根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

不同培养基和生长调节剂对细叶小羽藓生长发育及愈伤组织诱导的影响

对淮河上游南湾湖周边的细叶小羽藓(Haplocladium microphyllum)的孢子生长发育进行观察,发现细叶小羽藓孢子无休眠现象,孢子接种2天左右萌发;扩大培养实验结果表明,细叶小羽藓无菌原丝体在1/2 MS培养基上置于20℃±2℃、12 h光照/12 h黑暗条件培养,产生配子体最多,且配子体长势最好,可以获得大量无菌材料;细叶小羽藓愈伤组织诱导实验显示,形成愈伤组织的最佳培养基为添加1%葡萄糖+1.5 mg/L6-BA+0.25 mg/L 2,4-D的MS培养基.     

抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织的诱导及增殖

以抗松材线虫病赤松未成熟合子胚为外植体,研究了合子胚发育阶段、激素种类及浓度以及碳源等对胚性愈伤组织诱导的影响。结果表明:发育至2~4阶段的合子胚为胚性愈伤组织诱导的适宜外植体,2,4-D和6-BA是最优激素组合,麦芽糖比蔗糖、葡萄糖更有利于胚性愈伤组织的诱导。抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织诱导率总体较低,以DCR为基本培养基,添加2 mg/L 2,4-D和1 mg/L 6-BA时诱导率最高为5.0%,诱导的胚性愈伤组织在增殖培养基上能够稳定增殖。     

东方百合杂种系愈伤组织分化小鳞茎的研究

选用东方百合杂种系Siberia、Sorbonne和Starfight的花丝愈伤组织,接种到蔗糖浓度为30 g/L、60 g/L、90 g/L和BA 0.6 mg/L,BA 0.6 mg/L＋KT 2 mg/L,BA 0.6 mg/L＋KT 2 mg/L＋NAA 0.05 mg/L的MS基本培养基上研究小鳞茎的分化.结果表明：Siberia和Starfight愈伤组织分化小鳞茎的最佳组合为MS＋BA 0.6 mg/L＋KT 2 mg/L＋NAA 0.05 mg/L＋蔗糖30 g/L;Sorbonne为MS＋BA 0.6 mg/L＋蔗糖30 g/L.     

不同植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应

以华黄芪（ＡｓｔｒａｇａｌｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓＬ．）为材料,ＭＳ为基本培养基,设计不同浓度的ＮＡＡ、２,４－Ｄ、６－ＢＡ、ＫＴ等单因子试验和不同比值的细胞分裂素／生长素组合试验,探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应．结果表明：在愈伤组织形成过程中,单因子试验以５．０ｍｇ／ＬＮＡＡ、０．５ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ、１．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ、２０ｍｇ／ＬＫＴ诱导效果较好,诱导频率可达１００％,且生长势好．组合试验比单因子试验能更有效地诱导愈伤组织形成．在器官发生过程中,单独使用生长素类有不定根形成,ＮＡＡ效果较好,２,４－Ｄ次之．单独使用细胞分裂素类有不定芽的形成,６－ＢＡ效果较好,ＫＴ次之．组合试验中,细胞分裂素／生长素比值大时有利于不定芽的形成,反之则有利于不定根的形成     

香雪兰愈伤组织超低温保存的研究

对香雪兰愈伤组织超低温保存的几个因素进行了初步的讨论。实验结果表明：香雪兰愈伤组织的适宜冷冻年龄为１５－２０ｄ;较佳的冷冻程序是从０℃直接投入液氮的快速冷冻法;氯化三苯四氮唑在４℃化冻和４０℃水浴化冻时有着较高的光密度值。     

山苍子愈伤组织的诱导和培养条件

研究了山苍子愈伤组织的诱导和培养.结果表明: 在以MS 培养基为基本培养基的条件下, 在一个较宽的生长素浓度范围内,均可诱导发生山苍子的愈伤组织;不同类型的植物激素以及激素的不同浓度对愈伤组织发生有一定影响, 6-BA 2. 0+ 2. 4- D 2. 0 是较理想的组合. pH 值在5. 3~ 5. 8 之间的适合山苍子愈伤组织发生.     

不同温度培养对根癌农杆菌生长及水稻幼胚再生的影响

设计26,30,34,36,38,40℃6个温度对根癌农杆菌进行培养.结果显示:根癌农杆菌在38℃和40℃条件下无法生长;将水稻幼胚经26℃诱导获得的愈伤组织分别放置在农杆茵不能耐受的38℃和40℃环境中培养.并设计了7,14,21,28d不同培养时间,同时以26℃常规培养温度作为对照,分析在较高温度条件下培养对水稻愈伤组织再生的影响.结果显示:水稻幼胚诱导的愈伤组织经过38℃所有时间及40℃部分时间(7,14d)下模拟抗性筛选培养,仍然能够正常生长,而且经38℃、14d继代培养的愈伤组织植株再生率比26℃常规培养提高63.17%,统计分析两者达显著差异.     

医用抗生素对高等植物的作用研究现状

介绍了当前国内外医用抗生素对高等植物生理生化和生长发育的调控及遗传转化等方面的研究现状.业已发现,医用抗生素能诱导禾本科植物种子萌发时胚乳中α 淀粉酶的合成并促进幼苗的生长;促进叶片中叶绿素的合成和抑制其降解;促进茎叶的生长和根的形成及生长;促进或抑制植物组织培养过程中愈伤组织的形成及器官的再分化;防治植物病害等.医用抗生素在高等植物的遗传和转化等方面也有重要作用.     

驱蚊香草愈伤组织的诱导和增殖

以驱蚊香草（Pelargonium graveolens）的幼嫩叶片为外植体,接种于附加不同浓度的NAA、2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果表明：单独使用4种植物生长调节物质对驱蚊香草愈伤组织的诱导在一定浓度范围内都有效果,其中单独使用KT时效果不太明显;最佳的组合培养基为MS＋2,4-D0．2mg／L＋6BA0．5mg／L．在黑暗和光照培养条件下．愈伤组织的增殖呈“S”型,且生长周期均为30d．