全文获取类型
收费全文 | 3300篇 |
免费 | 123篇 |
国内免费 | 207篇 |
专业分类
系统科学 | 13篇 |
丛书文集 | 78篇 |
教育与普及 | 33篇 |
理论与方法论 | 2篇 |
现状及发展 | 434篇 |
综合类 | 3068篇 |
自然研究 | 2篇 |
出版年
2024年 | 2篇 |
2023年 | 9篇 |
2022年 | 25篇 |
2021年 | 26篇 |
2020年 | 33篇 |
2019年 | 32篇 |
2018年 | 34篇 |
2017年 | 43篇 |
2016年 | 44篇 |
2015年 | 61篇 |
2014年 | 122篇 |
2013年 | 85篇 |
2012年 | 146篇 |
2011年 | 139篇 |
2010年 | 103篇 |
2009年 | 188篇 |
2008年 | 174篇 |
2007年 | 196篇 |
2006年 | 246篇 |
2005年 | 234篇 |
2004年 | 218篇 |
2003年 | 187篇 |
2002年 | 194篇 |
2001年 | 142篇 |
2000年 | 137篇 |
1999年 | 128篇 |
1998年 | 81篇 |
1997年 | 83篇 |
1996年 | 79篇 |
1995年 | 69篇 |
1994年 | 69篇 |
1993年 | 51篇 |
1992年 | 54篇 |
1991年 | 51篇 |
1990年 | 37篇 |
1989年 | 32篇 |
1988年 | 19篇 |
1987年 | 15篇 |
1986年 | 15篇 |
1985年 | 18篇 |
1984年 | 9篇 |
排序方式: 共有3630条查询结果,搜索用时 15 毫秒
991.
时间分辨荧光免疫分析法测定牛血清白蛋白 总被引:1,自引:0,他引:1
用Eu-TTA络合物标记了牛清白蛋白和抗牛血清白蛋白的兔血清。分另用竞争法和夹心法测定了牛血清白蛋白。研究结果表明TTA-SO2Cl是一种标记效率较高的的双功能络合剂,可获得较高的结合比(TTA:BSA=35:1;TTA:anti-BSA=100:1)。用时间分辨荧光免疫分析法测定了牛血清白蛋白。竞争法和夹心法的检测下限分别为150ng/mL和50ng/mL。 相似文献
992.
993.
人表皮生长因子融合蛋白在大肠杆菌表达的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在大肠杆菌中高效表达人表皮生长因子(hEGF)。根据大肠杆菌对密码的偏爱性,构建高效表达EGF融合蛋白的菌株,经离子交换层析和凝胶过滤层析两个步骤使产物得到纯化。融合蛋白表达产量为27%,EGF融合蛋白纯化产物纯度为95%以上,促3T3细胞增殖的活性测定为ED50为4.2ng/mL。在pET 3c:BL21(DE3)大肠杆菌表达系统中,以融合蛋白方式表达人表皮生长因子,表达效率高,纯化路线简单,产量较高,适合产业化生产。 相似文献
994.
百合属几种植物亲缘关系的可溶性蛋白质和过氧化物酶分析 总被引:1,自引:0,他引:1
采用聚丙烯酰氨凝胶电泳法,分析了百合属8种植物的可溶性蛋白质和过氧化物酶.结果显示:可溶性蛋白质谱共有48条带,其中26条带为多态性带;过氧化物酶谱共有20条带,19条带具有多态性.根据可溶性蛋白质和过氧化物酶的谱带进行了聚类分析,结果表明,生化水平与传统的形态学分类结果基本一致. 相似文献
995.
对抗虫相关蛋白BpH i008A进行了生物信息学分析,发现BpH i008A含有一个PKC磷酸化位点、一个CK2磷酸化位点、三个N-myristoylation site位点;另外,BpH i008A蛋白含有一跨膜螺旋,和位于细胞内的N-末端及伸向细胞外的C-末端.Northern分析证明褐飞虱的取食是维持BpHi008A基因的表达的必要条件.以pET28 a为载体构建了非融合表达的重组质粒,并且实现了BpHi008A基因在大肠杆菌菌株BL21(DE3)中的高效表达. 相似文献
996.
报道了红色荧光蛋白(DsRFP)在毕赤酵母中的高水平表达.利用PCR技术从YEpFLAG-1-DsRFP扩增出DsRFP编码序列.克隆到毕赤酵母胞内表达载体pPIC3.5K构建重组表达载体pPIC3.5K-DsRFP.电击转化进毕赤酵母.G418-RDB平板双重筛选后获得重组转化子.经MM/MD平板培养与PCR鉴定.重组子全部为HIS^ -MUT^ 表型.重组菌株诱导表达48h后获得了高效表达.摇瓶中表达水平达到细胞内总蛋白的12%.表达量达到1.8g/L.经硫酸铵分级沉淀,DE-AE-5PW阴离子交换柱层析与S-HyperD阳离子交换柱层析后获得电泳纯蛋白.说明我们建立的毕赤酵母表达应用平台具有高效表达外源蛋白的能力。 相似文献
997.
大豆蛋白质中过敏物质的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
阐述了日粮抗原过敏是引起仔猪腹泻的原发性因素,分析了引起过敏反应抗原组分、过敏反应发生的机理.指出消除过敏反应的方法,为养猪生产提供了有效途径。 相似文献
998.
使用碳纳米管AFM针尖的蛋白质高分辨率成像 总被引:1,自引:0,他引:1
原子力显微镜(AFM)是分析生物分子结构的有效手段,而目前使用的探针针尖的性质限制了高分辨率图像的获得。该文将碳纳米管安装到原子力显微镜的传统针尖上,制作出碳纳米管针尖以解决这个问题。运用碳纳米管针尖在大气常温条件下获得了由3个单元组成的小鼠抗体IgG蛋白质的Y形结构,并且分子的尺寸与X射线晶体衍射的结果非常接近,这种效果用传统针尖是无法获得的。获得的蛋白质分子超微结构的高分辨率图像为研究蛋白质分子功能提供了有价值的信息。 相似文献
999.
目的:探讨吡啶甲酸铬以及有氧运动对于肥胖大鼠体重及血脂指标水平的影响;方法:大鼠给予8周的高脂饮食,随机分为4组,为安静普通饲料组(AP)、安静高脂组(AG)、高脂运动组(GS)和高脂+铬+运动组(GGS).观察大鼠体重、附睾脂肪以及肾周脂肪、LDL、HDL、TG、TC水平的变化.结果:高脂+铬+运动组(GGS)大鼠的体重、附睾脂肪以及肾周脂肪、LDL、HDL、TG、CHOL水平的变化与对照组有显著差别.结论:吡啶甲酸铬与有氧运动可以改善大鼠肥胖以及血脂水平. 相似文献
1000.
采用荧光光谱法和吸收光谱法研究了1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚-磺酸(PAN-S)与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应.研究表明,PAN-S对BSA的荧光猝灭机理为静态猝灭.测定了反应的结合常数(K=5.32×105~8.53×105L·mol-1)、荧光猝灭常数(Ksv=7.08×105L·mol-1)及结合位点数(n=2.88).进一步通过同步荧光法研究了PAN-S对BSA构象的影响,认为PAN-S主要结合在BSA的色氨酸残基附近.研究发现,PAN-S与BSA之间存在着类似于其同阳离子表面活性剂的静电作用. 相似文献