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61.
将带有哺乳动物细胞信号肽的人白细胞介素-6(hIL-6)基因片段构建到大肠杆茵-酵母细胞穿梭型质粒pYES2中,获得表达质粒pYES2-hIL-6。另外,将表达质粒pYES2-hIL-6转化到酿酒酵母细胞DBY747中,并将获得的转化子在含2%乳糖的YP培养基中培养到OD600=1.0左右,后用2%的半乳糖进行了诱导表达。结果发现,在培养上清中发现人白介素-6的分泌。 相似文献
62.
63.
64.
发根农杆菌诱导植物毛状根的发生及次生代谢物生产的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
发根农杆菌(Agmbacterium rhizogenes)中含有Ri质粒.在自然条件下,发根农杆菌通过伤口侵染植物,使植物产生毛状根,本文从发根农杆菌的特性,及其所含有的Ri质粒的结构和功能,发根农杆菌诱导毛状根发生的机理,毛状根的转化方法,培养和鉴定及用于植物次生代谢生产方面的应用研究进行了综述. 相似文献
65.
几种农杆菌质粒DNA提取方法的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法,得率较低,一般在50ng/uL以下。就经典的碱裂解法(方法一)和在碱裂解法的基础上改进的方法二(去除了酚、氯仿提取过程,减少了提取过程中对人的伤害,且缩短了提取时间)以及改进的方法三进行了比较,实验结果表明:改进的方法二更适宜于做PCR检测,而方法三则适合于重组质粒DNA的酶切、PCR鉴定等。 相似文献
66.
通过基因工程重组技术,将抗栓肽(decorsin)基因与尿激酶的B链即scu-PA(B)基因用柔性Linker((Gly4Ser)3)融合在一起,构建新的嵌合体基因dscuPA(B),在大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS中通过IPTG诱导表达, 并考察了重组质粒在Rosetta(DE3)plysS在传代中的分离稳定性。该融合蛋白在大肠杆菌中是以包涵体的形式存在,对包涵体进行变性及复性后,并通过Zn2+螯合柱和SP阳离子交换柱进行纯化。质谱分析表明分子量为33.735kD,与理论值相符。目的蛋白质的纯度可达90%。纤维蛋白平板法测得嵌合分子的比活为90000IU/mg,与scuPA-32k的比活相近。体外血小板聚集实验表明融合蛋白有较强的抑制血小板聚集的功能,抑制常数IC50为0.31μmol/L。以上这些结果表明,该融合蛋白不但具有较强的溶栓功能,而且具有抗栓功能,可能是一种具有很好发展前景的双功能溶栓抗栓药物。 相似文献
67.
碱裂解提取质粒DNA的改进方法 总被引:5,自引:0,他引:5
实验室中常用的质粒提取方法是碱裂解法.一般碱裂解法提取质粒相对耗时长,而且需要冰浴,条件较为严格,本文尝试对碱裂解法进行改进,即在控制菌体量的前提下连续加入溶液Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,进行质粒提取,简化了操作步骤,缩短了实验时间(由150 min左右缩短为110 min以内),质粒收率和质量不变. 相似文献
68.
图的着色问题是著名的NP问题,有着重要的实际意义。比如通讯系统的频道分配、考试排考场问题等方面有直接应用。图的着色问题采用DNA计算方法很多,有表面DNA计算,粘贴DNA计算。本文提出质粒DNA计算,首先把顶点着色问题转化为求最大独立集问题,然后给出了图顶点着色问题的质粒DNA分子生物实验,利用限制性内切酶的特性切割有边相连的顶点,得到最大独立集,在试验中特别引入了一个备用试管,最后给出一个具体的实例。实例给出具体的着色方案,证明了该质粒DNA算法有效并且是可行的。 相似文献
69.
质粒DNA计算模型的计算体系 总被引:1,自引:1,他引:0
首先从具体实例入手抽象和归纳出质粒DNA计算模型的概念,并对质粒DNA计算模型计算体系的2个基本要素———计算物质和计算手段进行研究,由此形成了质粒DNA计算模型完备的计算体系;然后针对质粒DNA计算模型计算体系的应用,分析和解决了经常出现的关键问题.讨论了初始质粒DNA重新合成的重要性,并给出了重新合成的方法;接着对计算体系的2个基本实验(酶切和酶连实验)的成功率问题进行了分析,并提出了解决的方案;最后对检测实验进行了分析,提出了检测多种DNA序列的检测方法.对这些问题的分析和解决有利于质粒DNA计算模型理论的完善和应用的拓广. 相似文献
70.