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41.
PCR扩增人外周血淋巴细胞抗体基因的探讨 总被引:1,自引:0,他引:1
采用RT-PCR法,以一组人抗体重链和轻链简并引物,直接从人外周血混合淋巴细胞中扩增出抗体重链Fd和κ轻链基因.结果提示:用Trizol试剂提取细胞总RNA,以Olig(dT)引导合成cDNA第一链,再经PCR扩增的方法,是值得优先采用的方法.细胞总RNA的提取不必追求高纯度,少量外周血即足以满足构建抗体库所需,简并引物可获得良好的扩增效果,为构建噬菌体抗体库奠定了基础 相似文献
42.
采用脑CT检查、循环抗原及抗体检测方法,对408例儿童脑囊虫病患者进行了对比研究。结果表明,采用这三种检测方法,所得结果一致。说明三种方法都是诊断脑囊虫病的好方法,综合运用三种方法。可提高诊断率和确诊率。 相似文献
43.
利用PCR方法,从含有1A8VLCκ基因或1A8Fd基因的重组质粒中扩增出1A8VLCκ基因及1A8Fd基因,并使基因两端携带合适的限制性酶切位点,将其克隆入植物表达载体pCAMBIA2301或pBIl21,构建1A8VLKCκ-pCAMBIA2301和1A8Fd-pBI121。用PCR方法改造酶切位点,继而将含有1A8Fd基因的植物表达框克隆入1A8VLCκ-pCAMBIA2301,构建获得1A8Fab-pCAMBIA2301重组质粒,并导入农杆菌GV3101。为进一步在植物中表达该抗体片段奠定了基础。 相似文献
44.
在分析抗体空间结构特点和残基间相互作用基础上,利用计算机辅助的分子设计和表面残基替换法进行鼠源抗体人源化设计。在抗体同源模建的基础上,利用序列分析和结构分析确定鼠源抗体可变区中外露的非人样差异残基,参考分子内、间氢键相互作用,最终选定将要突变的残基位点。使用这种方法对一株抗人肝癌细胞的单克隆抗体HAb18进行了人源化改造设计,并将候选位点分为三类,以便于在实验中依次突变,寻找降低鼠源抗体免疫原性和保持其生物功能之间适宜的平衡点。结果表明表面重塑方法可以有效地减少抗体人源化设计中CDR空间构象的变化,维持抗体生物活性,为试验提供有力的理论依据。 相似文献
45.
制备抗结核分枝杆菌Hsp16.3的单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定。将含目的基因的表达载体pProEXHTb-Hsp16.3,通过E.coli DH5α诱导表达,获得含有6譎is的Hsp16.3蛋白,采用Ni-NTA纯化试剂盒进行目的蛋白的纯化,并用透析方法进行蛋白复性。将复性的蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术进行细胞融合,间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株。将获得的Hsp16.3阳性杂交瘤细胞株分别利用间接ELISA法和Western blot方法进行效价、相对亲和力及特异性的测定。获得了三株Hsp16.3的单克隆抗体,分别命名为3H6F9、1D5E1和4H8G6,其效价分别为1:1?07、1:1?06和1:1?06,相对亲和力分别为0.0001 mg/mL、0.001 mg/mL和0.001 mg/mL,并且无交叉反应性。所获得的结核分枝杆菌Hsp16.3的单克隆抗体效价高、特异性强,为进一步研究Hsp16.3在结核分枝杆菌潜伏感染中的作用提供了有效的工具。 相似文献
46.
2010—2011年宾川县麻疹IgM抗体检测结果分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:通过IgM抗体检测结果,分析宾川县麻疹有效接种率状况,为预防和消除麻疹提供科学依据。方法:采用描述流行病学方法对宾川县2010-2011年麻疹IgM抗体检测资料进行统计分析。结果:宾川县2010-2011年共检测麻疹血液标本781人份,其中麻疹IgM抗体阳生率95.51%,7~10岁组阳性率最高达96.36%,0~1岁组阳性率最低为94.56%。结论:宾川县近年来麻疹疫苗免疫接种工作成效明显,人群麻疹IgM抗体处于一个较高水平,下一步要继续抓好麻疹基础免疫接种工作,注重接种质量和效果,消除人群免疫空白,提高人群麻疹抗体水平。 相似文献
47.
目的为Beagle犬犬传染性肝炎(ICH)的预防制定合适的免疫程序提供依据。方法采用间接血凝抑制实验对24头Beagle犬(雌雄各半,20日龄~14周龄)注苗前后120份Beagle犬血清I型犬腺病毒血凝抑制抗体(HI)进行检测。结果注苗前20日龄仔犬血清母源性HI抗体效价为1:8~1∶32(平均1∶20),35日龄仔犬血清母源HI效价下降为1∶2~1∶8(平均1∶5);首免后2w(56日龄)血清HI效价上升为1∶8~1∶32(平均1∶14),二免后3w(77日龄)血清HI抗体效价上升为1∶32~1∶128(平均1∶45),三免后3w(98日龄)血清HI抗体效价继续上升为1∶64~1∶256(平均1∶79)。结论预防Beagle犬犬传染性肝炎(ICH)建议使用FiveStar犬五联弱毒疫苗,首免为35~40日龄,每间隔3w进行二免和三免加强。 相似文献
48.
功能化氧化石墨烯的靶向肿瘤成像与光热治疗 总被引:1,自引:0,他引:1
整合素αvβ3是一种跨膜糖蛋白, 高表达于多种肿瘤细胞表面, 如人恶性胶质瘤(U87-MG). 它能够作为一类肿瘤标志物, 为肿瘤类型的诊断提供依据, 并为肿瘤治疗提供潜在作用靶点. 本文以人恶性胶质瘤细胞(U87-MG)为治疗模型, 利用靶向配体——整合素αvβ3单克隆抗体(integrin αvβ3 monoclonal antibody), 偶联新型纳米材料——氧化石墨烯(nano-graphene oxide, NGO), 构建成一种新型纳米探针(NGO-mAb-FITC)用于靶向成像及光热治疗. 这种纳米探针具有主动靶向功能, 可识别αvβ3阳性表达细胞U87-MG, 但不被αvβ3阴性表达的人乳腺癌细胞(MCF-7)摄取. 通过异硫氰酸荧光素(FITC)共价修饰靶向配体, 使纳米探针(NGO-mAb-FITC)获得对肿瘤细胞的靶向成像作用. 同时, 利用氧化石墨烯在808 nm近红外激光照射下的光热转化性能, 使得特异性摄取NGO-mAb-FITC纳米探针的肿瘤细胞内部产生过高热(hyperthermia), 从而诱导肿瘤细胞热损伤及细胞凋亡. 实验结果表明, NGO-mAb-FITC能有效识别靶细胞, 为肿瘤诊断提供依据, 而利用氧化石墨烯的高光热转换性能, 为肿瘤治疗提供新途径, 并有望成为一种有潜力的新型靶向光热转换探针而用于肿瘤的成像诊断与光热治疗. 相似文献
49.
建立了洛美沙星的化学发光-酶联免疫分析方法。实验对包被抗原的度盘浓度、洛美沙星抗体及辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗的稀释倍数、酶标板的种类等进行了优化。在最佳实验条件下,测得的IC50值为0.22ng/mL, 检测限为0.032ng/mL。该方法具有良好的特异性,在检测的10种代表性的喹诺酮类药物中,仅诺氟沙星和氟罗沙星交叉率高于1%(分别为:6.88%和2.16%)。将该方法应用于脱脂牛奶中添加洛美沙星回收率的测定,批内和批间回收率分别为:88.7%~103.4%和97.8%~107.2%,相应变异系数分别为:6.3%~8.6%和2.4%~8.0%。 相似文献
50.
40只1日龄健康雏鸡随机分成4组,Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为黄芪多糖试验组,每组10只,置于相同的条件下饲养,在第5日龄时对Ⅱ-Ⅳ组每只鸡分别颈部皮下注射0.1mg、0.3mg和0.5mg黄芪多糖注射液,对照组注射生理盐水,每天1次,连续3d,并于第7和21日龄时采用滴鼻、点眼的方式给各组鸡接种新城疫Lasota弱毒疫苗,用β-微量法检测血清中血凝抑制抗体效价的动态变化。结果表明,黄芪多糖对鸡新城疫免疫效果有明显的促进作用,与对照组(Ⅰ组)差异显著,其中以黄芪多糖0.5 mg/只时为最佳使用剂量。由此可见,黄芪多糖在一定剂量范围内可明显增强对鸡新城疫免疫的效果。 相似文献