极大节旋藻气囊蛋白基因gvpA克隆与序列分析

为了研究极大节旋藻气囊蛋白的分子生物学特性,并为gvpA基因的研究提供基础材料,在对极大节旋藻GSS序列分析的基础上,采用PCR技术克隆了gvpA基因的全长序列,并进行了相关分析。结果表明极大节旋藻gvpA基因编码区的GC含量为42.92%,核苷酸序列和蛋白序列与Planktothrix agardhii的gvpA基因相似性最高(79.4%,97.2%),其次是Pseudanabaena sp.PCC6901(75.3%,94.4%)。系统发生分析表明极大节旋藻gvpA基因与Planktothrix agardhii的gvpA基因同源性最高(89%ML,85%MP,89%NJ)。     

中华鲟囊胚细胞的长期保存及其克隆胚胎发育观察

为保存濒危鱼类中华鲟种质资源,在0、-20、-80、-196℃4种不同的温度下对其囊胚细胞进行了长期保存试验,细胞存活期分别为10d、30d和2年,在液氮中(-196℃)保存2年后仍有60.7%存活率;用冷冻复苏后的细胞进行核移植,并对克隆胚胎的发育进行了观察.共移植417枚卵,获得2尾克隆幼鲟,成功率为0.48%,表明长期冷冻保存的囊胚细胞仍具有发育全能性,通过克隆技术能获得存活个体.此项技术为濒危物种的保护开辟了新途径.     

杨树不同器官蛋白质和3种氮代谢酶的动态变化

以杨树无性系797杨(Populus deltoides×P.euramericana)1年生苗为材料,对不同器官蛋白质含量与硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、蛋白酶等3种氮代谢关键酶的动态变化与关系进行了研究。结果表明:杨树不同器官(木质部、皮层、根部)蛋白质含量在芽萌发期间(4月中旬)最低,木质部和皮层是杨树越冬期间贮藏蛋白质的主要贮存场所,根部相对较低。叶片和根部硝酸还原酶(NR)活性分别在9月初和10月中旬达到最大,落叶前后明显下降。叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性在5月中旬和10月中旬有两次高峰,与蛋白质变化趋势一致,而根部在芽萌发期间达到最大,与蛋白质变化趋势相反,两部位GS活性落叶前后明显下降。根部蛋白酶在春季芽萌发期间随着贮藏蛋白质的降解其活性逐渐上升,落叶前后,亦呈上升趋势,与蛋白质含量呈显著的负相关关系。     

基于ASTER遥感数据的杨树林分因子建模及制图研究

利用ASTER原始的9个波段数据进行主成分、小波、MNF、RBV等图像融合和变换生成37个特征波段,结合江苏苏北平原建湖县48个杨树样地调查数据,分别就杨树平均高、年龄和单位面积蓄积量进行传统的统计建模分析。并在数据挖掘软件Cubist支持下研究了回归村建模。对比两次分析发现。因为利用回归树建立的遥感估算模型总体精度优于传统的单输入模型,所以大地域遥感生物物理参数制图时采用回归村模型更为可行和可靠。     

人可溶性增殖诱导配体在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性鉴定

人增殖诱导配体在促肿瘤细胞增殖以及自身免疫性疾病中具有重要的作用．从GenBank中查出人APRIL的序列号（AR）46888）,根据其胞外可溶部分序列设计引物,采用RT-PCR技术从健康人新鲜血液单核细胞（PBMCs）总RNA中克隆出人sAPRIL cDNA,将该cDNA克隆人原核表达载体pET30a,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21（DE3）中获得高效表达,经SDS—PAGE后在17000左右有一明显的表达条带,该蛋白主要以包涵体形式存在,表达量达45％左右,将包涵体蛋白变复性后进行细胞生物活性实验,为进一步研究其临床应用奠定了基础．     

hIL-10在大肠杆菌中的表达及其生物学活性鉴定

构建了含有人白细胞介素-hIL-10（Human Interleukin10,hIL-10）基因的重组质粒,在大肠杆菌中的高效表达,并对其生物学活性进行了鉴定．用RT-PCR扩增hIL-10 cDNA,并插入原核表达载体PET-32b．将重组质粒转入BL21（DE3）感受态细胞,在37℃用IPTG诱导hIL-10表达．表达的重组蛋白经复性纯化后,用夹心ELISA法检测其对外周血单核细胞（PBMC）合成IFN-γ的抑制作用．重组质粒PET-32b／hIL-10的DNA序列分析显示,克隆的DNA序列和文献报道的hIL-10 cDNA序列一致．SDS-PAGE表明,重组蛋白相对分子质量为18000．活性测定结果显示,重组蛋白能显著抑制PBMC合成IFN-γ．这表明构建的PET-32b／hIL-10可以在大肠杆菌中高效表达,经复性和纯化后,获得了具有高纯度和活性的hIL-10     

基于免疫克隆原理的改进粒子群优化算法的研究

提出了一种改进的粒子群优化(PSO)算法来进行函数优化,以克服PSO算法容易陷入局部极值的不足,加快收敛速度,从而实现全局搜索.PSO算法是基于群体智能的随机优化算法,参数结构简单,但收敛速度慢,容易陷入局部极值.通过对PSO算法的深入分析,基于传统的速度--位置更新操作,把免疫克隆(IC)原理引入PSO算法中,将抗体视为粒子,根据亲和度的高低进行粒子克隆选择、克隆抑制和高频变异,提高了种群的多样性和全局搜索的能力.测试结果表明,该算法完成全局搜索所需的迭代次数明显少于PSO算法,大大缩短了搜索时间,在多维函数最优解的搜索中具有优良的性能.     

共享免疫微粒群算法

将共享机制引入微粒群算法,把群体的粒子适应度更新为共享适应度,对共享适应度高的粒子进行处罚,保留低适应值的粒子为记忆粒子,当全局最好值连续进化若干代无变化时,用记忆粒子和克隆选择来更新粒子.这样既增加了群体的多样性,同时又保存了群体中最好的粒子,从而有效克服了由于微粒群算法多样性差而造成的易陷于局部最优和对多峰值函数搜索效果不佳的缺点,仿真实验验证了该算法的有效性.     

杉木优良无性系组培快繁技术体系的建立

从杉木遗传测定林中选择36株杉木优良个体进行组培快繁技术研究,在对36株杉木优良个体进行诱导、继代培养的基础上,筛选出5个优良无性系建立了相应的组培快繁技术体系.诱导培养基:1/2MS 6-BA(0.3～0.8 mg/L) 蔗糖(3%);继伐增殖培养基:1/2MS 6-BA(0.5～0.7 mg/L) IBA(0.1～0.3 mg/L) 蔗糖(3%);生根培养基:1/4改良MS IBA(0.5～1.0 mg/L)/NAA(0.5～1.0 mg/L)/ABT1#(1.0～1.5 mg/L) 蔗糖(1.5%);组培苗移栽基质中,m(黄心土):m(细沙)=9:1.采用该技术体系的杉木组培苗生根率可达90%,移栽成活率可达96%.     

杨盘二孢菌激发子粗提物生物活性的研究

从杨盘二孢菌(Marssonina brunnea)的菌丝和培养滤液中提取激发子物质,得到两种粗提物,用这两种粗提物分别处理烟草、茄子和辣椒叶片,发现均可在烟草上产生过敏性坏死斑,但不能使茄子和辣椒产生过敏性反应。用这两种粗提物分别处理抗病和感病杨树,均可以使抗病杨树的过氧化物酶活性明显升高,但感病杨树的过氧化物酶活性升高不明显。说明这两种粗提物中均含有激发子活性物质,且均为专化性激发子。