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11.
极端嗜热厌氧纤维素分解菌基因文库的构建及其内切葡聚糖酶基因片段的克隆 总被引:6,自引:1,他引:6
以从云南邦拿掌温泉中分离、纯化的高温厌氧纤维素分解菌邦2菌(Cadicellulosiruptor)为材料,制备其总DNA,经限制性核酸内切酶EcoRⅠ部分酶切后,在T4DNA连接酶的作用下与经EcoRⅠ完全酶切、去磷酸化的质粒载体pUC18连接,然后转化E.coliJM109,建立了邦2的基因文库,经筛选鉴定得到6.3×103个重组子;重组子经刚果红平板验证:约有23.5%菌落呈现透明圈;重组子经EcoRⅠ酶切验证显示:重组质粒均含有外源DNA插入片段.结果表明已克隆到邦2菌纤维素酶系中的内切葡聚糖酶基因(ED基因)片段. 相似文献
12.
根据已经克隆的植物抗病基因和候选抗病基因的保守序列P-loop、Kinase-2及GLPLAL设计一系列简并引物,利用同源序列扩增法,对玉米的基因组DNA进行PCR扩增,并对5个扩增产物的克隆进行测序.测序结果在Gen—Bank内进行BLAST检索,发现A9克隆序列与玉米BAC库中的206C17克隆的部分序列有很高的相似性,并且距离GenBank内注册的玉米抗锈病基因rpl位点中的rpl-3基因、rpl-4基因分别约有66Kb、20Kb,且A9克隆序列在玉米基因组中是单拷贝的.这为玉米抗锈病性状的分子标记辅助选择和抗锈病基因的克隆奠定了良好的基础。 相似文献
13.
模拟了多向不规则波入射波与反射波相互叠加的合成波浪场,应用改进的最大似然法(MMLM)对入射波与反射波的方向谱进行了分离,同时给出了反射系数的方向谱和综合反射系数。改变不同的波浪条件和仪器阵列的布置条件,检验了MMLM的有效性和可靠性。将此方法应用于基床直立堤反射的实验研究,取得了较好的结果。 相似文献
14.
蛇形多向不规则波造波机波浪产生方法及特性 总被引:4,自引:0,他引:4
介绍了自行研制的蛇形多向不规则波造波机系统.造波机宽28m,由70块高0.9m、宽0.4m的造波板组成.在此基础上论述了分段式造波机产生波浪的原理及方法,并对其产生的斜向和多向不规则波的波浪统计特性以及波浪的频谱和方向分布进行了试验研究.结果表明,研制的造波机各项性能达到了预期的指标,可产生较理想的单向和多向不规则波. 相似文献
15.
给出了二元函数的二重极限、方向极限、弱二重极限的概念,指出了文[1]中定理6利用方向极限求二重极限的结论是错误的原因,纠正了文[1]中定理6的结论及其例7的解法。 相似文献
16.
17.
18.
纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究 总被引:5,自引:1,他引:5
以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。 相似文献
19.
黄力人 《华南师范大学学报(自然科学版)》2003,(2):1-3
给出了广义的实值函数f分别在R^N和在R^N的闭子集S上具有局部最小值点x的一阶和二阶充分和必要条件. 相似文献
20.