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81.
采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%. 相似文献
82.
该文对Burgers方程的非古典势对称群进行研究,得到几类非古典势对称群生成元并用其求得Burgers方程的相应特解,这些新特解不能由Burgers方程本身的古典Lie对称与非古典Lie对称来获得。 相似文献
83.
基因组研究表明,人类与黑猩猩和老鼠的基因序列98%以上是相同的,是否是这1%~2%的基因的差异,就决定了人与黑猩猩和老鼠在表现型方面很大的差异?本文通过大量分析表明,由碱基(5个)→核酸[DNA→RNA(mRNA、rRNA、tRNA)]→氨基酸(22种)→蛋白质(数百千种)→染色体→基因组→性状,其遗传变异信息有逐级放大的过程。这是生物间基因序列虽然有98%甚至99%的相同,但表现型差异却较大的原因所在。基因序列完全相同,并不能说明基因功能相同,基因组研究的结果不能完全诠释基因功能表达的复杂过程。今后必将由序列基因组学→结构基因组学→功能基因组学→蛋白质组学深入发展,必须从网络层次研究基因表达,才能揭示生命的奥妙。另外我们使用的各种基因组研究技术和软件还有待改进,才能真正反映生物基因的差异。 相似文献
84.
本实验引物延伸合成人红细胞生成素信号肽序列;信号肽序列和人可溶性B淋巴细胞刺激因子(human soluble B Lymphocyte Stimulator,hsBLyS)基因重叠延伸拼接成融合基因;融合基因插入pcDNA3、pcDNA3.1、pEFneo质粒;信号肽引物设计时,突变同义密码,最终重组质粒成为分泌表达质粒;磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSV-dhfr,共转染CHO-dhfr^-细胞;选择培养液筛选,氨甲喋呤扩增表达,获稳定表达rhsBLyS细胞株;ELISA检测浓缩表达上清,结果表明:rhsBLyS表达量由0.13μg/mL上升至0.55μg/mL。 相似文献
85.
水杨酸对菜豆不同器官抗氰呼吸诱导与交替氧化酶表达的比较研究 总被引:4,自引:0,他引:4
作者研究了水杨酸(SA)处理对菜豆幼苗不同器官抗氰交替途径容量(Valt)、实际运行活性(ρValt)与AOX表达量的影响。结果表明:SA未处理的菜豆幼苗不同器官中均存在抗氰呼吸,其中真叶的Valt和ρValt最高,其次是子叶,而下胚轴的最低;SA处理24h以后,均可使菜豆幼苗3种器官Valt与ρValt显著提高,但不改变三者抗氰呼吸活性的大小顺序。显然,SA对菜豆抗氰呼吸只起到诱导作用,并不改变它们不同器官间的呼吸特异性。Western杂交分析结果显示:菜豆不同器官Vah与ρValt的差异与AOX蛋白水平的变化相关,真叶中AOX的表达量最多,下胚轴的AOX表达量最少;SA处理时,诱导菜豆幼苗不同器官抗氰呼吸增高的程度与AOX合成表达量的增加一致,二者紧密相关。 相似文献
86.
87.
水稻RSSG8基因启动子与GUS融合基因的构建及在烟草中的瞬间表达 总被引:1,自引:0,他引:1
使用染色体步移(Genome walking)法,从籼稻(Oryza sativa subsp.indica)桂朝2号基因组中克隆到长度为471bp的水稻精细胞优势表达基因RSSG8的启动子片段R8PN,并进行了全序列测定和分析.该段序列中含有3个CAAT-box,6个Gobox和多种植物顺式作用元件,但没有发现典型的TATA-box,推测为一种特殊的启动子结构,为了鉴定RSSG8基因的基本启动子元件,将二条长度不同的5’端侧翼区缺失体(分别长471bp,260bp)定向插入载体pBI121中,取代原有的CaMV 35S启动子,构了驱动报告基因GUS的植物表达载体pRGUS1,pRGUS2,通过农杆菌介导的瞬时表达法转化烟草叶片和花粉,快速鉴定启动子片段中起关键作用的区域,结果显示两个缺失片段都能启动GUS的表达,可以初步判定这两个片段具有启动子功能。 相似文献
88.
分泌性表达人rPA毕赤酵母工程菌株的构建及发酵条件的初步优化 总被引:2,自引:0,他引:2
通过PCR扩增得到组织型纤溶酶原激活剂突变体Reteplase(rPA)基因片断,将该基因片断插入到含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列载体pPIC9K中,构建了重组表达质粒pPICgK/rPA,转化Pichia pastoris GS115宿主菌.通过比较转化子在MM和MD平板上的生长状况,筛选His^ Mut^s表型转化子.并在2.0mg/mL G418平板筛选得到多拷贝转化子GR10,GR11.摇瓶培养,甲醇诱导外源基因表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明重组蛋白分子量约39ku,能与特异性单克隆抗体发生免疫反应;体外气泡法测定rPA活性,结果显示重组蛋白具有较好的纤溶活性.通过正交试验,优化发酵条件,表达活性最高为1050IU/mL. 相似文献
89.
针对一维抛物方程的初边值问题,在分组显式(GE)并行解法的基础之上,利用冗余计算来遮盖部分通信的重叠边界优化技术,结合曙光-2000并行计算机系统,得到了一个通信时问缩短、并行效率提高的分布式并行算法。 相似文献
90.
将ACLSV CP基因克隆到表达载体ρET-28a( )中,转化大肠杆菌BL21,筛选得到阳性克隆pET-ACP,用IPTG诱导使其表达,SDS-PAGE电泳分析表明,预期的22kD外壳蛋白在大肠杆菌中得到大量表达,并加以纯化,用于制备抗血清。 相似文献