ之间，响应时间为４０ｓ。该传感器具有灵敏度高，选择性和重现性好等优点。     

番茄同工酶的比较和分离

①对茄科七个种的过氧化物酶酶谱作极点排序的结果,与分类体系相一致,并且Lycopersicon 的两个亚属间分化是明显的。②番茄芽期酶谱适合于品种间的比较,过氧化物酶和细胞色素氧化酶的酶谱排序结果近似,F_1的排序都接近于母本,而酯酶的排序则处于双亲的中间。意味着前两种酶可能与细胞质因素有关。③F_2的过氧化物酶酶谱分离中有2条带与标记的分离相关联,但研究标记的染色体已知并无基因座位。④细胞色素氧化酶有2条带呈现分离,前者显示为细胞质遗传现象,后者显示为9∶7互补遗传现象,并与标记性状分离完全对应,意味着互补因子存在在标记染色体上的可能性。     

中华芦荟多酚氧化酶的分离纯化

采用丙酮粉沉淀抽滤法从中华芦荟中提取多酚氧化酶.提取的粗酶液经30%~80%硫酸铵分级沉淀,透析除盐,DEAE-Sephadex A-50阴离子交换柱层析,后经PEG 6000浓缩,得到纯化的多酚氧化酶,其纯化倍数为13.28.纯化后的酶液经SDS-PAGE电泳分析,采用考马斯亮蓝R-250染色显示为单一蛋白带,分子量约为54.1 KD.     

不同剂量60Co-γ射线对水稻幼苗生长、根系蛋白及一些氧化酶活性的影响

不同剂量６０Ｃｏ－γ射线照射水稻种子,其幼苗、幼根生长明显受抑制,在一定剂量范围内,随剂量增大,ＳＯＤ酶活性下降、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性大幅度升高,酯质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量迅速积累．根系内全蛋白则随辐射剂量的变化明显出现“消、长”现象．上述结果表明,受６０Ｃｏ－γ射线胁迫后,水稻幼苗细胞膜受到损伤,而且蛋白质产生变化,但水稻也具有耐辐射的能力     

乙二醇钛的制备与应用研究

用尼莱斯方法合成了一类新型的有机钛酸酯——乙二醇钛(Ti(OCH2CH2O)2)晶体,并用TG—DTA、FT—IR、透射电镜(TEM)、XRD粉末衍射对其进行了表征。XRD衍射及TEM结果表明该化合物是由Ti—O八面体共棱相连构成的链状聚合物。乙二醇钛作为聚对苯二甲酸乙二酯(PET)的缩聚催化剂,表现出了较锑系催化剂(Sb2O3)更高的催化活性。     

重金属离子对扁玉螺细胞色素氧化酶的影响研究

测定子扁玉螺肝脏中细胞色素氧化酶活力,其最适温度为４４℃,最适ＰＨ值７．０研究了Ｆｅ＾３＋,Ｃｕ＾２＋,Ｚｎ＾２＋三种重金属离子在离体条件下对该酶的影响,结果显示：低浓度的Ｆｅ＾３＋Ｃｕ＾２＋对其具有激活作用,高浓度的Ｆｅ＾３＋,Ｃｕ＾２＋及低浓度的Ｚｎ＾２＋对其具有显著的抑制作用。     

磷酸盐缓冲液法提取茶叶多酚氧化酶的工艺研究

采用磷酸盐缓冲液提取法,研究了从茶鲜叶中提取多酚氧化酶的最佳工艺条件.结果表明,茶鲜叶多酚氧化酶提取的最佳工艺条件为pH 6.4,料液比(茶叶g∶缓冲液mL)为1∶1,离心转速为9000 r/min,离心时间35 min.     

磁性纳米Fe_3O_4颗粒掺杂多壁碳纳米管修饰的葡萄糖生物传感器

磁性纳米Fe3O4颗粒掺杂多壁纳米碳管混合分散于壳聚糖中,得到壳聚糖胶质液.将其修饰到玻碳电极表面,通过交联剂戊二醛固定葡萄糖氧化酶,制得一种新型的传感器.该传感器在pH＝6.8的磷酸盐缓冲溶液中.对葡萄糖的线性响应范围为1.0×10-5～2.3×10-2 mol/L,响应时问5.3 s.     

豇豆幼叶多胺氧化酶的分离纯化

依次经粗提、φ为３５ ％ ～６０％ 硫酸铵分步沉淀、φ为７０ ％ 丙酮沉淀、ＤＥＡＥＣｅｌｌｕｌｏｓｅ柱层析、Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｃｌ４Ｂ柱层析和羟基磷灰石柱层析等步骤后首次从豇豆幼叶得到电泳均一的、亚基相对分子质量约为７０ ０００ 的多胺氧化酶． 纯化倍数为４７３３, 产率为１３１ ％ ． 该酶在０１ ｍｏｌ／ＬＰＢＳ（ｐＨ７０ ～７５） 中较为稳定, 冷冻（ － １５ ℃） 贮存则可保持２０ ｄ 内不失活