杂交瘤细胞的无血清低蛋白培养

实现了杂交瘤细胞的体外无血清低蛋白培养。考察了血清浓度、基础培养基和接种密度对细胞生长的影响。在含5%血清培养基、1%血清培养基和无血清低蛋白培养基中适应生长的细胞,μ分别为0.68、0.45、0.44d-1,qGlc分别为13.4×10-9、13.1×10-9、19.2×10-9mmol/(cell·分别为39.4×10-9、44.1×10-9、37.7×10-9mg/(cell·d),YMAb/Xv分别为52.6×10-9、d),qMAb57.8×10-9、54.4×10-9mg/cell,YLac/Glc分别为2.0、1.95、2.0mmol/mmol。无血清培养中葡萄糖代谢途径不变,参与细胞维持代谢的葡萄糖比例增大。血清浓度降低,延迟期变长,最大活细胞密度下降。基础培养基影响细胞的最大活细胞密度,不影响生长速率。无血清培养基中细胞的接种密度选择在0.2×106～0.3×106cells/mL。     

底物限制对杂交瘤细胞生长、代谢和单抗生成的影响

考察了葡萄糖或谷氨酰胺限制的批培养中杂交瘤细胞的生长、代谢和单抗生成。葡萄糖或谷氨酰胺限制时最大活细胞密度基本相同,为(1.0±0.1)×106cells/mL。葡萄糖限制时,乳酸生成减少,YLac/Glc降低,YCell/Glc增加,提示葡萄糖更多地参与三羧酸循环。谷氨酰胺限制时,氨和丙氨酸生成减少,YAmm/Gln增加,YAla/Gln减小,提示谷氨酰胺的能量利用率提高。谷氨酰胺缺失时异亮氨酸、亮氨酸、胱氨酸、缬氨酸、色氨酸、组氨酸等替代谷氨酰胺,维持细胞生长和单抗合成,产物是甘氨酸和天冬氨酸。单抗生成与细胞生长关联,并且细胞停止生长后单抗仍生成。细胞死亡阶段的qMAb约是生长阶段的一半。葡萄糖和谷氨酰胺共限制下细胞对单抗的生产能力比葡萄糖和谷氨酰胺单独限制时小。     

镁离子对鼠角质细胞生长和分化的影响

利用无血清培养基培养角质细胞，研究Mg^2 对鼠角质细胞生长和分化的影响。实验结果表明，培养基中Mg^2 浓度为5．0mmol／L时，细胞贴壁率、克隆形成率明显增加，细胞分化比例和老化比例均达到最低。当Mg^2 浓度达到10．0mmol／L时，细胞增殖水平没有显著提高，角质细胞分化比例和老化比例却有一定程度的提高。培养基中加入一定浓度的Mg^2 能够刺激角质细胞的增殖，抑制角质细胞的分化，并且延缓细胞的老化。     

芦荟茎组织培养及器官分化的研究

以库拉索芦荟茎段为材料进行离体培养，研究了外植体的取材，激素浓度及配比，抑制外植体褐化，糖，活化炭等因素对芽分化及根形成的影响。结果表明：芦荟幼茎及具芽切段适宜作为外植体材料；不定芽的分化与增殖以MS＋6－BA3.0-4.0mg/L＋NAA0.2mg/L，其6－BA与NAA浓度配比为15－20最佳，生根培养以1／2MS＋NAA0.5-1.0mg/L＋0．3％活性炭为适宜，在诱导芽和根的培养基中，食用白糖的适宜浓度为3％，抗坏血酸浓度为4％时对外植体材料的抗褐化作用较为明显。     

小麦花粉培养中蔗糖浓度外源激素对启动细胞分裂的作用

以4个小麦品种为材料，对培养基中的蔗糖浓度、外源激素等对离体花粉中小孢子细胞分裂启动的诱导效果进行了研究．结果发现3％的蔗糖浓度适用于小麦花粉培养，而较高蔗糖浓度（9％）不利于花粉培养；蔗糖浓度高于9％时则不能启动花粉粒的脱分化及雄核发育．实验表明，外源激素的存在是花粉脱分化并进入雄核发育的必要条件，2，4－D在诱导花粉粒转向孢子体发育的过程中起主要作用．     

枸杞组织培养的培养基配方优化试验

通过对枸杞组织培养的培养基部分成分的改换,发现用普通白砂糖代替蔗糖、自来水代替重蒸水、回收琼脂代替实验用试剂级琼脂,并去掉肌醇,对枸杞分化苗的增殖、生根无明显影响,可大幅度降低枸杞组培苗的成本.     

文心兰人工种子的研究

利用组织培养方法探讨了文心兰(Orchidee oncidinm)人工种子的制作.用MS培养基在3.0mg/L BA+0.15mg/L IBA的激素条件下大量产生文心兰圆球体,利用圆球体制作人工种子.包埋凝胶采用2%海藻酸钠为包埋剂,制作的人工种子在常温下存放一周,在1/2MSO培养基上作发芽率试验.     

人类输卵管上皮细胞培养

从１６例妇女的正常输卵管标本中获取壶腹部上皮细胞建立体外培养并传代，通过倒置显微镜和相差显微镜观察细胞形态及生长状况，所有标本的细胞均可在培养的６￣９ｄ形成融合的单层细胞，并可传代４￣６次，每次历时５￣７ｄ，最长的培养可维持３５ｄ，与提供标本的妇女的月经周期及年龄关系不大。     

湘鄂川黔边民族体育文化的理论建设与科学化发展探讨

湘鄂川黔边民族体育历史悠久、源远流长、内容丰富、博大精深，积淀着各民族与自然、与社会相抗衡的痕迹，是其各民族人民在各自民族不同的历史进程中创造与发展起来的文化财富，它以其独具特色的民族风格与价值特征屹立于中华民族体育之林。本文利用多学科的理论与方法，多角度全方位池对湘鄂川黔边民族传统体育项目进行审视，探讨了杨筑其理论框架应注意解决的几个问题，指出了它迈向科学化发展之路应采取的具体措施与步骤。