不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定

建立不同部位灵芝及子实体提取物中总三萜酸含量测定方法.灵芝样品用乙醇提取,依次经氯仿、5%碳酸氢钠萃取,酸化后再用氯仿萃取、浓缩至干,称重,即得灵芝总三萜酸量.结果:灵芝子实体总三萜酸为(8.58±0.25)mg/g,孢子粉为(3.48±0.03)mg/g,菌丝体仅为(1.75±0.09)mg/g;菌盖总三萜酸含量为(12.62±0.22)mg/g,菌柄为(7.66±0.08)mg/g.10批次灵芝子实体的总三萜酸含量范围为4.3416.39 mg/g.灵芝子实体提取物中的总三萜酸含量以醇-水提取物的最高为(208.70±5.54)mg/g;碱水提取物的最低,仅为(123.07±4.99)mg/g.HPLC初步分析子实体和孢子及子实体提取物间三萜酸成分大部分相同.本法适用于灵芝子实体及其提取物、灵芝孢子和菌丝体总三萜酸的含量测定,结果可靠,可为灵芝产品质量指标提供依据.     

八个灵芝属菌株的分子标记与亲缘关系鉴定

采用RAPD技术对八个不同的灵芝株系进行遗传多样性分析。经筛选得到四个随机引物,共扩增出52条DNA片断,其中多态性条带为43条,多态性位点频率为82.7%,说明灵芝间遗传多样性较为丰富。利用POPGENE软件计算遗传距离并建立UPGMA聚类图,可将八种灵芝株系分为两个组群。通过分析DNA指纹图谱,找到了有代表性的特异条带,为进一步开发稳定的、优势菌株特异的分子标记奠定了基础。     

灵芝菌液态发酵富硒大豆过程中酶活性的研究

以富硒大豆豆乳为培养基,接种灵芝菌种进行发酵,对发酵过程中的酸性蛋白酶、中性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力变化趋势进行研究.结果表明,在0～132 h范围内,酸性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力呈增加趋势,发酵至132 h,酸性蛋白酶、淀粉酶、内切β-1,4-葡聚糖酶、外切β-1,4-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶活力达最大值,分别为9.87、0.87、0.951、.07、1.85 U/mL,中性蛋白酶活力在发酵108 h达最大值5.35 U/mL.     

不同生长期赤芝的药效品质及主要药效成分的研究

对段木栽培不同生长期的赤芝水煎液样品,分别进行小鼠负重游泳试验、戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠试验、小鼠急性缺血性缺氧试验、对S180荷瘤小鼠瘤重影响试验及对PC12细胞分化影响试验,并分别测定其多糖和三萜的含量.研究发现,赤芝菌柄期的样品对戊巴比妥钠所致的小鼠睡眠时间有一定的延长作用,对急性脑缺血性耐缺氧的小鼠的喘气时间有显著的增加,并对PC12细胞分化影响最为明显,赤芝子实体期的样品能明显延长小鼠负重游泳时间,抑制S180荷瘤小鼠瘤重.结论：在以后赤芝的精深加工中,应根据实际需要确定其最适采收期.     

赤灵芝及其孢子粉提取物缓解小鼠肝脏CCl4损伤的研究

用赤灵芝及其孢子粉混合提取后的流浸膏,以一定剂量每日灌胃处理组小鼠,用蒸馏水灌胃空白组和模型组,29天后,一次性给予除空白组外的各组小鼠一定剂量的CCl4,24 h后测定血清中ALT和AST的含量,同时取左侧肝脏进行组织病理学检查.结果显示:模型组小鼠的ALT、AST含量比空白组显著升高,低、中、高剂量组小鼠的ALT和AST含量较模型组低,差异显著或极显著.与模型组比较,各剂量组小鼠肝细胞损伤的各种病变有所减轻,气球变性、肝细胞坏死和总分等三项指标差异有统计学意义.表明赤灵芝及其孢子粉的提取物对小鼠CCl4肝损伤具有缓解的作用.     

3个灵芝菌株的特性比较

对３个灵芝菌株进行品比试验,结果表明：南韩灵芝的菌丝生长速度快,子实体发育迅速,产量高,抗污能力强,芝形整齐,菌盖大而厚,是一种理想的商品生产菌种;紫芝表面紫黑色,个体小,易污染,产量低,但子实体形态好;Ｇ５灵芝的生长速度、产量、抗污能力均介于南韩与紫芝之间,菌盖薄,色泽不均匀,不适宜作鲜菇生产。     

灵芝液体发酵培养条件的研究

灵芝的菌丝可获布于整个液体之中,所以菌丝发育比在固体培养基上迅速。我们采用液体摇瓶培养方法,对灵芝液体发醇培养的适宜温度,摇瓶装置,摇瓶振荡频率,培养基初始ＰＨ值进行了探讨,结果表明：灵芝液体发酵的适宜温度为２６℃,摇瓶装置为１２０ｍｌ／５００ｍｌ三角瓶,摇瓶振荡频率为１００－１２０次／分,培养基初始ＰＨ值为６．０－６．５。     

灵芝胞外多糖液体发酵培养基的优化

灵芝液体发酵过程中培养各主要成分之类间的比例对灵芝胞外多糖产量有明显影响。正交试验结果表明,当发酵培养基的配方为葡萄糖3.5%、（NH4）2SO40.1%、MgSO40.05%、KH2PO40.2%、酵母膏0.2%,培养基初始pH6.0,此时得到的胞外多糖（EPS）的量可以达到最大,实验中还进行了在不同培养基中灵芝菌丝体的生物量测定,结果表明生物量最高的培养基中灵芝胞外多糖的产量并非最高。     

三种大型真菌的深层培养研究

本研究以灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ）、金针菇（Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌａｔｉｐｅｓ）和香菇（Ｌｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓ）为供试品种，筛选得到的三株供试菌株能良好地进行深层培养。灵芝、金针菇长速较快，４８～９６小时为其增殖生长期；香菇为４８～１４４小时的增殖生长期，长速较慢。发酵罐中试培养灵芝、金针菇６４～７２小时生物量为３０ｇ／１００ｍｌ（鲜重）以上，而香菇则需９６～１２０小时才能达此指标。本研究为进一步开发应用提供了技术保证。     

猴头啤酒和灵芝啤酒的研制

应用食用菌深层液体发酵技术获得猴头，灵芝菌丝体发酵醪，再经胶体磨使细胞壁破碎后，与啤酒生产原料一起进行啤酒发酵而得猴头啤酒和灵芝啤酒。经检测，酒液中氨基酸总量分别为１６１７．６ｍｇ．Ｌ＾－１和１５１１．５ｍｇ．Ｌ＾－１，其中人体必需氨基酸分别占２０．５１％和２５．３５％。，其他各项指标均符合国家标准。