Human and rodent type 1 11β-hydroxysteroid dehydrogenases are 7β-hydroxycholesterol dehydrogenases involved in oxysterol metabolism

Interconversion between cortisone and the glucocorticoid receptor ligand cortisol is carried out by 11-hydroxysteroid dehydrogenase (11-HSD)isozymes and constitutes a medically important example of pre-receptor control of steroid hormones. The enzyme 11-HSD type 1 (11-HSD1) catalyzes the conversion of cortisone to its active receptor-binding derivative cortisol, whereas 11-HSD type 2 performs the reverse reaction. Specific inhibitors against the type 1 enzyme lower intracellular levels of glucocorticoid hormone, with an important clinical application in insulin resistance and other metabolic disorders. We report here on the in vitro oxysterol-metabolizing properties of human and rodent 11-HSD1. The enzyme, either as full-length, membrane-attached, or as a transmembrane domain-deleted, soluble form, mediates exclusively conversion between 7-ketocholesterol and 7-hydroxycholesterol with similar k_cat values as observed with glucocorticoid hormones. Thus, human, rat, and mouse 11-HSD1 have dual enzyme activities like the recently described 7-hydroxysteroid dehydrogenase/11-hydroxysteroid dehydrogenase from hamster liver, but differ fundamentally from the latter in that 7-OH rather than 7-OH dehydrogenase constitutes the second activity. These results demonstrate an enzymatic origin of species differences in 7-oxysterol metabolism, establish the origin of endogenous 7-OH cholesterol in humans, and point to a possible involvement of 11-HSD1 in atherosclerosis.Received 30 December 2003; received after revision 16 February 2004; accepted 16 February 2004     

抗生素生物合成基因簇克隆方法

抗生素生物合成基因簇的克隆是药物创新和产量提高的必要前提,PCR技术、基因文库的构建及标记探针的筛选、异源宿主的表达和染色体步查等方法,常用于抗生素生物合成基因簇的克隆。载体系统及生物信息学的发展对基因克隆产生了重大影响。     

猪β干扰素基因17位丝氨酸突变体重组酵母表达载体的构建

根据猪β干扰素基因序列设计一对引物,并按酵母密码子的偏好性,在引物中对稀有密码子进行同义突变,即第3位的TAT基因突变为TAC,第7位的CGA基因突变为AGA,第164位的CGG基因突变为CGT。同时,利用聚合酶链式反应基因定点突变技术,把17位的半胱氨酸密码子TGT突变为丝氨酸密码子TCT,构建poIFNβSer17...     

用随机漫步拟合1901年至1998年44个贝塔世界城市的气温变化

为了进一步证实随机漫步模型能够拟合气温的变化,获得坚实的科学结论,继续利用随机漫步模型拟合44个贝塔级世界城市1901年至1998年的气温漫步和记录气温,得到了很好的拟合效果。拟合结果与我们以前的研究结果相一致。随机漫步模型可以用于描述城市的气温变化。     

河流中抗生素污染及其管理

抗生素污染已经引起越来越多研究者的重视,但国内外的报道主要集中在抗生素残留的调查及残留物的转移和消除过程,有关抗生素对环境、生物及生态系统影响的研究很少。在实际情况中,由于抗生素被大量使用或使用不恰当,造成环境抗生素污染事故屡屡发生。本文综述了近年来国内外有关河流环境中抗生素污染研究的最新进展,提出了河流环境中抗生素污染的解决办法,对抗生素污染的研究方向进行了展望。     

5200张门诊处方的抗菌药物使用情况分析

目的：探讨门诊抗菌药物的使用情况。方法：对5200张内科门诊的成人处方的抗菌药物使用情况进行回顾性分析。结果：5200张处方中,使用抗菌药物的有3382张,占60．04％。其中,注射剂型的抗菌药物使用频率过高且剂量相对于参考剂量普遍较高。另外,抗生素的费用占患者治疗费用的很大比例,且3382张使用抗菌药物的处方疗效并不理想。结论：本院门诊医师在选用抗菌药物时起点偏高,有求新求贵的思想,滥用抗生素,增加了患者的经济负担,要引起重视。     

3种抗生素在小白菜中的积累迁移及风险评估

为了探究土壤中氯霉素类抗生素对小白菜生长的影响及累积迁移规律,并进行健康风险评价.通过盆栽试验,在含有不同质量比(0,5,10,25 mg/kg)的氟苯尼考、氯霉素、甲砜霉素土壤中种植小白菜,检测根茎叶中各抗生素的累积量;采用富集系数、迁移系数分析土壤-小白菜体系的迁移累积特性,并采用风险商值(hazard quoti...     

蛙皮多肽抗生素的研究进展

蛙皮多肽抗生素(peptide antibiotics)是由两栖动物皮肤分泌的,有抗菌、抗癌作用的多肽,广泛存在于两栖动物的皮肤分泌物中.由于具有抗菌谱广、种类多、不易产生耐药性等优点,其应用已涉及到医药工业、食品工业等领域,应用前景广阔.从蛙皮多肽抗生素的分类、分子结构与功能、作用机制、生物学活性、化学修饰和基因工程方面概述了其研究现状与进展.     

microRNA-25促进骨关节炎软骨细胞外蛋白多糖和II型胶原蛋白合成作用

探讨miR-25调节骨关节炎软骨细胞外蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白合成作用。用木瓜蛋白酶膝关节腔注射诱导骨性关节炎动物模型和SD大鼠骨性关节炎软骨细胞原代培养。IL-1β体外刺激OA软骨细胞,模拟骨性关节炎体外环境。miR-25mimic或inhibitor转染至OA软骨细胞。利用RT-q PCR和/或蛋白质印迹法分别检测miR-25、ACAN、Col2a1。IL-1β刺激正常软骨细胞、骨性关节炎细胞比无IL-1β刺激对照组中miR-25表达水平显著增高(P0.05)。相比未转染miR-25对照组,miR-25过表达转染组明显促进ACAN和Col2a1 mRNA转录及蛋白质合成(P0.05)。相反,miR-25低表达转染组明显抑制ACAN和Col2a1 mRNA转录作用及蛋白质合成(P0.05)。miR-25介导OA发病发生、进展中发挥着保护性调节作用,抑制蛋白多糖、胶原蛋白降解作用,可能对OA发病机制有新的认识和提示OA新治疗策略。     

UPLC-MS/MS法测定土壤中氯霉素类抗生素及其代谢物

针对土壤中抗生素污染日益严重的问题，为了促进土壤中抗生素监测技术体系及相关标准的完善，建立了一种QuEChERS结合超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的分析方法。土壤样品用10 mL 3%(体积分数，下同)氨化乙腈提取，0.2 g PSA和0.2 g无水MgSO₄净化，流动相为甲醇-水(1∶1,体积比，下同),ZORBAX SB-Aq(2.1 mm×150 mm, 3.5μm)色谱柱，质谱条件为电喷雾离子源(ESI)、正/负离子扫描、多反应监测(MRM)。结果表明，4种分析物在0.1～200 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数(r)>0.999,检出限(LOD)为0.01～0.06μg/kg,定量限(LOQ)为0.05～0.19μg/kg,在3个加标水平(0.4,8.0,40.0μg/kg)下，平均回收率为87.23%～108.57%,相对标准偏差(RSD,n=5)为0.36%～6.55%。该方法准确、简便、高效、灵敏，适用于土壤中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及其代谢物氟苯尼考胺的同步检测，可为相关部门制定相关行业标准、规范提供数据依据。