蓖麻饼提取蛋白质的研究

本文就蓖麻籽榨油后所剩的物质-蓖麻饼中提取分离蛋白质进行了研究,采用正交设计方法,进行提取分离蛋白质的工艺实验,得到了蛋白质提取率在67.5%-93.1%的较佳工艺条件。     

Inhibitory effect of the adenovirus type 5 E1A protein expressed in the yeast system on the human tumor cell growth

Adenovirus 5 type E1A as a tumor suppressor gene can inhibit tumor growth and enhance the sensitivity of chemotherapy and radiotherapy. E1A have the ability to integrate into the host genome, resulting in long-time expression that induces Rb gene inactivation and animal cells immortalization. This prompted us to select the E1A protein for treatment of cancer in order to overcome the limitations of E1A gene therapy. Thus, we firstly constructed E1A eucaryotic expression vector (pPIC9/E1A), transformated the pichia pastoris yeast cells (GS115) and screened the high-expressing recombinant strains. The positive yeast strains were cultured in the shake flask, and induced for 3 d. The crude E1A protein was purified using two steps of column chromatography on HiTrap Q and HiTrap SP. The purified E1A protein was identified by SDS-PAGE and Western blot. E1A protein was mostly located at cellular nuclear when Chariot delivered E1A protein into cells. The analysis in vitro indicated that the E1A protein arrested LN686 cell cycle at G2/M phase, and significantly inhibited the growth of LN686 tumor cells. The current studies firstly provided an experimental basis to further develop E1A protein for tumor treatment.     

基于响应面分析法的草鱼蛋白酶解工艺

应用响应面分析法对草鱼蛋白两段酶解的条件分别进行优化,第一段酶解复合使用胰酶／风味蛋白酶（质量比为4：1）,以蛋白质利用率为响应值;第二段酶解用木瓜蛋白酶,以肽得率为响应值．最终确定第一段酶解的最优条件为：酶（E）与底物（S）的质量比为0．3：100,温度为53℃,时间为5．90h;第二段酶解的最优条件为：E与S的质量比为0．12：100,温度为60℃,时间为5．60h．利用凝胶色谱测得最优条件下制备酶解液组分的相对分子质量范围介于714～8790之间,酶解液中肽含量超过50％（质量分数）,与响应面模型所预测的肽得率（52．55％）相吻合．     

生长因子受体酪氨酸蛋白激酶及致癌性的阻遏

多肽生长因子（ＰＧＦ）介导之信号的特异性．在于它们能与特殊的细胞表面受体相结合，激发细胞内的一系列生理生化过程．生长因子受体都具有内在的酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性。生长因子与受体结合后能激活ＴＰＫ，导致各种细胞蛋白质的磷酸化和受体自身的磷酸化．许多癌基因产物都具有ＴＰＫ活性，ＴＰＫ的功能是使生长因子信号变为细胞内信号。肿瘤细胞受体ＴＰＫ区的突变体，虽然可能仍具有结合配体的能力，但丧失了刺激细胞内效应的能力。说明受体信号激活的关键是由一个功能性ＴＰＫ决定的，并通过一些ＴＰＫ的底物来介导细胞内的效应．这使人联想到肿瘤细胞之所以呈失控的增殖状态，与其受体ＴＰＫ的激活及细胞蛋白磷酸化密切相关。     

原发性子宫内膜癌与p16基因突变及蛋白表达关系的研究

目的研究p16蛋白表达与原发性子宫内膜癌发生发展的关系和p16基因缺失突变及点突变在原发性子宫内膜癌发生发展中的地位.方法利用免疫组织化学方法、聚合酶链反应和聚合酶链反应-单链构象多态性分析技术,分别检测正常子宫内膜组织、子宫内膜癌前病变组织及原发性子宫内膜癌组织,观察p16蛋白和p16基因缺失突变及点突变.结果1)p16蛋白阳性表达率在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌前病变组织中表达率分别为92.78%和90.00%,两者相比无差异性;在原发性子宫内膜癌组织中为66.67%,明显低于正常子宫组织及癌前病变组织;2)在42例原发性性子宫内膜癌组织中有14例发生p16基因缺失突变,4例发生了p16基因点突变,突变率为分别为33.33%和9.6%,正常子宫颈组织和子宫内膜癌前病变组织未发现p16基因缺失突变和点突变.结论1)在原发性子宫内膜癌发生发展过程中,p16蛋白的表达在高分化癌明显低于低分化癌,表明p16蛋白缺乏与子宫颈细胞增殖失控及分化不良紧密相关.2)原发性子宫内膜癌存在p16基因点突变,以低分化癌多见,但不是较频繁的事件;原发性子宫内膜癌存在p16基因缺失突变,以低分化癌多见,是较频繁的事件.3)p16蛋白表达与p16基因突变的相关性未被发现.     

胶体金标记牛血清白蛋白及其在电场中的迁移行为

采用柠檬酸钠还原法制备了不同粒径的胶体金,对牛血清白蛋白(BSA)进行标记,考察了胶体金标记BSA的影响因素.以琼脂糖凝胶为载体介质,研究了三种粒径的胶体金及其BSA复合物在电场中的迁移行为.结果表明,pH值、离子浓度、蛋白量都会影响胶体金对BSA的标记.标记的最适条件是:无盐或极低盐浓度,pH值5.8,蛋白加入量不小于最小稳定蛋白量.胶体金及其BSA复合物在特定电场中的迁移行为类似于火箭免疫电泳,其迁移速度随着金纳米粒子粒径的增大而减小;金纳米粒子与BSA结合后迁移速度减慢,BSA的加入量对复合物的迁移速度无影响.     

小麦高产优质综合栽培措施优化模式的研究

本文以施氮量、施磷量和基本苗为试验因子。运用三因素五水平二次回归正交旋转组合设计试验所得的资料,建立了陕农7859产量、蛋白质含量、赖氨酸含量的回归方程,通过计算机模拟,筛选出了产量400公斤/亩,蛋白质含量16.0%,赖氨酸含量0.42%的栽培措施优化模式为:施氮量为11.21-16.48公斤/亩,施磷量为7.21-9.50公斤/亩,基本苗为13.73-17.31万/亩,文中还分析了各因素的产量效应,蛋白质含量效应和赖氨酸含量效应,对产量的影响顺序为:施氮量>施磷量>基本苗,对蛋白质含量和赖氨酸含量的影响均为施氮量>基本苗>施磷量。     

百合属几种植物亲缘关系的可溶性蛋白质和过氧化物酶分析

采用聚丙烯酰氨凝胶电泳法，分析了百合属8种植物的可溶性蛋白质和过氧化物酶．结果显示：可溶性蛋白质谱共有48条带，其中26条带为多态性带；过氧化物酶谱共有20条带，19条带具有多态性．根据可溶性蛋白质和过氧化物酶的谱带进行了聚类分析，结果表明，生化水平与传统的形态学分类结果基本一致．     

亚硒酸钠对麦穗鱼的遗传毒性效应研究

４ｐｐｍ的Ｎａ２ＳｅＯ３对麦穗鱼的微核率有显的影响（Ｐ＜０．０５），所以ｓｅ在定浓度下是致突变剂，而０．１ｐｐｍ的ＮａＳｅＯ３对麦穗鱼的核异常率有极显的影响（Ｐ＜０．０１），因此，０．１ｐｐｍ应视为有毒效应浓度。麦穗鱼可用作淡水水体致突变物污染的监测生物。     

SVM-KNN分类器在异常行为检测中的应用

提出了一种新的异常行为检测方法,将SVM算法和KNN算法结合,在对识别样本判别时,当其与最优分类面的距离大于给定阈值时,采用SVM分类算法,否则采用KNN算法,从而减少了SVM算法的错误率。实验结果表明,SVM-KNN算法对异常行为检测的准确率达到95.86%。