SIOC-AA-005的抗肿瘤活性研究

观察SIOC-AA-005体外及体内抗肿瘤活性，通过MTT法和集落形成法观察SIOC-AA-005在体外的抗肿瘤活性，利用^3H-标记前体掺入法检测生物大分子的合成．利用小鼠移植瘤模型观察了SIOC-AA-005在体内的抗肿瘤活性．SIOC-AA-005对人结肠腺癌HT-29细胞的IC50为18．7nmoL／L，比对人胚肺成纤维细胞HELF的IC50低1000多倍，这一结果与集落形成和细胞生长曲线结果一致．SIOC-AA-005对HT-29细胞的DNA、RNA以及蛋白质合成均有抑制作用,SIOC-AA-005在10mg／kg剂量下对小鼠Lewis肺癌的抑制率为30．5％，在5mg／kg，10mg／kg和20mg／kg剂量下对小鼠肝癌H22的抑制率分别为37．6％、40．0％、47．2％，表现出良好的剂量效应关系,SIOC-AA-005在体外、体内均显示了较好的肿癌生长抑制作用，是一个有前景的抗肿癌化合物。     

ACC氧化酶的测定方法

利用番木瓜ＣａｒｉｃａＰａｐａｙａＬ．果实为材料，研究了１－氨基环丙烷－１－羧酸（ＡＣＣ）氧化酶的体内和体外测定方法．在ＡＣＣ氧化酶的体外分析中，甘油体积分数为１０％～３０％时能稳定酶的活性；φ（ＣＯ２）为０．３％～２０％（反应体系气相中）和０．５～１２ｍｍｏｌ／ＬＡＣＣ提高酶的活性；较适宜的ｐＨ值为７．２．     

单细胞凝胶电泳技术检测甲醛对人肝癌细胞HepG2的遗传毒性效应

为了探讨甲醛对人肝癌细胞HepG2的遗传毒性效应,该实验以体外培养的HepG2细胞作为实验材料,运用单细胞凝胶电泳（SCGE）技术分析不同浓度甲醛处理2 h后HepG2细胞DNA损伤效应.结果显示,低浓度（5,25μmol/L）甲醛处理后HepG2细胞尾部DNA百分率（tail DNA%）及彗星状拖尾（comet tail）尾长显著增加,并呈剂量-效应依赖性关系,说明低浓度甲醛具有致HepG2细胞DNA链断裂（DNA strand breakages）作用;而较高浓度（125,625μmol/L）甲醛处理后HepG2细胞尾部DNA百分率及彗星状拖尾尾长则以剂量依赖性方式显著降低,提示较高浓度甲醛具有致HepG2细胞DNA-蛋白质交联物（DNA-protein cross-links,DPXs）形成作用.     

家蝇防御素defensin cDNA的克隆及在毕赤酵母中的表达

提取家蝇总RNA,RT-PCR扩增编码家蝇防御素defensin的cDNA,克隆并测定了其序列,将该cDNA序列与酵母表达载体pPICZαA重组,构建酵母分泌型表达载体pPICZα-de,电激法转化毕赤酵母(Pichia pasto-ris)受体菌GS115。经表型筛选和PCR鉴定证明目的片段已稳定整合到酵母染色体基因组中。在含不同浓度的Zeoc in平板上筛选到高拷贝整合的转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达,用Tric ine-SDS-PAGE确定了表达产物的正确性,琼脂孔穴平板扩散法、比浊法测定了表达产物的活性,对金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus具有一定的杀菌活性。     

高迁移组染色体蛋白-17的分离提取及其抗体ELISA测定方法的建立

纯化高迁移组染色体蛋白－１７（ＨＭＧ－１７）,建立检测抗ＨＭＧ－１７自身抗体的ＥＬＩＳＡ方法,探讨抗ＨＭＧ－１７抗体与临床疾病的关系。用水煮沸法提取,甲酸－吡啶缓冲液酸化和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０凝胶过滤技术,自小牛胸腺组织中分离ＨＭＧ－１７,用此纯化物包被,方阵滴定,建立测定抗ＨＭＧ－１７抗体的间接ＥＬＩＳＡ方法,并进行方法学考核和临床标本检测。纯化的ＨＭＧ－１７抗原经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分析,呈现一条分子量约９２００的蛋白带;建立的ＥＬＩＳＡ方法批内平均变异系数（ＣＶ）为５．８％,批间ＣＶ值为９．６％,ＥＬＩＳＡ抑制试验最高抑制率达８７．２％;临床检测结果表明,在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）、混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）和干燥综合征（ＳＳ）患者中分别有１７．４％～３７．３％的抗ＨＭＧ－１７抗体的阳性检出率（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）,而在其他自身免疫病和内科疾病者中,抗ＨＭＧ－１７抗体均为低水平。抗ＨＭＧ－１７抗体ＥＬＩＳＡ测定法具有较好的特异性和重复性,便于常规检测,该类抗体的存在似与某些自身免疫病（尤其是ＳＬＥ）的关系较为密切     

片形吸虫成虫虫体抗原制备及ELISA实验研究

目的:研究人体片形吸虫病ELISA检测试剂盒的检测效果。方法:采用云南大理本地采集的牛体片形吸虫成虫制备可溶性粗抗原,包被反应板,采用人体片形吸虫病ELISA法(FAWA-ELISA)进行研究,分别检测26份片形吸虫患者血清、102份其他寄生虫病患者血清和25份健康人血清,评价检测试剂盒的检测效果。结果:检测试剂盒的敏感性为100.0%、特异性分别为95.28%(95%CI:98.9%~91.2%),约登指数分别为0.95。结论:FAWA-ELISA试剂盒检测效果较好,且成本相对较低,可适宜用于云南片形吸虫病流行区流行病学筛查,减轻病原学检测的工作量。     

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究 Ⅲ.β—Galactosidase—hCG 免疫和生物活性的初步探讨

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位 C 末端36肽的β-半乳糖苷酶杂交蛋白(简称:β-Galactosidasc-hCG),主动免疫昆明种小白鼠,能诱发特异抗 hCG 抗体的产生。其抗体滴度的高低与免疫原用量有关。通过对小鼠子宫增重抑制试验,表明其抗血清能中和 hCG 的生物活性。     

药用植物细胞培养代谢全能性及产物检测技术的研究进展

回顾“植物培养细胞次级代谢全能性”理论的发展和应用,为开辟一条新的生产途径和一个新型产业提供参考依据。同时报道如何简便、快速、灵敏、专一性强,适于植物组织和细胞培养物中次生代谢物的检测新方法,以便大规模地进行细胞系筛选。     

“老爹”酒中微量组份含量的测定和香型探讨

本文采用填充柱气相相色谱法测定了湘西名酒老爹酒中的微量组份合量,并对酒的香型进行了探讨。     

降低酶联核酸适配体分析方法中非特异性吸附的分析研究

以检测蜂蜜中的四环素残留为例，构建间接竞争酶联核酸适体分析法（ic-ELAA），就ic-ELAA中非特异性吸附的影响因素进行分析，探讨降低非特异性吸附的措施。结果表明：选择2 μg/mL四环素-牛血清蛋白在10 mmol/L Tris-HCl（pH 8.0）中过夜包被，次日用0.5 g/mL酪蛋白封闭1 h，竞争反应后用6 μg/mL链霉亲和素-辣根过氧化物酶催化颜色反应放大竞争效果，最后采用450 nm和630 nm双波长读数，可得到灵敏度为0.035 ng/mL的竞争曲线。同时，根据长期实验经验，提出其他降低非特异性吸附的注意事项。