鸡大肠杆菌病致病因素及其研究进展

对鸡大肠杆菌致病力或毒力因子等相关致病因素作了简要概述,讨论了相关领域的研究进展.1）大肠杆菌的菌毛抗原是一种特异蛋白质,可以被免疫系统所识别,因此在疾病的免疫预防和相关疫苗研制等方面有着重要意义.2）鸡大肠杆菌肠毒素中LTB和STn亚单位具有良好的免疫原性,认为在降低ST的生物毒性有所突破的前提下,借用基因重组融合技术以及优化重组基因表达,是利用该毒素因子免疫防治的发展趋势.3）诸多实验研究表明,提纯的大肠杆菌OMP或通过基因工程表达的OMP同样具有良好的免疫原性和保护作用.某些细菌的不同血清型间有相同的OMP免疫原,这为OMP亚单位疫苗以至于基因疫苗的研发都提供了理论基础.     

秀丽隐杆线虫胆固醇7,8-脱氢酶在大肠杆菌中的表达

胆固醇7,8–脱氢酶是参与胆固醇代谢的还原酶,可以将胆固醇转化为7–脱氢胆固醇(合成维生素D3的重要中间体).合成秀丽隐杆线虫的胆固醇7,8-脱氢酶基因daf-36,与具有T7强启动子的载体pET32a(+)连接后,成功构建pET32a-daf-36表达质粒,转入大肠杆菌表达系统E.coli BL21(DE3)和E.coli Rosetta(DE3),经过IPTG诱导培养,蛋白质电泳图谱及质谱结果表明此酶得到了高效表达.     

外源基因表达系统的研究进展

最近20多年来,随着重组DNA技术的迅速发展,对于克隆基因表达问题的研究也日渐深入,并积累了相当丰富的知识。外源基因的表达系统包括原核表达系统和真核表达系统,它们各有优缺点,在选择时应衡量使用。     

规模化鸡场粪样和苍蝇产CMY-2大肠杆菌中耐药基因与毒力基因调查及其共转移研究

为了解全国20家规模化鸡场粪样和苍蝇产CMY-2大肠杆菌中耐药基因与毒力基因的流行现状及其共转移情况,对2013-2015年间分离自粪样和苍蝇中的549株大肠杆菌,采用聚合酶链反应（PCR）方法筛选出blaCMY-2阳性菌株;脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析blaCMY-2阳性菌株的遗传进化关系;K-B纸片法检测阳性菌株对13种抗菌药物的耐药性;利用PCR技术检测19种相关耐药基因以及14种毒力基因;接合转移试验和质粒复制子分型研究耐药基因及毒力基因的传播方式。结果,33株大肠杆菌呈CMY-2阳性,阳性率为6.0 %,且均表现为多重耐药;检测到15种耐药基因（blaTEM-1、blaCTX-M-55、blaOXA-1、qnrBDS、aac(6’)-Ib-cr、oqxA、tetA、tetC、sul1、sul2、sul3、rmtB和flor）和4种毒力基因（iutA、traT、fyuA和VagC）;33株携带blaCMY-2基因菌株中有21株接合转移成功,blaCMY-2基因可通过lncA/C或lncI1质粒与耐药基因（blaTEM-1、blaCTX-M-55、tetA或sul2）和（或）毒力基因（traT或VagC）共同转移。本研究阐明了规模化鸡场产CMY-2大肠杆菌携带耐药基因与毒力基因的情况,证实了细菌中质粒介导的耐药与毒力的共转移,为耐药性传播及疾病防控提供了参考。     

响应曲面法优化重组人神经生长因子发酵培养基组成的研究

通过响应曲面法(RSM)达到优化重组人神经生长因子发酵培养基组分含量的目的.对发酵基础培养基采用四因素三水平实验设计,优化了葡萄糖、酵母粉、蛋白胨和KH2PO4的最佳浓度,得到了最大预测值并进行了验证.最终优化培养基组分为:葡萄糖7.95 g/L、蛋白胨19.06 g/L、酵母粉13.51 g/L和KH2PO43.87g/L,此时预测最大菌体量Ymax=2.398 g/L.验证试验结果表明:使用优化后的培养基表达重组人神经生长因子,其菌体量的平均值为(2.357±0.083)g/L,实验值与预测值基本相符,均高于优化前菌体量,且其表达量也得到相应提高.     

盆炎净颗粒对大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎模型的影响

目的观察盆炎净颗粒对大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎动物模型的作用。方法采用大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎动物模型,观察盆炎净颗粒对慢性盆腔炎模型大鼠的影响。结果盆炎净颗粒有改善大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎的血瘀状态、明显减轻大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎动物模型子宫炎症肿胀度、改善大肠杆菌所致大鼠慢性盆腔炎模型子宫内膜病变程度。结论盆炎净颗粒对大肠杆菌致大鼠慢性盆腔炎有显著的治疗作用。     

三种大肠杆菌高效感受态的制备及转化

描述了一种改良的高效细菌感受态的制备和感受态细胞的保藏及细菌的转化方法.三种不同的大肠杆菌分别是DH5α,TG1和XL1blue,其中最有效的是XL1blue.每种菌株的感受态细胞制备的最佳光密度(OD600值)不同.对感受态细胞的存储时间及其与转化效率之间的关系也进行了研究,结果显示感受态细胞可以在-20℃存储7d,在-70℃存储15d.将常见的方法做了三种改进:首先是将CaCl2溶液改为TB溶液;其次是将培养基由LB换成S.O.C;再就是在质粒对感受态细胞的转化过程中加入DMSO或PEG8000.改良的细菌转化系统比常见的方法能提高转化效率约1000倍,是一种高效的细菌转化系统.     

纳米In2O3抗菌活性研究

采用最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）首次对纳米In2O3,的抗菌性能进行了研究．试验结果表明,纳米In2O3具有较好的抑菌和杀菌活性,对大肠杆菌的MIC为0．04ms／mL;对大肠杆菌的MBC为0．3mg／mL．时间动力学研究表明,纳米In2O3,与大肠杆菌作用30min后杀菌率达到99％以上．     

微量热法研究金银花中绿原酸的拟菌性能

从金银花中提取其有效成分绿原酸,用热活性检测仪测定了不同浓度的绿原酸中大肠杆菌生长代谢的热功率-时间曲线,由Logistic方程计算绿原酸的最佳拟菌浓度.     

潍坊地区仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定

为了掌握潍坊地区猪群中导致仔猪黄痢的致病大肠杆菌的主要血清型及分布情况,研制与本地区血清型一致的菌苗,有效防治仔猪黄痢的发生,用细菌分离培养的方法,对潍坊地区6个养猪主要县市的14个规模化猪场和22个养猪专业户采集疑似仔猪黄痢病料76份,共分离出65株致病性大肠杆菌,并用大肠杆菌O抗原单价血清对其进行血清型鉴定。结果表明,65株致病性大肠杆菌中有45株能确定血清型,分布在9个血清型中,其中优势血清型为O8(11株),O9(9株),O141(8株),占定型菌株的62.2%,其余血清型为O45(3株)、O147(3株)、O20(2株)、O157(3株)、O101(4株)、O119(2株)。