应用酵母双杂交技术筛选与p53相互作用的蛋白质

应用酵母双杂交技术筛选与p53发生相互作用的蛋白质,有助于进一步阐明其在肿瘤发生、发展中发挥重要作用的调控机制。采用酵母双杂交技术,以p53C末端（62-393aa）作为诱饵筛选人乳腺cDNA文库,寻找能与之相互作用的蛋白质．并运用报告基因等实验提供的信息,经过重复验证排除假阳性以确定最后的阳性克隆。以p53C末端（62～393aa）作为诱饵最终筛选出了一个阳性克隆,经测序及生物信息学分析,这一个阳性克隆为：PIAS3（Protein inhibitor of activated stat3）。说明了PIAS3蛋白能与p53（62-393aa）发生特异性的相互作用。     

人CtBP2与CCNH相互作用的初步研究

CtBP2(E1AC-terminal binding protein 2)作为辅阻遏物与多种转录因子联系而参与到很多生物过程中,如细胞分化、凋亡、发育和肿瘤发生等,然而其中许多作用机制尚不明了.为了对CtBP2进行深入研究,利用高通量酵母双杂交技术,以人CtBP2为诱饵,与含有1000个人肝基因克隆的酵母双杂交文库进行接合筛选获得了一个与它相互作用的猎物蛋白CCNH(Cyclin H).通过GST-pull down、免疫共沉淀和亚细胞共定位等实验进一步证明了这两个蛋白在体外和体内的相互作用.     

酵母细胞麦角固醇的提取条件

通过对酵母细胞麦角固醇皂化提取条件的研究,并在不同的菌株上进行验证,以及与其他方法的对比,提出了对麦角固醇进行皂化提取的方法:即1 mL发酵液的离心沉淀物加2 mL 500 g/L的KOH和1.5 mL无水乙醇,85～90 ℃皂化3 h,麦角固醇提取效率较高.     

高产油脂斯达氏酵母菌株的选育及摇瓶发酵条件的初步研究

以斯达氏油脂酵母Lipomyces starkeyi AS 2．1560为出发菌株．经紫外线诱变选育出了一株高产油脂的优良酵母菌株L．starkeyi M36．通过摇瓶培养,对与菌体产油脂相关的因素进行了单因子试验,确定了摇瓶发酵培养的最佳产油脂条件,碳源为葡萄糖110g／L;氯源为硫酸铵0．6g／L;培养温度30℃;接种量15％;初始pH5．0～7．0;培养144h。最后可得生物量24．2g／L;油脂量14．6g／L．菌油脂肪酸组成分析结果如下：豆蔻酸0．5％,软脂酸35．2％,棕榈油酸4．3％,硬脂酸4．4％,油酸53．0％,亚油酸2．6％．与植物油脂相似．     

发酵型梨汁酒酿造工艺研究

梨是人们日常生活中的一种主要水果,将梨汁进行酿造,得到的梨汁酒既有酒的醇香又有梨的保健功能,对发酵型梨汁酒酿造工艺进行了研究,起始糖度20％左右,最佳发酵温度20℃,发酵液pH为5,发酵时间7d,该条件下发酵的梨汁酒颜色金黄,透光率高,口感较好．同时也对梨汁酒工业化做了展望．     

用陶瓷载体固定化酵母细胞进行啤酒主发酵的研究

采用陶瓷载体固定化酵母细胞进行啤酒主发酵,将陶瓷载体与海藻酸钙载体做了对比试验.对啤酒主发酵的表观动力学进行了探讨.分析了底物流速、发酵温度对发酵速率的影响.实验结果表明,表观动力学常数不仅与流速和温度有关,还与载体结构密切相关.认为陶瓷载体优于海藻酸钙载体.     

国产干酵母活化方法的研究

本试验利用土豆汁、活化液、土豆汁加活化液对丹宝利和梅山两种国产干酵母分别进行了活化，并测定其发酵力。结果表明，对于丹宝利活化最佳工艺为利用活化液活化４５ｍｉｎ，对于梅山活化最佳工艺为利用５％土豆汁和活化液共同活化１５～３０ｍｉｎ，两种干酵母发酵力分别提高９０ｍｌ和１２１ｍｌ，这为国产干酵母替代进口干酵母提供了依据。     

固定化增殖酵母糖蜜酒精连续发酵的研究

本研究采用海藻酸钙胶为载体,将糖蜜酒精酵母P396驯化株固定于2.5公升维型筛板生比反应器中,以甘蔗糖蜜为基质进行快速酒精连续发酵试验。证明该反应器能较好地解决CO_2滞留及CO_2与酒精对酵母发酵的抑制问题;探讨了该反应器连续发酵的动力学模型及发酵条件。发酵连续操作85天,平均产酒8.1×10~(-2)kg/L,平均生产能力1.5×10~(-2)kg/L·hr比游离细胞分批发酵效率提高17.4倍。     

固定化增殖酵母细胞技术研究

本文介绍了在一定载体中,固定化完整酵母细胞的制备和增殖方法.关键是研究化学稳定性好、机械强度大、发酵能力强的固定化酵母.实验结果表明:固定化酵母细胞可以反复使用、大大缩短发酵周期,用于液态白酒,糖蜜酒精及蜂蜜酒的生产是可行的.     

利用固定化酵母细胞生产ATP

利用明胶戊二醛制备的固定化啤酒酵母细胞,由腺苷酸(AMP)生产腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)。在含有15 mmol/L AMP,75 mmol/L葡萄糖,5mmol/L硫酸镁(MgSO_4·7 H_2O)的0.2 mol/L磷酸缓冲液(pH 7.0)中,在34℃振荡反应1h,ATP转化率可达100%,分批连续反应10次,ATP转化率保持在90%以上。