Spectrofluorimetric determination of magnesium (II) with 7-(8-Hydroxy-3, 6-disulfonaphthylazo)-8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid

A new fluorescent reagent, 7-(8-hydroxy-3, 6-disulfonaphthylazo)-8-hydroxyquinoline-5-sulfonic acid (HDNHQ) for the determination of magnesium has been developed. It reacted with magnesium to form a 1∶1 fluorescent complex withλ _ex/λ _em immediately at room temperature in ammonia-ammonium chloride buffer (pH 10.7). A linear relationship was obtained in the magnesium concentration range of 0–160 ng·mL⁻¹ with the detection limit of 0.04 ng·mL⁻¹. The proposed method was simple, rapid and sensitive. It has been successfully applied to the determination of trace magnesium in blood serum with recoveries of 103.75% and 98.16%, respectively. Foundation item: Supported by the Zi-Qiang Foundation of Wuhan University Biography: Zhang Xian (1975-), female, Ph. D candidant, research direction: organic reagent synthesis and analysis.     

西南地区地方品种猪血液蛋白遗传多样性的研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶技术,研究了6个品种360头猪8个基因座位的蛋白质多态性,结果表明,6个品种中Alb和Pi-II均呈单态,在Xiangzhu和Rongchang中,Pi-I呈单态;对于Po-I,除Kele外,其余品种均呈单态;CA,Cp,Po-II,AMy-I在6个品种中均表现出多态性, 本遗传变异指标计算结果显示,6个品种蛋白座位的平均杂合度为：0．342I（Dianxiao),0\3229(Dahe),0.3060(Xiangzhu().0.3479(Kele),0.3377(Neijinang),0.2656(Rongchang)(以8个座位计算）,根据基因频率奈式遗传距离,并用UPGMA法进行聚类分析,得出Neijiang和Rongchang遗传距离最近,其它品种聚类结果稍有差别。     

类人弹性蛋白在大肠杆菌中的高效表达

类人弹性蛋白是由VAPGVG六肽重复序列构成的多肽。研究通过全基因合成获得上游引入NcoI和下游引入XhoI限制性内切酶位点的[(VAPGVG)3S]4基因编码序列,通过定向递归连接技术在pMD19-T simple克隆载体中构建[(VAPGVG)3S]32基因编码序列。利用NcoI和XhoI双酶切从重组克隆载体中回收[(VAPGVG)3S]32(ELPs)基因编码序列,在T4 DNA连接酶作用下与NcoI和XhoI双酶切处理的线性化载体DNA分子pET28a(+)重组,重组混合物转化大肠杆菌Top10感受态细胞。从添加有50μg·mL-1卡那霉素的LB平板上随机挑取37℃培养过夜的转化克隆,碱法小量抽提质粒DNA,经酶切及序列测定筛选出序列正确的重组质粒DNA转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。从添加有50μg·mL-1卡那霉素的LB平板上随机挑取37℃培养过夜的转化克隆至新鲜配制的TB液体培养基中,于37℃、200 r·min-1培养至OD600约为0.60 h,添加终浓度为100μg·mL-1的IPTG诱导类人弹性蛋白表达3 h,SDS-PAGE凝胶电泳及Western blotting分析表明,该研究成功构建了类人弹性蛋白原核表达载体,在IPTG诱导作用下以可溶性状态高效表达。灰度扫描分析显示,重组类人弹性蛋白经IPTG诱导表达3 h后,可达宿主细胞可溶性蛋白的28.3%。该工作为以大肠杆菌为表达宿主,大量制备类人弹性蛋白用于生物医学材料奠定了良好的基础。     

核黄素合剂对小鼠运动能力的影响观察

以昆明种小白鼠为实验对象观察了核黄素合剂对运动训练小鼠运动能力的影响。将小鼠（３０只）随机分成２组对照组（给予运动训练,普通饲料和正常饮水）,实验组（给予运动训练,普通饲料,核黄素合剂）,实验结果显示,实验组小鼠耗竭游泳时间明显长于对照组（Ｐ〈０．０１）,血乳酸指数明显低于对照组（Ｐ〈０．０５）,提示核黄素合剂具有改善训练小鼠整体状况,提高小鼠运动能力的作用。     

法国鹌鹑脑垂体神经叶的超微结构研究

用电子显微镜技术,对法国鹌鹑脑垂体神经叶的超微结构进行了研究,观察结果表明,脑垂体神经叶由无髓神经纤维及末梢、垂体细胞,室管膜细胞、毛细血管、结缔组织构成,无髓神经纤维末梢内含许多神经分泌颗粒,大多终止于有孔型毛细血管的基膜外,这为分泌物质放入血提供了有利条件,神经叶中漏斗隐有面有一层室管膜细胞,室管膜细胞基部与神经末梢紧密相接,此外胞质中可见微吞饮小泡,因此认为,室管膜细胞可能参与社会分泌物质的释放。     

细胞培养基底膜伸张实验装置的研制

为研究离体培养细胞在应变作用时的生长行为,研制了可模拟生物软组织细胞在生理或病理应变情况的离体加载装置。本装置的方法是将细胞培养于弹性硅橡胶薄膜（厚度０.2mm）的上表面,弹性膜固定于压力腔的上方,在电路控制上蠕动泵使压力腔的压力产生周期性变化,弹性膜在此压力作用下发生周期性的。弹性膜的周期将牵动粘附于其上表面的细胞产生周期性伸张,从而实现对细胞施加周期拉伸变形的作用。装置中弹性膜周期伸长的应变峰值和周期分别在０.007-0.0３和０.０６－０.１１８Ｈz范围内可调。本装置对研究细胞的应力－生长关系十分有用。     

羟基聚磷酸钙钠骨细胞界面形态

研究一种新的骨替代材料－羟基聚磷酸钙钠骨细胞界面形态,评价其生物相容性。方法：采用体外细胞培养技术,选用ＳＤ乳鼠颅顶骨细胞,从光镜和扫描电镜两个层面观察细胞和材料之间的相互关系。结果随着培养时间的延长,细胞在材料表面的密度增加,未见细胞死亡。     

克服昆明小鼠早胚2-细胞阻滞的研究

目的：评价两种培养液对昆明小鼠胚胎２－细胞阻滞的克服效果。方法：用添加１５％ＦＣＳ或ＢＳＡ的Ｍ１６和ＣＺＢ培养液培养昆明小鼠２－细胞胚胎和体外受精卵,以观察这两种培养液对昆明小鼠早胚发育的影响及在克服昆明小鼠２－细胞阻滞中的作用,并通过ＣＺＢ培养液中葡萄糖成份的增减,了解其作用及效应的时间。结果：添加ＦＣＳ的Ｍ１６和ＣＺＢ培养注均能较好地支持２－细胞胚胎发育到囊胚（７８．９％,７２．７％）,当进行     

碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞的生物学效应

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对骨髓基质细胞(BMSC)粘附、增殖和分化等生物学效应的影响.方法利用体视学计数、MTT法及ALP试剂盒分别测定不同浓度bFGF诱导一定时间后BMSG的粘附特性、增殖和分化情况的变化.结果10n/mLbFGF明显促进BMSG的粘附,但是200ng/mLbFGF反而不利于细胞粘附;在细胞增殖和分化测定中,100ng/mLbFGF明显促进细胞增殖,但细胞碱性磷酸酶含量也最低.结论碱性成纤维细胞生长因子对骨髓基质细胞的生物效应是复杂和多方面的,可以作用于骨髓基质细胞的粘附、增殖和分化等多个环节,这种影响与碱性成纤维细胞生长因子的剂量有关.     

电刺激促进成骨细胞粘附特性的实验研究

针对骨组织工程中成骨细胞与基质材料间促粘附这一重要问题,研究微量直流电刺激对成骨细胞粘持性的影响。方法取兔骨髓基质干细胞来源的成骨细胞体培养,于接种即时行微量直流电刺激,刺激电流密度为１００μＡ／ｃｍ＾２,观察电刺激后１、２、６、１２ｈ及２４ｈ各时间点接种成骨细胞粘附情况、体视学计量粘附细胞数量。结果１００μＡ／ｃｍ＾２微量直流电刺激下,阳极区细胞粘附数量与阴极区相比,各时间点均寺加;无直流电刺激