病毒V-myc表达质粒的构建

在当今的癌基因研究中,研究癌组织中有关癌基因产物已成为探讨肿瘤发病机制、癌基因的激活及把癌基因的激活程度与肿瘤发展的临床表现及愈后联系起来的一个重要的不可缺少的研究手段。目前已知myc-基因家族的扩增涉及到多种组织学类型不同的恶性肿瘤并与恶性程度相关。如C-myc基因扩增的肿瘤有急性早幼粒细胞性白血病、恶性淋巴瘤、结肠癌、     

抗汞菌株的筛选及质粒的研究

测定了自污染地区分离到的抗30μg/mL HgCl_2的87株细菌中有39株具有质粒带,将它们分为4种类型,其中汞盐抗性质粒可以转移。其抗性不只是由质粒决定,还受核基因控制。探讨了对不同菌株的质粒进行消除的方法。     

利福平对大肠杆菌F′质粒的消除

研究了利福平(rif)对大肠杆菌F′质粒的消除效应.实验结果表明,消除质粒以rif的浓度50—100μg/mL为宜.通过选择培养,在LB和LB+cm平板上,就能选出F~-菌株,因F~+抗cm,E~-不抗cm.选得的F~-菌株是:E.Coli XAC F~-/△(lac pro)nal.     

生物工程在药用植物中的应用

本文从组织培养、原生质体培养及其融合和遗传转化三个方面介绍了药用植物生物工程学的研究内容及其某些进展。并认为细胞培养生产药用化合物一定会发展为类似微生物发酵的工业化生产。     

一种高效安全提取质粒DNA方法的建立

在碱裂解法提取质粒DNA的基础上做了改进,将NaOH浓度从0.20 mol/L降低为0.10 mol/L,使得超螺旋DNA的得率进一步提高.采用silica法纯化质粒DNA,避免了使用有毒性和挥发性气味的饱和酚和氯仿,使得操作更安全简单.电泳结果表明,提取的质粒DNA质量好,得率高,并且可以直接进行下一步的酶切、连接及转化等实验.同时,该方法中使用的硅胶可以回收再生进行重复利用,节省了实验费用.     

一种快速提取质粒DNA鉴别重组克隆的方法

依据快检缓冲液筛选重组子克隆的方法,结合碱裂解法提取质粒DNA的原理,经过试验摸索,应用了快检缓冲液直接裂解菌液,电泳后筛选重组质粒的方法,避免了提取质粒鉴定等繁琐步骤,其结果与菌液PCR、质粒酶切鉴定结果一致,可快速筛选出重组克隆.     

从大肠杆菌中获得高浓度质粒DNA的方法

通过改进菌体的培养以及质粒小提方法,可以简便快捷地得到浓度很高的质粒DNA,经琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法、酶切、PCR的验证,所提质粒可以应用于分子生物学的研究,特别是可以满足瞬时基因枪转化的要求。     

质粒DNA纯化及内毒素去除策略研究进展

质粒DNA(plasmid DNA)是最常用的基因工程和基因疫苗载体,近年来在生物医学和环境科学等领域得到了广泛应用。质粒DNA纯化是分子生物学研究中常用的实验技术,纳米磁性粒子等固相载体技术和色谱技术优化了DNA纯化方法。对大肠杆菌质粒DNA常用纯化方法、内毒素去除策略以及自动化纯化设备进行综述,为质粒DNA的应用研究提供支持。     

穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究

通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc)作为α-氨基的保护基,以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量。通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-PTD多肽与质粒DNA相互作用,实验表明TAT-PTD多肽与质粒DNA可以通过静电作用相互吸引、靠近并结合,于是为下一步小单孢菌基因工程的细胞转导提供了依据。