人β防御素3基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达

根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏爱性和β防御素3全基因中G．C、A、T含量的平衡,设计搭桥引物,通过PCR法合成人β防御素全基因序列,克隆到真核表达载体pPICZα-A,测序确认．将重组体电击转化酵母GS115,转化子经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂孔穴扩散法检测抑菌活性．结果表明,目的基因在毕赤酵母中已得到表达,表达量为0．22mg／mL,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抑菌活性．     

北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的 检测结果及 MLST 分型分析

目的 了解北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的携带情况及分子特征,为实验大鼠金黄色葡萄球菌的防控 提供基础信息。 方法 按照 GB / T 14926. 14—2001 实验动物金黄色葡萄球菌检测方法,对 2008—2017 年北京地区 实验大鼠进行检测,并按年份和季节对检出情况进行分析;然后,对其中主要菌株进行 MLST 分型及分析。 结果 2008—2017 年在北京地区实验大鼠中检测到金黄色葡萄球菌 165 株,阳性率为 8. 44% ;2013 年达到金葡菌阳性峰 值(39 株,18. 48% ) ,而阳性率在季节间的差异不明显。 MLST 分型将 148 株金黄色葡萄球菌分为 7 个型别( ST8、 ST3、ST1、ST6、ST2871、ST88 及 ST641) ,其中 ST1 占比最大( 51. 35% ) ,其次是 ST2871( 30. 41% ) ,其余 ST 型别占比 都低于 10% ;进一步分析发现其具有显著的时空分布特点,并存在进化相关性。 结论 本研究为实验大鼠金黄色 葡萄球菌的防控提供了基础信息。     

离子注入对绿豆种胚细胞结构变化及萌发生长的影响

应用光镜和扫描电镜研究低能铜离子注入绿豆（ＰｈａｓｅｏｌｕｓａｕｒｅｕｓＲｏｘｂ）种胚细胞结构的变化，结果表明绿豆种胚被铜离子注入的区域其细胞结构和未注入的对比，发生了一定程度的变化并出现了局部损伤。在实验室条件下通过观察绿豆种胚的萌发过程，表明离子注入造成的局部细胞损伤在８ｈ后得到修复，同时记录了离子注入对绿豆种胚萌发以后生长的影响。     

克拉维酸的纸片定量测定法

报道了以金黄色葡萄球菌为指示菌，纸片法定量测定β－内酰胺酶抑制剂克拉维酸的研究结果。该方法具有操作简便，重复性好，相对误差小等优点，可用于大样本量的克拉维酸定量测定。     

大肠杆菌S12无细胞系统合成AgrA蛋白的研究

利用无细胞合成方法，对AgrA蛋白进行了生物体系外合成，且研究了不同反应温度和时间对蛋白合成的影响。结果表明，AgrA蛋白在无细胞系统中成功被合成，且30℃、4h条件下蛋白合成效果较好。     

从临床分离的金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌对中药“脱腐生肌散”的敏感性测定

用常规打洞法测定了中药“脱腐生肌散”对从临床分离的50株金黄色葡萄球菌及11株绿脓杆菌的抑(杀)菌作用,并兼与10种常用抗菌类药物作了对比性测定;同时选取Oeding氏Ⅰ型,Ⅱ型,Ⅲ型金黄色葡萄球菌各1株及绿脓杆菌2株,分别测定了“脱腐生肌散”的抑菌效价及抗茵性质。发现供试菌株对部分抗菌类药物已产生不同程度耐药性,但对“脱腐生肌散”均100％敏感,且无明显株间差异性,对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的最小抑菌浓度分别为1:8000和1:16000;最小杀菌浓度分别为1:1000和1:2000—4000。这些结果提示,临床应用“脱腐生肌散”治疗创伤时所呈现的抗感染作用,主要与其所具有的直接抑(杀)菌作用密切相关。     

我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌污染调查、耐药性及其肠毒素基因检测

调查了2011—2016年我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对分离到的相关菌株进行了肠毒素基因的检测和耐药性分析。收集全国39个城市699份市售食用菌,利用定性和定量检测方法,检出金黄色葡萄球菌阳性样品33份,平均污染率4.72%,污染水平9.75MPN/g。24种抗生素的药敏结果显示,分离株耐药情况严重,对利奈唑胺、利福平敏感,对氨苄西林等22种抗生素都产生不同程度的耐药。7株分离株经表型和分子鉴定确定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。运用聚合酶链式反应法对分离的39株金黄色葡萄球菌进行了18种肠毒素基因检测,约60%分离株携带4~6种肠毒素基因,携带率最高的肠毒素基因是sei,其次是sem、seg、seq、sec、seb、sen。本研究反映了我国市售食用菌金黄色葡萄球菌污染的潜在风险,相关分离株具毒性潜力,且耐药性严重,应引起重视。     

微量量热法研究草乌生物碱对细菌的代谢作用

从草乌中提取生物碱，用瑞典产的2277型热活性检测仪测定了不同浓度的草乌生物碱液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌代谢作用的热功率－时间曲线，计算出细菌生长的速率常数，建立了速率常数与药物浓度间的关系，进而确定了最佳浓度。     

一种蛋白A的Z结构域衍生物的构建及对IgG亲和力的研究

蛋白A是金葡菌中一种重要的致病因子,有较强结合多种哺乳动物的IgG的能力,因此降低机体产生特异性SPA抗体的水平,使金葡菌具免疫逃逸功能.研究一种与IgG亲和力较弱的蛋白A衍生物,对金葡菌疫苗的开发具重要意义.研究表明,蛋白A的Z结构域中位于第13、14位的Phe,Tyr是两个与IgG结合的关键位点.本文首次通过PCR突变技术,将这两个关键氨基酸均改造为Gly,构建突变体ZFY.Discovery Studio3.5受体-配体相互作用力模块分析显示,突变体ZFY与IgG结合力降低到-61.68kcal/mol,仅为原相互作用力的10.69%;构建得到ZFY蛋白,经ITC测定,ZFY与兔IgG的亲和常数降低到1.2×104 M-1,仅为原亲和常数的0.39%,证明了ZFY是一种与IgG亲和力较弱的蛋白A衍生物,为实现新型蛋白A疫苗治疗金葡菌感染奠定基础.     

紫地榆提取物体外抗菌活性研究

目的:从紫地榆乙酸乙酯部位分离得到不同组分,并对其进行体外抗菌活性研究。方法:通过大孔树脂柱对紫地榆乙酸乙酯部位分离,分别用水和不同浓度的乙醇进行梯度洗脱,不同极性提取物用常量试管稀释法对13株常见病原菌和10株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌进行抑菌作用研究。结果:水部位提取物对标准菌株无明显抑菌活性;50%乙醇提取物对13株常见病原菌和10株临床分离的MRSA均有不同程度的抑菌作用。结论:紫地榆50%乙醇提取物在体外有不同程度的抑菌活性。