编码真核启动因子4E的毛尖紫萼藓基因GH425电子克隆及验证分析

GH425基因(genebank EST#:GPE204)来自毛尖紫萼藓干旱胁迫cDNA文库。本实验在小立碗藓核酸数据库中,以GH425基因为基因探针进行电子克隆,最终得到全长序列GH425NO.1。经ORFfinder分析,以最长ORF设计引物,对毛尖紫萼藓进行RT-PCR验证,得到了与之对应的条带,证明了毛尖紫萼藓中含有电子克隆的片段,即电子克隆结果正确。经Blastx分析,确定该序列编码真核启动因子4E。     

棉花脱氢抗坏血酸还原酶基因的克隆、原核表达与纯化

为进一步探讨脱氢抗坏血酸还原酶的生物学功能,克隆棉花的脱氢抗坏血酸还原酶基因,对该基因进行了原核表达,并对重组蛋白进行纯化和分析。通过RT-PCR方法扩增脱氢抗坏血酸还原酶基因全长,利用BamH I和Xhol I酶切位点将其克隆至组氨酸(histidine,His)融合蛋白表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经异丙基硫代--βD-半乳糖苷(isopropy--βD-5-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物,并用亲和层析柱纯化重组表达的pET28a-DHAR蛋白。结果表明:重组体PET28a-DHAR经测序和酶切鉴定证实构建成功。导入大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析目的蛋白高效表达,相对分子量为26 kD左右,并获得了纯化的His-DHAR融合蛋白。     

拟南芥叶卷曲突变体lcd的遗传分析及基因定位

对拟南芥叶卷曲突变体lcd的表型观察表明:在幼苗期,从第一片真叶开始叶片向下卷曲,且叶张角变大;在莲座叶成熟后,与野生型相比,叶片尖端较钝,基部较宽,叶柄较短.通过遗传分析得知该突变为隐性单基因突变.采用图位克隆技术,将该突变基因初步定位于拟南芥的第3号染色体上,且与分子标记GAPAB紧密连锁.该研究为克隆该基因和阐明该基因的功能奠定了基础.     

一个用户行为相关的结构化对等网络维护代价削减协议

结构化P2P系统固有的高度动态性,造成其自身结构的维护代价非常大,甚至影响到系统的可用性.针对这一问题,利用资源共享系统中用户行为的规律性,采用克隆节点的方法,提出一个新的基于用户行为的克隆节点协议(clone node protocol,CNP)来削减这种维护代价.在此基础上实现了一个基于CNP协议的Clone Node Chord系统(即CNChord),并提出了CNChord下的被动式克隆算法、快速定位算法、差异性push同步算法和优化维护算法.理论分析和实验结果表明,CNP可以有效地降低结构化P2P系统自身结构的维护代价,同时将系统的查询复杂度提高到了(1/2)O(lg N).     

桁架结构优化设计的免疫克隆选择算法

为了解决带有应力约束和位移约束的桁架的尺寸优化问题,将免疫克隆选择算法应用于结构的尺寸优化设计.根据免疫学基本原理,在基本克隆选择算法的基础上引入精英策略,并给出合理的参数值.在桁架结构优化的数学模型中,采用惩罚函数法处理违反约束的情况.最后对几个经典的桁架进行了优化.数值结果表明,改进的免疫克隆算法收敛速度快、鲁棒性好,可以应用于桁架结构的优化设计.     

即刻早期基因Arc/Arg3.1的表达及其与学习记忆关系概述

Arc/Arg3.1基因为即刻早期基因(Immediate-early genes,IEGs)中的一种,相对于其他作为转录因子的IEGs,Arc/Arg3.1是可以直接作为效应因子的细胞结构元件.Arc/Arg3.1基因在神经元的突触可塑性方面起重要的作用,如果它的蛋白表达受阻则会损坏LTP的维持,从而损坏长期记忆的巩固.就Arc/Arg3.1基因的序列克隆与表达及其与学习记忆之间关系的研究进展进行了阐述.     

Cloning and sequence analysis of VP2 gene of infections bursal disease virus

用SPF鸡胚成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) J1C7毒株.用纯化的病毒颗粒提取RNA基因组.根据已报道的IBDV JD1株的VP2序列设计引物,利用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)进行扩增,将获得的1359 bp片段克隆于pMD 18-T载体上.经过限制性酶切及PCR鉴定后,得到阳性重组质粒.对VP2基因进行全序列测定表明,克隆的VP2基因长1359 bp,编码452个氨基酸.J1C7株VP2蛋白高变区内两个亲水区与其他标准Ⅰ型毒株完全相同,而且具有弱毒疫苗株的特征性氨基酸:222P、256V、279N、284T、294L、299N,七肽区的氨基酸序列为SWS ARGS,因此,从分子水平上推断本研究的J1C7株为标准Ⅰ型毒株,且属于弱毒疫苗株.与已报道的IBDV VP2基因的氨基酸序列进行比对,结果表明,本研究的J1C7株与来自欧洲和中国的弱毒疫苗株有密切的亲缘关系.     

面向分析评估的高性能仿真系统关键技术研究

针对面向作战分析领域的军事分析仿真评估应用需求,分析了基于高性能RTI建立作战分析仿真系统的系统框架及其关键技术。着重分析了基于多核集群的RTI仿真引擎结构,面向属性层次的仿真克隆技术,以及基于BOM的模型驱动的建模框架。研究基于RTI建立高性能仿真系统为军事分析仿真评估服务的方法,主要目的是在降低仿真成本的同时,满足作战分析仿真关于高速运算、互操作性、可交互性和可测试性的需求。     

罗氏沼虾原肌球蛋白基因的克隆表达及变应原性鉴定

通过NCBI查找到罗氏沼虾原肌球蛋白的mRNA,根据其CDS区域设计特异引物,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)克隆出目的基因片段,测序后将该片段克隆到原核表达载体 pET-28a 上,转化到 E. coli BL21(DE3)和E. coli Rosatta后,经异丙基-B-D-硫代乳糖苷(IPTG)诱导表达,用Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化.采用免疫印迹检测其与对虾过敏患者血清的 IgE 结合活性.对罗氏沼虾变应原进行了表达、鉴定及纯化,成功地获得了具有变应原活性的重组罗氏沼虾原肌球蛋白,为罗氏沼虾过敏性疾病的诊断、治疗奠定了基础.     

基于量子化学理论研究氯代阻燃剂得克隆的降解路径

以零价金属Al和石英砂（SiO₂）为添加剂, 采用机械化学法及基于密度泛函理论的量子化学方法, 计算阻燃剂得克隆结构中所有的C-Cl键的键级和解离能, 推测其可能脱Cl的位置, 并将其降解, 得到了得克隆降解的主要路径.