DWT-PLS在SELDI-TOF MS血清多肽谱解析中的应用

针对表面增强激光解吸/离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF MS）血清多肽谱解析,首先采用离散小波变换（discrete wavelet transform,DWT）对数据进行滤噪、压缩;再采用偏最小二乘（partial leastsquares,PLS）法建立癌症诊断预测模型.考察了DWT对血清多肽谱数据预滤噪、压缩的效率,同时重点研究了小波分解尺度、主成分数对诊断预测准确率的影响.研究结果表明,采用DWT-PLS法解析血清多肽谱简便、高效、预测准确.     

苯并(a)芘对蚯蚓细胞色素P450和抗氧化酶影响

研究了苯并(a)芘(BaP)低剂量污染胁迫下对蚯蚓(Eiseniarfetida)体内细胞色素P450酶系和抗氧化酶系的影响.通过滤纸接触染毒法,按指数递增设计暴露质量浓度为10-6到10-2mg·mL-1,染毒时间48h,检测指标分别为蚯蚓细胞色素P450含量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性.结果表明,在供试质量浓度范围内,蚯蚓体内P450含量和SOD活性与苯并(a)芘污染胁迫存在明显的响应关系,POD活性在BaP的最大暴露质量浓度下(10-2mg·mL-1)被显著诱导,而CAT活性对BaP暴露无明显的指示作用.这表明,BaP的代谢过程诱发了蚯蚓体内P450含量的增加,同时又抑制了SOD酶活性,从而使生物体对活性氧自由基的防御能力下降而更易受到毒害,这可能是BaP对生物体毒性作用的机制之一.     

龙须菜对邻苯二甲酸二甲酯(DMP)毒性的响应

在实验条件下,研究邻苯二甲酸二甲酯(DMP)暴露对龙须菜生理生化指标的影响。结果显示,在低质量浓度DMP(≤0.1 mg.L-1)下暴露时,叶绿素a(Chla)质量分数随暴露时间的延长呈明显上升趋势,暴露20 d时Chla质量分数(以鲜质量计)为0.193 mg.g-1,较之对照组上升了27.81%,短时间内(≤5 d)DMP可促进可溶性蛋白质量分数增加(最大值为1.516%),诱导过氧化氢酶(CAT)活性(以鲜质量计)上升(最大值为205.822μ.g-1.m in-1)和丙二醛(MDA)含量下降(最小值为16.54μmol.g-1),促进龙须菜生长;当DMP质量浓度≥0.3 mg.L-1时,Chla质量分数随着DMP质量浓度的升高和暴露时间的延长呈明显下降趋势,高质量浓度DMP组暴露20 d时,Chla质量分数降至0.118 mg.g-1,较之对照组下降了21.85%,DMP引起可溶性蛋白质量分数逐渐降低,抑制CAT活性,并使MDA明显增加,抑制龙须菜生长。DMP暴露20 d内,过氧化物酶(POD)活性随DMP质量浓度的升高和暴露时间的延长持续受到抑制,而谷胱甘肽氧化酶(GSH-PX)活性与暴露时间呈抛物线型时间-效应关系。     

胡椒碱对脂多糖和金黄色葡萄球菌抑制人结肠腺癌细胞系表达防御素的拮抗作用

目的:研究胡椒碱(piperine,PIP)对脂多糖(LPS)和灭活金黄色葡萄球菌(SAC)菌体抑制人结肠腺癌HT-29和Caco-2细胞表达防御素(Defensin)的影响.方法:WST-1法检测PIP对HT-29和Caco-2细胞增殖的作用;定量PCR(qRT-PCR)检测人α防御素DEFA5(HD5)和DEFA6(HD6),人β防御素HBD-1以及胰岛再生源蛋白(Reg)Reg IIIγ等mRNA的表达水平.结果:PIP处理可剂量依赖性地抑制HT-29和Caco-2细胞的增殖,半数抑制浓度IC50分别为328.5μmol/L和155.1μmol/L,表明PIP对细胞的毒性较小;定量PCR检测显示,PIP处理对LPS或SAC下调HT-29和Caco-2细胞DEFA5和DEFA6 mRNA表达水平具有显著的拮抗作用,对DEFB1和Reg IIIγmRNA的表达没有明显影响.结论:胡椒碱可能通过拮抗病原体诱导细胞表达防御素的抑制作用,进而发挥其抗肠炎作用.     

PRV广东株gE基因去信号肽片段的克隆与序列测定

根据伪狂犬病病毒（PRV）Rice株gE基因的序列设计并合成了1对引物,以我国PRV地方毒株广东株的基因组DNA为模板,通过PCR方法获得了一大小约1.6kb的DNA片段,并将其克隆到pMD18-T载体上进行测序,序列测定结果显示,该片段长1665bp,编码555个氨基酸,与PRV Rice株gE基因的核苷酸序列同源性为97.7%,氨基酸序列同源性为95.9%。     

新疆芍药与窄叶芍药根中多糖含量测定及体外抗氧化活性的研究

为探讨新疆芍药和窄叶芍药根中多糖的含量并评价其多糖体外抗氧化活性。采用水提醇沉法提取多糖,用Sevage法除蛋白、活性碳脱色,并用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量;并采用1,1-二苯基-2-硝基苯肼自由基清除法(DPPH法)和2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐自由基清除法(ABTS法)对提取的多糖进行体外活性评价。结果显示:纯化后窄叶芍药和新疆芍药的多糖含量达0.82%和0.78%;窄叶芍药和新疆芍药多糖对DPPH自由基的IC50分别为0.07 mg/m L和0.13 mg/m L;而两者对ABTS自由基的IC50分别为0.075 mg/m L和0.096mg/m L。由此可知,本文建立的测定多糖含量的方法简便、准确、重现性好;且窄叶芍药和新疆芍药对清除DPPH与ABTS自由基均具有一定抗氧化活性。     

海藻糖对冻干胸腺肽生物活性保护作用的研究

将胸腺肽原液与不同浓度的海藻糖（Trehalose)同时冻干后分别在4,22和37℃下保存0-24个月,并于不同时间进行E-玫瑰花环结合率实验检测其稳定性。结果显示海藻糖对胸腺肽活性具有明显的保护作用,随着海藻糖浓度升高（5%-15%）,其保护性能逐渐加强。15%海藻糖在实验组中对胸腺肽自学成才性保护性最强,在各保存温度尤其在低温条件下（2-8℃）。海藻糖可极显著增强胸腺肽活性,延长有效活性保存时间。     

玫瑰花中两种抗氧化成分的分离鉴定与活性测定

通过体外抗氧化活性检测寻找玫瑰花（rosarugosa）中的抗氧化活性成分．方法采用大孔树脂，硅胶柱层析分离技术对玫瑰花抗氧化活性部位进行分离纯化；并通过理化数据及色谱分析，鉴定化合物的结构．结果分离鉴定出2种抗氧化活性成分Ⅰ，Ⅱ．分别是3，5，7，3′5′-五羟基黄酮（槲皮素）和3，4，5-三羟基苯甲酸（没食子酸）．化合物Ⅰ（槲皮素）为首次从玫瑰花中分离得到．化合物Ⅰ和化合物Ⅱ的抑制小鼠红细胞溶血活性和抗小鼠组织匀浆脂质过氧化活性均高于玫瑰花粗品，     

5种药食同源植物的抗氧化作用

以刺梨、 干姜、 肉桂、 山药、 葡萄籽5种药食同源植物为原料, 利用水提法提取有效成分. 以模式生物秀丽隐杆线虫(线虫)为模型, 通过线虫寿命测定实验、 体外氧化压力测定实验和体内自由基清除实验评估5种药食同源植物的抗氧化作用. 实验结果表明: 2 mg/mL的刺梨水提物和2 mg/mL的葡萄籽水提物均能显著延长受试线虫寿命; 5种不同质量浓度的植物水提物均对受试线虫有显著的氧化损伤修复能力及一定的清除体内自由基能力, 其中刺梨[KG*8]和葡萄籽水提物的清除自由基能力效果明显.     

泰山四叶参多糖的提取、含量测定及抗氧化活性研究

本实验研究泰山四叶参多糖的提取、分离、纯化方法,并测其含量,探讨其抗氧化能力.方法是建立热水提取、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白及透析、纯化泰山四叶参多糖的方法,采用苯酚-浓硫酸法测定其含量,并比较了不同浓度的四叶参多糖（200、400、600、800、100μg/ml）和抗坏血酸（Vc50、100、200、400、600、800、100μg/ml）的还原能力以及不同浓度的泰山四叶参多糖和抗坏血酸（均为40、80、160、320、600、800μg/ml）清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基的能力.结果显示,本实验提取得到泰山四叶参多糖含量为11.09%,泰山四叶参多糖的还原能力及清除DPPH自由基的能力随其浓度的增加而增大,在800μg/ml时,DPPH自由基清除率达到90%以上,接近抗坏血酸的清除率.因此,泰山四叶参多糖具有较好的抗氧化能力.