太平洋牡蛎肌肉蛋白的模拟胃肠液消化研究

采用美国药典提供的模拟胃液、肠液配方,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot),分析了太平洋牡蛎肌肉过敏蛋白和非过敏蛋白在体外模拟胃液、肠液消化稳定性的差异.结果表明:在模拟胃液中,非过敏蛋白均能被胃蛋白酶快速降解,而主要过敏蛋白原肌球蛋白在60 min时仍未被...     

醋酸纤维薄膜电泳法分离测定鸡血清蛋白质

应用醋酸纤维薄膜电泳法分离测定了鸡血清中不同蛋白质。对电流强度、电泳时间和点样量等影响分离效果的条件进行了选择。并用光度计和薄层扫描仪对样品进行了定量测定。     

氟喹诺酮类药物与蛋白质相互作用的研究

运用荧光淬灭机理研究了氟喹诺酮类药物洛美沙星,氧氟沙星,衣诺沙星与3种蛋白质(牛血清蛋白,免疫球蛋白,胰蛋白酶)之间的相互作用,计算了两者之间的结合常数和结合位点数,根据实验当中所得的热力学参数确定了它们之间的作用类型,氟喹诺酮类药物的含量与其荧光强度呈现良好的线性关系,在此实验条件下测定了胶囊及人工合成样中洛美沙星和衣诺沙星的含量,其浓度范围分别为0．018～0．878和0．030～3．171μg／mL。     

Polypeptide translocation machinery of the yeast endoplasmic reticulum

Proteins enter the secretory pathway by two general routes. In one, the complete polypeptide is made in the cytoplasm and held in an incompletely folded state by chaperoning adenosine triphosphatases (ATPases) such as hsp70. InSaccharomyces cerevisiae, fully synthesized secretory precursors engage the endoplasmic reticulum (ER) membrane by interaction with a set of Sec proteins comprising the polypeptide translocation apparatus (Sec61p, Sec62p, Sec63p, Sec71p, Sec72p). Productive interaction requires displacement of hsp70 from the precursor, a reaction that is facilitated by Ydj1p, a homologue of theEscherichia coli DnaJ protein. Both DnaJ and Ydj1p regulate chaperone activity by stimulating the ATPase activity of their respective hsp70 partners (E. coli DnaK andS. cerevisiae Ssa1p, resepectively). In the ER lumen, another hsp70 chaperone, BiP, binds ATP and interacts with the ER membrane via its contact with a peptide loop of Sec63p. This loop represents yet another DnaJ homologue in that it contains a region of 70 residue similarity to the J box, the most conserved region of the DnaJ family of proteins. In the presence of ATP, under conditions in which BiP can bind to Sec63p, the secretory precursor passes from the cytosol into the lumen through a membrane channel formed by Sec61 p. A second route to the membrane pore that is used by many other secretory precursors, particularly in mammalian cells, requires that the polypeptide engage the ER membrane as the nascent chain emerges from the ribosome. Such cotranslational translocation bypasses the need for certain Sec proteins, instead utilizing an alternate set of cytosolic and membrane factors that allows the nascent chain to be inserted directly into the Sec61p channel.     

巴西橡胶树树皮蛋白质组学分析体系的构建

巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是一种重要的产胶植物,其体内合成和贮存胶乳的地方是乳管系统,而乳管主要分布于树皮中。以10年生巴西橡胶树无性系“热研88-13”为研究对象,采用改进的三氯乙酸(TCA) 丙酮沉淀法提取树皮蛋白,使用17 cm,pH 4~7的IPG胶条进行双向电泳,得到良好的蛋白图谱。PDQuest软件(Bio rad)分析银染后的凝胶,共得到约350个蛋白点。从这些蛋白点中随机选取10个蛋白点经基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI TOF MS)分析后,搜索NCBInr数据库对蛋白进行鉴定。结果显示,这些蛋白主要包括两种来源于巴西橡胶树中的重要蛋白,即橡胶小粒子蛋白(Small rubber particle protein)和橡胶树凝集因子(hevein),此外还有一些其他功能和未知功能的蛋白。     

棉花细胞壁蛋白基因分离鉴定与表达分析

棉纤维起源于棉花胚珠外层表皮细胞．研究棉纤维发育,具有重要理论和实践意义．从棉纤维等组织cDNA文库中分离了186个棉花细胞壁结构蛋白基因,按照所编码的蛋白质结构特点,可将这些基因分为三类;富含脯氨酸细胞壁蛋白（Proline—rich cell wall proteins,PRPs）基因、伸展蛋白（Extensins）或者富含羟脯氨酸糖蛋白（Hydroxyproline—rich glycoprotein,HRGP）基因,富含甘氨酸蛋白（Glycine—rich proteins,GRPs）基因．采用cDNA microarray技术,比较上述基因在开花后10天的野生型棉花纤维和无絮无绒（fuzzless—lintless,fl）突变体胚珠表皮中表达谱发现,其中有7个基因在野生型纤维中特异性或高效性表达,表明它们可能与纤维发育有关．     

铜绿微囊藻气囊蛋白GvpW的异源表达纯化与晶体生长研究

铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa PCC 7806)是我国淡水湖泊生态系统季节性蓝藻水华爆发的最优势藻种,其爆发的机制之一在于气囊,它是一种充满气体的蛋白质性质的亚细胞器结构,可为藻细胞提供浮力,调节藻细胞在水体中的位置以利于生长和后续的生境殖民化。铜绿微囊藻的气囊合成涉及14个气囊蛋白,但大部分气囊蛋白在气囊合成过程中的具体分子功能尚不清楚。对其中一个气囊蛋白GvpW进行了分子克隆,利用原核表达系统在体外进行了异源表达,结合镍柱亲和层析和凝胶过滤层析纯化出了高纯度的GvpW,运用动态光散射和化学交联证实在体外纯化后的GvpW是呈单体状态,同时通过晶体初筛和优化获得了生长较好的蛋白质晶体。这为后续解析GvpW的三维结构及在分子水平直观探讨其在气囊合成中的生理功能奠定了基础。     

海洋生物黏附蛋白研究进展

海洋附着生物粘合蛋白的研究对于生物粘合剂的开发及海洋防污行业均具有重要的意义。综述了对贻贝足丝蛋白,藤壶胶蛋白以及管栖毛虫管胶蛋白的研究进展。3种不同生物的黏附蛋白具有某些相似性,同时又各有其结构特点,对其蛋白质结构,功能及粘合机制的研究既具有重要的学术意义也具有广阔的应用前景。     

低功率密度微波辐射对人细胞的非热效应

采用频率为２４５０ＭＨｚ，功率密度为３，５和７ｍＷ／ｃｍ＾２的微波照射人精子１ｈ，发现３ｍＷ／ｃｍ＾２和７ｍＷ／ｃｍ＾２的微波对人精子的活动度、存活率、畸形率和穿卵率没有任何影响，而５ｍＷ／ｃｍ＾２的微波对从精子的活动度、存活率、畸形率及其穿卵率有显著的影响。实现表明，微波的非热效应不仅存在，且在５ｍＷ／ｃｍ＾２附近有明显的功率密度窗效应。