酵母培养液中胰蛋白酶初探

利用鸡卵黏蛋白对于胰蛋白酶有天然抑制性的特点,从鸡蛋清中分离纯化了鸡卵黏蛋白,将其偶联至Sepharose 4B制作成亲和层析介质,用于从不同种类酵母,处于不同时间段的培养液中,分离纯化得到了具有胰蛋白酶活性的物质。由此初步证明了酵母培养液中确有可能存在胰蛋白酶。因此,利用酵母工程菌生产蛋白质的时候,若加入一定量的胰蛋白酶抑制剂,有可能提高目的蛋白的产率。     

青蒿素合成生物学及代谢工程研究进展

青蒿素生物合成途径仅见于青蒿, 但其"上游"途径为真核生物所共有, 可望通过"下游"途径重建, 在真核微生物(如酵母)中全合成青蒿素. 过去10 年来, 青蒿素合成基因被国内外研究团队陆续克隆并导入酿酒酵母细胞, 已成功合成青蒿酸及双氢青蒿酸等青蒿素前体. 由于酵母缺乏适宜的细胞环境, 尚不能将青蒿素前体转变成青蒿素. 因此, 青蒿依然是青蒿素的唯一来源, 凸显出继续开展青蒿种质遗传改良的必要性. 我国科学家采用"开源"或"节流"等策略,已相继培育出多种转基因青蒿植株或品系, 为实现青蒿素的高产、稳产奠定了坚实的基础. 同时, 青蒿素生物合成的限速步骤尤其是终端反应机制已基本得到阐明, 有助于开展青蒿素形成与积累的环境模拟及仿生, 从而为彻底缓解青蒿素的供求矛盾创造先机. 本文最后讨论了产青蒿素前体微生物专利的作用及中国避免这些专利壁垒的方法.     

有机化学品对酵母菌生物毒性的检测技术

采用酵母菌作为指示生物,研究了有机化学品生物毒性检测方法．在酵母菌毒性检测试验中,选择了5种有机溶剂及其混合溶剂进行了酵母菌抑制试验和对有机化学品溶解性试验．结果显示,V二甲亚砜“V甘油=6．6：3．4混合溶剂对酵母菌抑制最小,同时对大多数有机化学品具有较好溶解性能．应用二甲亚砜-甘油混合溶剂试验了几种有机化学品对酵母菌的生物毒性,并根据最小产生清晰抑菌圈浓度Cmiz评价了这几种有机化学品的生物毒性、该方法为建立定量构效关系(QSAR)模型奠定了生物学检测基础。     

嗜热厌氧产乙醇杆菌乙醇代谢途径的初步研究

以乙醇产量和细胞密度的提高为目标,从碳源和氮源入手,对嗜热厌氧产乙醇杆菌THermoanaerobacter ethanolicus JW200的培养基作了初步优化以提高乙醇代谢途径中的关键酶的得率,便于提纯.葡萄糖浓度的提高对乙醇的产生有明显的诱导作用,但当葡萄糖浓度高于2%,乙醇产量反而下降.酵母粉对乙醇产量没有促进作用,单纯提高酵母粉浓度对细胞密度无显著影响,而同时提高葡萄糖和酵母粉浓度至2.0%,OD600最高可达2.0.2%葡萄糖,0.5%酵母粉对单位细胞乙醇产量的诱导效果最佳.T.ethanolicusJW200粗酶液中未检测到丙酮酸脱羧酶的活性,经亲和柱Cibacron Blue-3GA部分纯化,在NAD洗脱蛋白中检测到辅酶A依赖型乙醛脱氢酶的活性,表明辅酶A依赖型乙醛脱氢酶是该菌乙醇代谢途径中的关键酶,它和乙醇脱氢酶共同作用,将乙酰辅酶A转化成乙醇.     

Hydroxylation of demethoxy-Q6 constitutes a control point in yeast coenzyme Q6 biosynthesis

Coenzyme Q is a lipid molecule required for respiration and antioxidant protection. Q biosynthesis in Saccharomyces cerevisiae requires nine proteins (Coq1p–Coq9p). We demonstrate in this study that Q levels are modulated during growth by its conversion from demethoxy-Q (DMQ), a late intermediate. Similar conversion was produced when cells were subjected to oxidative stress conditions. Changes in Q₆/DMQ₆ ratio were accompanied by changes in COQ7 gene mRNA levels encoding the protein responsible for the DMQ hydroxylation, the penultimate step in Q biosynthesis pathway. Yeast coq null mutant failed to accumulate any Q late biosynthetic intermediate. However, in coq7 mutants the addition of exogenous Q produces the DMQ synthesis. Similar effect was produced by over-expressing ABC1/COQ8. These results support the existence of a biosynthetic complex that allows the DMQ₆ accumulation and suggest that Coq7p is a control point for the Q biosynthesis regulation in yeast. Electronic supplementary material  The online version of this article (doi:) contains supplementary material, which is available to authorized users. Received 04 September 2008; received after revision 22 October 2008; accepted 23 October 2008     

一株耐盐性酵母的原生质体化及再生条件的优化研究

对一株耐盐性酵母Zygosaccharomyces rouxii的原生质体化及再生条件进行了实验研究.结果表明:用0.5 mg/mL(10 unit/mL)细胞壁溶解酶zymolyase20T在1.0~1.5 mol/L山梨糖醇渗透压调节剂的浓度范围内,原生质体化率可达99%以上,再生率在2%~11%之间,而且用磷酸钾缓冲液比用Tris-HCl缓冲液再生率高.在山梨糖醇浓度1.5 mol/L,zymolyase20T浓度0.5 mg/mL,磷酸钾缓冲液0.1 mol/L(pH6.0)时,30℃、60 min,再生率达30%以上.     

Killer酵母筛选及其生理特性的研究

从自然界中筛选出一株Ｋｉｌｌｅｒ酵母６Ｂ２，对Ｋ酵母具有杀伤能力，同时对６Ｂ２野生酵母的生理特性进行了初步研究，发现该菌不仅具有样伤其他它酵母的能力，而且经发酵后可产生一类的香味物质。     

Electrochemical evaluation of the inhibitory effects of acetic acid on Saccharomyces cerevisiae

0 Introduction Fuel ethanol can be produced fromlignocellulose by chemical hydrolysis of lignocellulosic materialsfollowed by fermentation.One of the major problems with hydrolysates produced by acid hydrolysis is the poor fermentability caused by the presence of inhibitors in the hy- drolysates[1].Acetic acidis one of the most important in- hibitors .It is abundant due tothe deacetylation of xylose andthe breakdown of lignin[2]. The inhibitory effects of acetic acid on different yeast strain…     

RIG-G基因在酵母双杂交后的蛋白互作验证

RIG－G基因是利用全反式维甲酸（ATRA）诱导，采用差异显示PCR方法从APL细胞系NB4中克隆到的一个新基因。采用酶母双杂交的方法筛到了与RIG－G发生相互作用的JAB1。由于在酵母这种低等真核细胞中缺少诸如高等真核细胞中各种保证蛋白正常生物学功能发挥所必需的翻译后修饰，这种方法筛到的阳性克隆并不一定代表了真实的作用，所以在COS7细胞中采用了CO－IP（co-immunoprecipitation）实验，间接法、直接法均证实了这种相互作用。     

无机盐在酵母菌净化玉米淀粉工业废水中的作用

玉米淀粉工业废水是高浓度有机废水，在利用酵母菌净化此废水的研究试验中，向废水中添加无机盐，可明显提高其净化效率。