植物抗虫基因工程研究与应用

近年来,植物抗虫基因工程研究及应用进展喜人.本文综述了利用Bt杀虫蛋白基因、豇豆蛋白酶抑制素基因、昆虫特异性神经毒素基因以及外源凝集素基因等抗虫基因开展植物抗虫基因工程研究的概况,并探讨了植物抗虫基因工程中存在的主要问题及解决的途径.     

转基因EGFP小鼠血液生理生化指标的测定

目的测定转基因C57BL/6-Tg(ACTB-EGFP)1Osb/J小鼠血液生理生化正常值。方法采用全自动生化测定仪对5～6周雄性、6～7周雌性EGFP小鼠的血液常规及生化值进行测定。结果EGFP转基因雄雌小鼠血常规比较,雌雄鼠的血红蛋白(Hb)、血小板(PLT)之间比较差异非常显著(P<0.01),单核细胞计数(MO)、红细胞宽度(RDW)之间比较差异显著(P<0.05);血液生化值雄雌小鼠比较,白蛋白(Alb)、甘油三酯(TG)差异非常显著(P<0.01),其它指标差异不显著。结论该小鼠的生理生化指标值在雄雌间有一定的差异,但该值均在正常波动范围。     

外源hDAF基因对转基因猪影响的初步研究

应用显微注射方法将外源hDNA基因导入湖北白猪的受精卵,获得了相应的转基因猪,4．2,8．0kb两种导入外源基因片断移植后死胎率分别为20．00％,39．71％,差异不显著,8．0kb基因产仔畸形率为11．76％,而4．3kb基因无畸形,结果表明,原核基因对转基因猪有明显的致畸作用,G0代转基因猪60日龄重,6月龄重对照组差异均不显著,表明外源基因的整合位点较理想。     

EB病毒转基因小鼠血生化及白细胞分类的观察

目的探讨EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)BLLF1基因转基因小鼠的部分血生化指标改变和白细胞特性,为该模型小鼠的进一步应用提供基础数据。方法选取2月龄和4月龄的EBV转基因小鼠及KM小鼠的血清测定谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)和肌酐(CRE),观察其肝肾功能;并测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和血糖(GLU);取全血测定白细胞总数(WBC)及其分类。结果EBV转基因小鼠血清中的GOT、TP、ALB、BUN、CRE、TC和TG与同周龄同性别的KM小鼠相比,均存在显著性差异;EBV转基因小鼠的WBC总数以及中性粒细胞百分比(GRN%)与同周龄同性别的KM小鼠相比显著升高,而淋巴细胞百分比(LYM%)显著降低。结论通过对EBVBLLF1基因转基因小鼠的部分血生化指标改变和白细胞特性的观察,为该小鼠的应用提供了基础资料。     

新型三倍体鲫鱼肌肉营养成分和氨基酸组成分析

运用生物化学方法对新型三倍体鲫鱼及其父本异源四倍体鲫鲤和母本金鱼肌肉中的营养成分和氨基酸含量进行了定量分析.结果表明:新型三倍体鲫鱼肌肉中[干样(mg/g)]氨基酸总含量为102.35,人体必需氨基酸(EAA)(Thr,Val,Met,Ile,Leu,Phe,Lys,Trp)含量为45.20,占氨基酸总含量的44.16%;两种人体半必需氨基酸(HEAA)(His,Arg)含量为11.68,占氨基酸总含量的11.41%;4种呈鲜、甜味氨基酸(Asp,Glu,Gly,Ala)的含量为31.56,占氨基酸总含量的30.84%.通过对比新型三倍体鲫鱼与其父本四倍体鲫鲤、母本金鱼及其他种类鱼的肌肉营养成分,发现4种呈味氨基酸含量远远高于其父母本中相应4种氨基酸含量,人体必需氨基酸含量也远远高于湘云鲫(鲤)等其他同类品种鱼类的含量.     

小麦幼胚培养技术及其应用的研究进展

综述了影响幼胚培养的因素、愈伤组织的内部结构与生化代谢，以及小麦幼胚培养在远缘杂交育种、抗胁迫育种和农杆菌介导转基因育种中的应用研究的现状及展望．     

Obtaining High Pest-resistant Tobacco Plants Carrying B.t. insecticidal Gene

To increase the expression level of CryIA(c) gene in transgenic plants, a plant expression vector pBinMoBc carrying the CryIA(c) gene under control of chimeric OM promoter and Ω factor was constructed. As a control, pBinoBc carrying the CryIA(c) gene with the CaMV 35S promoter was also constructed. The vectors were transferred into tobacco plants respectively via Agrobacterium-mediated transformation. ELISA assay showed that the expression level of the CryIA(c) gene in pBinMoBc transgenic tobacco plants was 2.44-times that in pBinoBc transgenic tobacco plants, and it could be up to 0.255% of total soluble proteins. Bioassay showed that pBinMoBc transgenic tobacco plants had more notable insecticidal effect than pBinoBc transgenic tobacco plants. The above results showed that the chimeric OM promoter was a stronger promoter than CaMV 35S promoter that was widely used in plant genetic engineering, and this is very useful in pest-resistant plant genetic engineering.     

转基因小鼠与肿瘤研究

转基因小鼠的出现有力地推动了肿瘤研究的发展。具有癌症倾向的转基因小鼠,是从DNA水平开展有关人类恶性肿瘤发生、生长、转移和防治研究的良好活休模型。肿瘤形成与控制细胞生长和分化的多种基因特别是癌基因、抑癌基因的遗传改变有关。在利用转基因小鼠进行实验研究时,对由相同结构基因建立的不同转基因小鼠家系在癌基因表达上的时空差异性,应当给予足够的重视。此外,实现转基因动物生产的专业化、产业化,将会加速我国生命科学领域中转基因动物应用研究的进程。     

pGH基因在F_1代转基因金鱼中的整合及表达的分析

本实验对转基因金鱼进行分子生物学鉴定,所用实验材料转基因金鱼是采用显微注射的方法,将羊金属硫蛋白基因启动子与猪生长激素基因(pGH)重组而成的线形DNA片段导入金鱼的受精卵中,在合适的条件下培养获得的。为了鉴定外源基因在金鱼体内整合、表达和遗传的情况,我们选择了相同生长期的F_1代转基因金鱼6条和普通金鱼2条,进行总DNA的提取和纯化,用特异引物对pGH基因进行PCR扩增,结果表明:外源基因(pGH)在部分受体金鱼中得到了整合,并通过有性繁殖稳定地遗传给下一代。同时将阳性金鱼与阴性金鱼进行身长和体重等形态上的比较,初步断定:pGH基因在部分受体鱼中得到了表达,且有显著的促生长作用。