链霉菌的氨基糖苷类抗生素3′—磷酸化酶APH(3′)抑制剂性质初探

分别采用丙酮沉淀、硫酸铵分步沉淀和柱层析技术从链霉菌85—39发酵液中分离、纯化出APH(3′)抑制剂85—39,并对其部分理化性质进行了测定。结果表明:抑制剂85—39为相对分子质量大于3000的水溶性多肽物质,对APH(3′)表现出强的抑制作用。该抑制剂经丙酮沉淀后的水抽提液对热、碱较稳定,对酸较不稳定,但经离子交换柱初步层析纯化后,其稳定性较差。     

玉米根细胞正面向外和内翻外质膜囊泡的分离

利用水双相分配分离法从玉米根细胞提取原生质膜囊泡。其质膜成分特异的K~+,Mg~(2+)—ATP酶活性比膜粗提液高1.67倍。其他细胞器标记酶活性在质膜组分中很低或没有。特异染色电镜形态学定量统计表明质膜组分中90％以上是质膜囊泡。去污剂刺激ATP酶活性实验证明,约92％囊泡是正面向外的。应用此法也证明NAD(P)H—氧化酶可能是跨膜存在的,其催化Fe~(3+)还原的位点可能在膜的内侧。应用高盐冻—融法并结合水双相分配分离法处理正面向外囊泡,可获得内翻外质膜囊泡,实验证明它不仅纯度高而且封闭。     

含固定化酶颗粒反应器的动力学特性研究

在连续流动带搅拌的反应器中,突然导入固定化的酶粒子,随着流入反应器的流速不同,存在着两类响应:最小型和衰减型响应.这些响应可由临界Thiele模数决定,当Thiele模数大于临界值时,流出反应器的底物浓度呈衰减性响应;否则,呈最小型响应。决定不同响应的临界速度可由简单的实验方法求出,从而可决定反应速度常数。本文除扼要叙述这种方法的理论推导外,通过对固定化α-葡萄糖淀粉酶的动力学实验,证明随流入反应器流体流速的变化,的确存在两种不同的响应,并可确定临界流速及反应速度常数和Michaelis常数。     

纤维素混合醚的合成及液晶性质研究

本文用一种经济简便的均相反应制备纤维素混合醚．乙基纤维素（ＥＣ）在乙醇溶液中和醚化剂反应制取乙基丁基纤维素（ＢＥＣ）、乙基庚基纤维素（ＨＥＣ）、乙基苄基纤维素（ＢＺＥＣ）ＥＣ和这三种混合醚均具有溶致和热致液晶性．ＨＥＣ和ＢＺＥＣ的临界浓度比ＥＣ高，三种混合醚的熔点均比ＥＣ低，而热致液晶形成温区均比ＥＣ宽．     

瓦松和长药景天NAD－苹果酸酶的比较研究

通过对专性ＣＡＭ植物瓦松（Ｏｒｏｓｔａｃｈｙｓｆｉｍｂｒｉａｔｕｓ）和兼性ＣＡＭ植物长药景天（Ｓｅ－ｄｕｍｓｐｅｃｔａｂｉｌｅ）的ＮＡＤ－苹果酸酶进行比较研究，在反应系统含５ｍｍｏｌ／ＬＭｎＣｌ＿２，５０μｍｏｌ／ＬＣｏＡ，５ｍｍｏｌ／Ｌ　ＤＴＴ，ｐＨ值为７ｈ，其苹果酸饱和曲线均为双曲线，且瓦松的ＮＡＤ－苹果酸酶对苹果酸极为敏感。光对该酶活性无明显影响。该酶对温度较敏感，其最适温度为５５℃。晴天的酶活明显比阴天高；即使在阴天，瓦松的酶活也较高。在同一温度条件下，瓦松的酶活高于长药景天。     

斜纹夜蛾NPV多角体基因的克隆和部分测序

本文对ＳＩＮＰＶ基因组作了酶解分析，测得其基因组大小为１４５ｋｂ，并用双酶法确定了ＳＩＮＰＶ基因组的ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔⅠ物理图谱。以含ＡｃＮＰＶ多角体基因的质粒ｐＡＣ－Ⅰ的ＳａｌＩ－Ｃ片段为探针，对ＳＩＮＰＶＤＮＡ酶切片段ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交结果，初步判断多角体基因定位于ＰｓｔＩ－Ｂ／Ｃ／Ｄ片段、ＢｇｌⅡ－Ｃ／Ｄ片段、ＢａｍＨＩ－Ｂ／Ｃ片段和ＥｃｏＲＩ－Ａ／Ｂ片段上，且ＳＩＮＰＶ与ＡｃＮＰＶ多角体蛋白基因有６４％的同源性，而以大肠仟菌质粒ｐＵＣ１９为载体对ＳＩＮＰＶ的多角体基因试克隆，得到带有ＢｇｌⅡ－ＰｓｔⅠ双酶切片段的２个克隆子。对这两个杂交阳性克隆子之一的核苷酸序列测定，表明插入片段与ＢｍＮＰＶ多角体基因上游序列亦有一定同源性。     

猴头菌降解木质纤维素的研究

从四株猴头菌在培养期间对木质素、半纤维素,纤维素的降解和有关酶活变化的规律进行研究。结果表明: 木质素降解量大于半纤维素降解量,半纤维素降解量大于纤维素降解量。不同菌株木质素分解活性不同,木质素分解活性强的菌株,半纤维素和纤维素的降解也较多,羧甲基纤维素酶活性和滤纸酶活性大体一致。胞外多酚氧化酶活性以培养最初期为高,后期活性很低,但子实体中的多酚氧化酶活性很高,以原基期为最高。这表明子实体中的多酚氧酶是在子实体中产生的,而不是在菌丝体中产生而后输送到子实体中去的。     

过氧化物酶活性部位的模拟及其催化显色反应的研究

本文合成了锰(Ⅲ)与meso-四(4-磺基苯)卟啉的螯合物(Mn-TPPS_4),研究了它作为过氧化物模拟酶对过氧化氢、4-氨基安替比林与苯酚显色反应的催化活性。拟订的光度法可准确地测定0～6μg/ml H_2O_2含量,1.5μg、8.0μg和40μgH_2O_2的平均回收率依次为95％、96％和100％。将显色反应与葡萄糖氧化酶催化反应偶联,测定了人血清中葡萄糖的含量,取得了满意的结果。     

固定化酶流动注射化学发光法测定葡萄糖

本文制备了高活性长寿命的固定葡萄氧化酶，并用于流动流射化学发光分析法测定人血清中葡萄糖的含量，结果令人满意，方法的线性范围为０．４－１００μｍ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，检出限可达０．０８μｇ．ｍＬ＾－１，在测量条件下血清中的共存物质均不产生干扰，取样量数微升，一分钟内就可得出结果。     

Plant thioredoxins: the multiplicity conundrum

Thioredoxins are small proteins distinguished by the presence of a conserved dicysteine active site. In oxidized thioredoxin, the two cysteines form a disulfide bond that is targeted by the enzyme thioredoxin reductase. Together with an electron donor, thioredoxin and thioredoxin reductase form the 'thioredoxin system' that is present in all organisms. Thioredoxins participate in dithiol/disulfide exchange reactions with a large range of cellular substrates. Higher plants possess a very complex thioredoxin profile consisting of at least two different thioredoxin systems that contain distinct, multigenic thioredoxin classes which have different intracellular localizations. In this review we summarise the current state of knowledge regarding the function of plant thioredoxins representing all systems and classes. Received 30 October 2001; received after revision 13 December 2001; accepted 17 December 2001