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101.
从红鲫(Red crucian earp)脑垂体中提取总RNA,根据鱼类促性腺激素(Gonadotropin Hormone,简称GTH)α亚基的保守性,设计并合成了一对20个碱基长的简并引物,用RT-PCR方法扩增并克隆了红鲫GTH-α亚基的两种不同的cDNA,分别命名为GTH-α1和GTH-α2。GTH-α1和GTH-α2分别由363和366个核苷酸组成,分别编码117和118个氨基酸.这两种类型的cDNA的核苷酸和氨基酸的同源性非常高,分别达到了95.0%和96.6%.但是,它们之间也有4个氨基酸的差别,而且GTH-α1有一个三联体核苷酸组成的氨基酸的缺失。聚类分析表明,GTH-α亚基在鲤科鱼类中具有高度保守性。 相似文献
102.
对小麦-中间偃麦草易位系HW642一周龄幼苗接种饲黄矮病毒蚜虫,接种48 h后取幼叶提取mRNA构建了一个cDNA文库,文库的滴度为1.5×105pru/mL.随机挑取103个重组克隆,用限制内切酶EcoR I、Xho I消化,统计分析结果表明插入片段在150~4000 bp之间,平均插入片段大小为2000 bp左右,重组率为95.15 %.文库可用于筛选抗病候选基因及EST研究等. 相似文献
103.
石斑鱼卵巢cDNA文库构建及脂肪酸结合蛋白克隆 总被引:9,自引:0,他引:9
应用SMARPTM技术构建了斜带石斑鱼Epinephelus coioides卵巢cDNA文库。所构建的cDNA文库滴度为4.5×106 pfu/mL,重组率为99%,扩增后文库的滴度为1.2×1010pfu/mL。把phagemid转化为质粒后,随机挑选60个阳性克隆进行酶切鉴定和测序。酶切结果表明:插入片段长度均在500~3 000 bp之间。测序结果经过生物信息学分析,发现其中一个克隆为脂肪酸结合蛋白(FABP)基因全长,并与人肝型(L)脂肪酸结合蛋白同源性最高,为70%。 相似文献
104.
人18周胎儿脑cDNA文库的构建及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
许多脑基因的特异性表达对人脑的发育,分化有着重要的作用,为了研究这些基因的结构和功能,构建了一个人18周胎儿脑CDNA文库,抽提总mRNA后,经过一系列的酶促反应合成cDNA,分有分离柱除去小片段后克隆到λgt10载体中,转染宿主菌C600jfl后文库包装效率为4.6×10^6pfu/μg,cDNA平均郫在于1.2kbp已知序列设计引物,从cDNA文库中扩增出神经生长因子(NGF)的生长编码基因 相似文献
105.
盐生杜氏藻Ugd基因的cDNA克隆及序列分析 总被引:2,自引:0,他引:2
作者对不同物种Ugd基因的同源序列进行相似性分析后设计一对兼并引物,利用RTPCR技术获得一条200bp左右的片段,测序分析显示其同芋头(Colocasia esculenta)的Ugd基因的编码区有71.7%的相似性.然后再以此片段为模板设计引物,通过RACE技术获得盐生杜氏藻Ugd基因的全长序列.经克隆测序作blastx分析发现其同芋头(Colocasia esculenta)、大豆(Soybean)、水稻(Oryza sativa)、拟南芥(Arabidopsis thaliana)的Ugd基因有78%到81%的同源性. 相似文献
106.
用大肠杆菌克隆载体pUC10构建白腐丝状担子真菌黄孢平革霉(Phanerochaetechrysosporium)ME446基因组文库,用分离自BKM-F1767菌株的木质素过氧化物酶cDNA片段CLG4和CLG5为探针,从构建的基因组文库中分离到一个含木质素过氧化物酶基因的重组子pGLG-M1。对该重组子插入片段所作的限制酶谱分析结果表明,它与来自BKM-F1767的GLG2片段的限制酶谱十分相似。 相似文献
107.
半夏凝集素基因的克隆 总被引:8,自引:1,他引:8
利用RACE-PCR技术从半夏花序中克隆出半夏凝集素的全长cDNA,通过比较半夏同其他天南星科植物的凝集素基因序列和推测的氨基酸序列,发现半夏凝集素基因编码一具有信号肽的前体蛋白,半夏凝集素同其他天南星科植物凝集素一样,为具有3个甘露糖专一结合盒的凝集素。 相似文献
108.
109.
Mori M Benotmane MA Tirone I Hooghe-Peters EL Desaintes C 《Cellular and molecular life sciences : CMLS》2005,62(13):1489-1501
110.
运用了抑制性差减杂交和cDNA芯片技术鉴定中华绒鳌蟹卵巢发育相关基因,并用5'和3'RACE的方法克隆了一个与Ⅱ期相比在卵巢发育的Ⅲ期高表达的新基因EJO3(GenBank登录号:AY185919).EJO3基因的开放阅读框(ORF)长1 368 bp,编码455个氨基酸.从氨基酸序列推算的EJO3的等电点和相对分子质量分别为5.79和50 000.生物信息学分析表明,EJO3可能是一个含有VWD结构域的分泌蛋白.EJO3在Ⅱ期和Ⅲ期卵巢的差异表达用Northern blot进行了进一步验证.组织表达谱分析表明EJO3在卵巢高表达,在肠、心脏、肌肉和肝胰腺中弱表达或不表达.本研究结果为进一步深入研究中华绒鳌蟹卵巢发育的分子机制奠定了重要的前期工作基础. 相似文献