一种可作为抗金黄色葡萄球菌感染的新型广谱疫苗--PNSG

金黄色葡萄球菌是医院感染中最常见的病原菌，也是社会上大范围感染的主要病原菌．金黄色葡萄球菌感染可引起心内膜炎、骨髓炎、脓毒性关节炎、肺炎和脓肿等疾病．金黄色葡萄球菌也是重要经济动物的主要病原菌．金黄色葡萄球菌对青霉素这样的首选药物产生抗药性后引起的主要问题是，用甲氧西林治疗甲氧西林抗性的金黄色葡萄球菌（ｍｅｔｈｉｃｉｌｌｉｎ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｓ．Ａｕｒｅｕｓ，ＭＲＳＡ）引起的感染无效，这就使金黄色葡萄球菌引起的疾病越来越流行，尤其是在住院的病人中．人们更为忧虑的是，最近在几个国家中，ＭＲＳＡ…     

成都地区健康犬及其畜主鼻腔金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的分离及耐药性研究

为了解成都地区健康犬及其主人金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌的携带率及耐药情况,对收集的鼻腔棉拭子样本308份(犬源和人源各154份)进行相关细菌分离、纯化及鉴定.对获得菌株进行药物敏感性和mec A基因检测.结果表明:犬源和人源金黄色葡萄球菌分离率分别为5.19%(8/154)和13.64%(21/154),犬源和人源中间型葡萄球菌分离率分别为9.74%(15/154)和2.60%(4/154);金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌中mec A检出率分别达20.71%和68.42%;29株金黄色葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶耐药最严重(耐药率R达93.10%),对青霉素G和复方新诺明耐药较严重(R分别为72.41%和58.62%),对其余药物呈不同水平耐药性(耐药率范围6.90%~27.59%);19株中间型葡萄球菌对磺胺二甲嘧啶、青霉素G耐药非常严重(R分别达100.00%和94.74%),对红霉素及复方新诺明耐药较严重(R分别为78.95%和73.68%),对其余药物呈不同水平耐药性(R范围5.26%~63.16%),26.32%中间型葡萄球菌对苯唑西林耐药.不同来源菌株表现出较严重多重耐药性,尤其是耐苯唑西林中间型葡萄球菌呈100.00%多重耐药性.以上结果说明,健康犬和人类鼻腔内可携带金黄色葡萄球菌和中间型葡萄球菌,这些菌株已呈较严重耐药性,在这些菌株中mec A基因普遍存在,应加强对这两种细菌流行情况及其耐药性检测.     

白及多糖提取工艺及抑菌活性检测

以水提醇沉法提取白及多糖,以不同料液比、提取温度和提取时间作为实验条件,以白及多糖提取率为指标进行正交实验,从而确定最佳的提取工艺.在最佳条件下将提取得到的白及多糖以合适的用量和添加方式加入到膏剂中制成白及膏.采用滤纸片扩散法测定白及多糖提取液和白及膏对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制作用.结果表明,白及多糖最佳提取工艺为料液比1∶35（g∶mL）,提取温度80 ℃,提取时间4.0 h,在此提取条件下,白及多糖得率为25.97%.当质量浓度达到0.33 g/mL时,白及多糖对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用;当质量浓度提高至0.66 g/mL时,白及多糖提取液抑菌效果较强,对大肠杆菌的抑菌效果优于市售的一夫百应抑菌膏.白及膏性能稳定,对大肠杆菌抑菌效果强于金黄色葡萄球菌.     

7β-[2-(2-氨噻唑-4-基)-(Z)-2-甲氧亚胺乙酰氨基]-3-(2-芳基-1,3,4-恶二唑-5-硫亚甲基)头孢菌素衍生物抑菌活性及构效关系探讨

采用2倍浓度稀释法、平板抑菌实验法、比浊法检测了衍生物对金黄色葡萄球菌等的最小抑菌浓度(MIC)及时效、量效关系，比较了6种衍生物不同的抑菌作用。结果表明，该系列头孢菌素衍生物对实验菌株均有明显的抑制活性。对金葡菌最为敏感，其中7β[2—(2—氨噻唑—4—基)—(Z)—2—甲氧亚肢乙酰氨基]—3—(2—芳基—1，3，4—恶二唑5—硫亚甲基)头孢—3—烯—4—羧酸a作用最强，与头孢拉定相似。提示该类衍生物是一类对受试菌株中金葡菌最为敏感的化合物。     

应用RAPD技术研究金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌DNA的多态性

本试验利用RAPD技术对临床上重要的致病菌金黄色葡萄球菌28株和铜绿假单胞菌2l株，用10bp引物进行扩增，结果铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的DNA带谱均出现了多态性；根据带谱的不同可将铜绿假单胞菌分成8个型，金葡菌分成3个型；根据铜绿假单胞菌的带型计算各菌间的相似系数，依此系数绘制了系统树，从系统树中清晰可见各菌间的亲缘关系。     

金黄色葡萄球菌对中性粒细胞粘弹性的影响

采用微管吸吮技术研究了中性粒细胞在外源病原微生物金黄色葡萄球菌刺激而免疫激活状态下的粘弹特性及不同的细菌浓度对中性粒细胞粘弹性的影响。同时以标准线性固体模型对实验数据进行了拟合。结果表明：中性粒细胞免疫激活后的粘弹性参数K1、K2、μ与对照组比较均显著增高，但随着细菌浓度的提高而表现出饱和效应；用金黄色葡萄球菌分泌物（培养液）处理中性粒细胞后，其粘弹性参数与对照组比较没有显著差异。     

新型流面型冷电弧装置杀菌研究

自制了流面型冷电弧杀菌装置,并研究了外加电压、气体流量、菌液流量、细菌种类和杀菌时间等参数对该装置杀菌率的影响.结果表明,杀菌率随着外加电压升高、液体流量降低以及杀菌时间增加而升高,空气自然对流的杀菌效果优于强制对流,对革兰氏阴性菌的杀菌效果优于革兰氏阳性菌.在空气自然对流、外加电压为33 kV和液体流量为80 mL/min的条件下,对E.coli987P的杀菌率达99.96%,所需时间不超过35 s;而S.aureus需经过70 s后,才能达到相同的杀菌率.冷电弧处理后的液体温升不超过3℃.通过透射电镜图发现,处理后的大肠杆菌(E.coli987P)细胞膜发生不可逆击穿,细胞内容物外流,最终导致菌体死亡.     

MTT法检测金黄色萄萄球菌活菌数的研究

以金黄色葡萄球菌为对象,探讨了MTT法应用于细菌细胞数定量分析时,MTT作用时间、毒性、剂量和DMSO用量等因素对活菌计数的影响.结果表明:当细菌数在105～107个/mL时,吸光度值与细菌数目呈良好的正向线性关系,MTT法可准确检测金黄色葡萄球菌的活菌数量.最佳反应条件为:0.25 mg/mL MTT溶液作用2 h,DMSO为2～2.5倍的菌液体积.     

免疫磁珠检测食品中金黄色葡萄球菌的研究

通过对金黄色葡萄球菌免疫磁珠添加量、免疫磁珠与菌液最佳反应时间、免疫磁珠分离金黄色葡萄球菌的敏感性试验、特异性试验的研究,确定了金黄色葡萄球菌抗体添加量50μg/m L、免疫磁珠添加量100μL,免疫磁珠与菌液最佳作用时间为30 min,免疫磁珠法检测灵敏度底限为10-9,相应的细菌浓度为14 cfu/m L.本试验制备的免疫磁珠灵敏性强,特异性高,大大节省了检测时间和费用.因此研究食品中金黄色葡萄球菌快速、准确检测方法以预防和控制食品安全事件的发生,具有重要的现实意义.     

人β防御素3基因在巴斯德毕赤酵母细胞中的表达

根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏爱性和β防御素3全基因中G．C、A、T含量的平衡,设计搭桥引物,通过PCR法合成人β防御素全基因序列,克隆到真核表达载体pPICZα-A,测序确认．将重组体电击转化酵母GS115,转化子经甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE分析,琼脂孔穴扩散法检测抑菌活性．结果表明,目的基因在毕赤酵母中已得到表达,表达量为0．22mg／mL,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抑菌活性．