新型含1，2，4-三唑基的1，5-苯并硫氮杂卓的合成讨论

含1,2,4-三唑基的查尔酮（2a）同邻氨基硫酚合成新型的2,4-二苯基-3-（1,2,4-三唑-1-基）-2,3-二氢-1,5苯并硫氮杂卓（3a）．再将化合物（3a）和氯乙酰氯进行[2＋2]环加成反应得到意外化合物（5a）．所得化合物的结构经元素分析、IR、MS和’HNMR确认,同时用X-射线衍射法测定了化合物5a．     

查尔酮合酶基因在植物防御反应中的调控作用

论述了查尔酮合酶基因(chs)在植物防御反应中与病原物的相互关系,探讨了与查尔酮合酶因诱导表达相关的顺式作用元件和反式作用因子及其DNA-蛋白质间的相互作用,阐明其在植物抗病性防御反应中的重要作用。     

预防性使用HA对兔膝关节固定后关节软骨中iNOS表达的影响

为研究预防性使用透明质酸是否对兔膝关节固定后软骨中诱导性一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iN-OS)的表达有下调作用,将24只雄性新西兰大白兔随机分成两组,每组12只.①透明质酸(hyaluronic acid,HA)组给予左膝关节内注射0.3 mLHA,每周1次,共行5次;②生理盐水(nature saline,NS)组给予左膝关节注射同等剂量NS,每周1次,共行5次.各组均于初次注射后将左下肢给予石膏管型固定,膝部预留窗口以备下次注射.于末次注射1周后处死动物,采集左膝关节股骨髁关节软骨制成石蜡切片.用免疫荧光方法标记各组软骨中的iNOS,在激光共聚焦显微镜下观察其表达情况,并用图像分析系统对其进行计数分析.结果HA组软骨iNOS表达的数量(22.617±3.263 5)明显低于NS组软骨(39.667±5.948 5).差别具有极显著统计学意义(P<0.01).说明:预防性使用HA对兔膝关节固定后软骨中iNOS的表达有下调作用.     

山新杨蔗糖合酶基因PCR介导的重组现象研究

[目的]山新杨(Poputlus davidiana ×P.bolleana)是林木基因工程育种基础和应用研究的良好材料;以山新杨蔗糖合酶基因(PdbSUS)为例研究聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)过程介导的重组现象,在此基础上区分每一个PdbSUS基因的两种单倍型,为后续研...     

菘蓝色氨酸合成酶基因的克隆与生物信息学分析

对菘蓝色氨酸合成酶基因IiTSA进行克隆,并对其进行生物信息学分析.结果表明:菘蓝IiTSA基因全长2 111bp,包含8个外显子和7个内含子;cDNA全长1 035bp,编码311个氨基酸,编码的蛋白定位在叶绿体基质中,是一种无信号肽和跨膜结构域的疏水性蛋白;二级结构主要由α-螺旋、β-转角、延伸链和不规则卷曲组成;序列比对结果显示,菘蓝IiTSA核酸序列和氨基酸序列与其他多种植物的TSA核酸序列和氨基酸序列均具有较高的同源性.     

一种与核黄素合酶α亚基具有结构相似性的板蓝根多肽的分离纯化与表征

利用离子交换色谱SP-5PW和疏水色谱POROS HP2从板蓝根鲜根水相抽提物中分离纯化多肽组分,并对其进行生化表征.获得一种达到电泳纯的多肽RIP2,其相对分子质量约为6.87 ku,等电点约为7.73,N端氨基酸序列依次为QIGEFATAPF.经数据库搜索比对,发现该多肽与核黄素合酶α亚基具有一定的同源性.细胞毒性实验表明该多肽具有一定抗病毒作用.     

黄蜀葵查尔酮合成酶基因AmCHS克隆及序列分析

从黄蜀葵(Abelmoschus manihot) 花瓣中通过简并引物克隆得到查尔酮合成酶基因cDNA 核心序列,根据核心序列设计特异引物,再应用5′RACE 和3′RACE 技术分别扩增该序列的5′末端和3′末端序列,最后通过序列拼接获得黄蜀葵查尔酮合成酶基因（AmCHS）cDNA全序列.序列分析结果表明AmCHS cDNA编码区长1170 bp,编码389个氨基酸。其氨基酸序列与其它已知高等植物CHS基因具有很高的同源性,并且包含了CHS 具有的活性位点和催化位点等保守性位点.     

Salsolinol合成酶的克隆和表达

 Salsolinol 合成酶是一种催化多巴胺和乙醛生成Salsolinol 的酶,与帕金森病发病机制密切相关。研究发现Salsolinol 合成酶与泛素的氨基酸序列高度相似,只有4 个氨基酸位点有差异。本研究以泛素基因为模板,采用聚合酶链式反应技术对4 个位点进行定点突变,将突变基因片段克隆到载体pET30a-GST 上,构建pET30a-GST-Sal synthase 重组载体,转化BL21 后,IPTG 诱导重组菌表达融合蛋白,经亲和层析柱纯化。结果表明,实现目的位点的定点突变,获得Sal 合成酶基因,成功构建了GST-Sal synthase 原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高纯度的GST-Sal synthase 融合蛋白。     

农杆菌介导AtPCS1基因转化苜蓿

利用RT—PCR扩增拟南芥螯合肽合成酶（AtPCS1）基因全序列．进一步构建AtPCS1的植物表达载体pBI121-AtPCS1,转化农杆菌EHA105;然后用转化的农杆菌EHA105以叶盘法侵染苜蓿甘农一号叶片,在50mg／LKan的筛选压下,经过约80-100d的筛选,获得57棵再生苗．随机取其中9棵再生苗进行PCR检测,其中6棵为阳性．初步鉴定表明AtPCS1基因已整合到苜蓿基因组中．     

Direct observation of the clockwise light-driven rotation of F<Subscript>0</Subscript>F<Subscript>1</Subscript>-ATP synthase complex

The purified thermophilic bacterium PS3 F₁ β _10×His-tag is inserted into the F_oF₁-ATP synthases of chro-matophores isolated from photosynthetic bacteria Rhodo-spirillum rubrum. The studies of biochemical properties of the hybrid chromatophores show that they have both protons-driving capability and photophosphorylation. The fluorescent actin filaments, as a marker of its orientation by video-microscopic experiment, are connected via Maleimido-C₃-NTA to the reconstituted β_10×His-tag of F_oF₁-ATP synthases. The clockwise rotation of F_oF₁-ATP synthases driven by light is observed directly when viewed from the F_o side to F₁. This system should be valuable for further studying the coupling property of F_oF₁-ATP synthase.