A human homolog of the yeast gene encoding tRNA 2′-phosphotransferase: cloning,characterization and complementation analysis

The Saccharomyces cerevisiae TPT1 gene plays a role in removing the 2-phosphate from ligated tRNA during the maturation of pre-tRNA. Here we reported the cloning and characterization of the human TRPT1 gene as a homolog of yeast TPT1. The TRPT1 gene is located at human chromosome 11q13 and encodes a polypeptide of 253 amino acids. BLAST searches with its amino acid sequence revealed the ubiquitous occurrence of TRPT1 homologs and their functional relationships with the presence of the DUF60/KptA domain. Northern analysis demonstrated that the gene is primarily expressed in heart and skeletal muscle, with lower or undetectable levels in other tissues studied. A plasmid-shuffling experiment showed that the human TRPT1 gene could complement the tpt1 mutation in S. cerevisiaeReceived 19 March 2003; received after revision 25 April 2003; accepted 22 May 2003     

基于GO的酵母膜系统蛋白相互作用规律研究

引进描述蛋白质相互作用倾向性参数(PIRB),基于GO(Gene Ontology)和相关的数据库中蛋白质功能注释,对酿酒酵母部分膜蛋白相互作用规律进行了研究,构建了基于PIRB的蛋白质相互作用网络图.结果表明各类膜蛋白质之间的相互作用具有明显的偏向性.对这种偏向性的生物学含义作了简要探讨.     

糖化酵母在酒精工业中应用研究（Ⅰ）──去除INH1基因的酒精酵母的选育

二倍体耐高温酒精酵母经诱导生孢子，单孢子分离及营养缺陷型遗传标记的制作，获得了一株与亲本发酵性能相当且遗传性能稳定的单倍体菌株ＪＤ９－２２（α，ｓｔａ，ＩＮＨ１，ａｒｇ）。利用酵母的群体杂交方法，通过糖化酵母单倍体菌株２６０６７－４４（ａ，ＳＴＡ，ｉｎｈ，ａｄｅ）于ＪＤ９－２２杂交，选育去除了ＩＮＨ１基因的耐高温酒精酵母单倍体，解除了ＩＮＨ１基因对ＳＴＡ基因在酒精酵母细胞内表达的抑制。     

锌酵母的研究 Ⅱ.锌对酵母细胞生长和锌含量的影响

培养基中锌的浓度(以含ZnSO_4的味精废液滤液形式提供)不仅与啤酒酵母2016细胞生长、形态有关.且直接影响细胞含锌量和对锌吸收率。培养基中ZnSO_4浓度高于3×10~(-2)M时.酵母细胞生长受到抑制。在一定范围内.酵母细胞含锌量随培养基中锌含量增多而增加,但锌吸收率随培养基中锌含量增多而减低。     

不同酿酒酵母对骏枣果酒发酵特性的影响

为研究不同酿酒酵母发酵对骏枣果酒的影响,采用气相色谱法、分光光度法等,分析了4种酿酒酵母(BO213、EC1118、FX10和RV002)在骏枣果酒发酵过程中理化指标和抗氧化能力的变化。结果表明,4种酵母发酵过程中总可溶性固形物含量下降;酒精度逐渐上升,其中RV002酒精度上升最快;发酵10d后,BO213、EC1118、FX10和RV002的酒精度分别升至11.05%、11.68%、10.84%和11.89%;发酵过程中pH值和总酸没有明显变化。果酒发酵结束后以酵母BO213的甲醇含量最低;骏枣酒中的杂醇油主要有正丙醇、异丁醇和异戊醇,其中异丁醇和异戊醇含量较高,发酵过程中总杂醇油含量呈现先增加后降低的趋势,发酵结束后以BO213发酵的骏枣酒总杂醇油含量最低,质量浓度为268.6mg/L。发酵期间,总酚含量没有明显变化,而抗氧化能力则逐渐上升,且不同的酿酒酵母发酵的骏枣酒抗氧化能力也各不相同,以BO213最高。在4种酿酒酵母中,酵母BO213产生的甲醇和杂醇油含量最低,抗氧化能力最强,更适合骏枣果酒的发酵。     

重组真菌细胞色素P450nor2在酵母细胞中的表达

酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）是一种理想的真核蛋白表达系统．将真菌细胞色素P450nor2基因亚克隆到酵母表达载体pAUR123中,构建重组表达质粒pAUR-P450nor2并转化酿酒酵母AH22,经Aureobasidin A筛选和菌落PCR鉴定得到阳性克隆．SDS-PAGE分析证实：重组的真菌细胞色素P450nor2在酵母细胞中实现了高表达．     

Elp3基因缺失对酿酒酵母咖啡因耐受性的影响

过量咖啡因(Caffeine, CAF)对真核细胞有毒害作用.Elp3是组蛋白乙酰转移酶Elongator复合物的催化亚基,其缺失会影响Elongator的功能,进而使酵母产生对CAF敏感表型.为研究酿酒酵母CAF耐受性,以不同浓度CAF处理野生型、elp3⊿及转入完整和部分缺失Elp3的elp3⊿菌株,检测其敏感性,并通过RT-qPCR和ChIP实验研究了热激胁迫下SSA3的表达.结果发现常温下各菌株生长均随CAF浓度的增加而减缓,且elp3⊿细胞CAF耐受性下降更显著;高温处理使elp3⊿菌株对CAF更加敏感;在elp3⊿菌株中转入两保守功能域缺失的Elp3,其咖啡因耐受性并无明显变化;无论热激与否,elp3⊿菌株SSA3表达均显著低于野生型对照,Elp3直接参与热激胁迫下SSA3的转录延伸.研究表明Elp3基因缺失和高温处理均可使酿酒酵母的CAF耐受性降低;Elp3两保守功能域为其参与CAF胁迫反应所必需;高温协同处理下elp3⊿菌株CAF耐受性的显著降低可能与此条件下SSA3等应激基因表达受阻有关.     

抗铜酿酒酵母铜结合蛋白的纯化及性质研究

酿酒酵母Ｃｕ＾２＋抗株ＹＮＤ２１经含一定浓度的氯化铜培养基诱导培养后,收集菌体,破碎细胞,离心后ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０和ＤＥＡＥ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ柱层析分离可获得三种铜结合蛋白ＤＥ－１,ＤＥ－２,ＤＥ－３。ＤＥ－１脱盐后（Ｇ－１）经鉴定具有金属硫蛋白的特性：表观分子量约为１８ｋＤ;每分子蛋白含２０个巯基,结合１１个铜原子;氨基酸组成中富含半胱氨酸（１８％）、碱性和酸性氨基酸,而酪氨酸和蛋氨酸含     

铜抗性菌株的原生质体诱变选育及其吸附能力检测

将酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)菌株Y1单倍体化，筛选得到单倍体出发菌株SY1，通过紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)复合诱变，获得1株高抗性突变菌株，其Cu^2 抗性水平为8mmol／L，是出发菌株的8倍，其Cu^2 吸附量是出发菌株的4．6倍。50世代培养结果表明，其遗传稳定性在96％以上。     

超声波对酿酒酵母诱变作用的初探

通过利用现有超声波仪器对酿酒酵母进行诱变作用试验,初步探讨了超声波对酿酒酵母致突变的因果效应.试验结果表明,在相同的时间内,超声波频率越高对试验菌株的致死率越高;同一频率,超声波辐射时间增加也可使试验菌株的致死率增高,同时经过诱变处理后的菌株其生理生化特性也有变化.