基于蛋白质组学技术筛查维吾尔族妇女宫颈癌前病变患者血浆蛋白预警标志物

 依托蛋白质二维液相色谱和质谱技术,寻找与新疆维吾尔族妇女宫颈癌癌前病变高度宫颈鳞状上皮内瘤样变(HSIL)相关的血浆预警蛋白标志物,旨在对宫颈癌做到早期预防和诊断。收集维吾尔族HSIL(21例)和宫颈炎(22例)患者血浆标本并制备血浆低丰度蛋白质组样品,通过对蛋白质二维液相色谱系统的分离与鉴别分析,筛选出差异表达的组分,并运用质谱和生物信息学技术进行鉴定和功能识别分析。确定了宫颈炎和HSIL患者的基于蛋白质等电点和疏水性特征的血浆低丰度蛋白质组图谱,筛选出10个差异表达蛋白组分。结果表明,在HSIL患者血浆中3个低丰度蛋白组分含量明显上升,1个组分含量下降;而通过质谱技术鉴定出31种蛋白质,其中4种蛋白质与肿瘤进程密切相关,分别是代谢相关蛋白(APOA1)、信号转导相关蛋白(mTOR、EphA3)和免疫功能相关蛋白(HLA-DQB1)。本文针对维吾尔族妇女这一宫颈癌高发人群,展开癌前病变患者血浆低丰度蛋白组表达水平的研究,鉴定出多种差异表达血浆蛋白预警标志物,为本区宫颈癌的预防和早期鉴别诊断及癌变机制研究提供了依据。     

微乳液毛细管电动色谱法测定雷公藤炮制品中雷公藤甲素的含量

利用微乳液毛细管电动色谱法测定不同雷公藤炮制品中雷公藤甲素的含量．在含1％（w／v）十二烷基硫酸钠（SDS）,30／;（v／v）正丁醇,1％（v／v）乙酸乙酯和96％（v／v）5mmol／L硼砂-10mmol／L磷酸二氢钠溶液（pH8．5）的微乳体系下,雷公藤炮制品中的雷公藤甲素在10min内得到良好的分离与检测．不同雷公藤炮制品中雷公藤甲素含量的测定结果：其中生品中的含量最高,为2．0085g／g,其余炮制品雷公藤甲素的含量分别为清炒品1．7166g／g,酒炙品1．5412g／g,水煮品1．7584g／g．     

气相色谱法测定空气中环己酮等有机杂质的质量分数

采用气相色谱法同时测定空气中的环己烷、环己酮、环己醇的质量分数,直接进样,通过毛细柱DB-WAX分析.结果表明,各组分的线性方程分别为y=1.102x-23.328,y=0.0773x-1.1056,y=0.0892x+1.9831,相关系数均在99.94%以上.实验表明,该方法简便、快速、准确.     

RP-HPLC法测定美容液中水溶性维生素的含量

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),同时测定美容液中水溶性维生素C,B1和叶酸的含量.ODS-C18柱(250×4.6mm.id,5μm),乙酸钠-乙酸缓冲液(pH=5.69)/甲醇(75/25,V/V)为流动相;流速1.0mL/m in;检测波长254nm.9m in内实现了良好分离,其平均回收率为97.8%~101.2%,变异系数为0.89%~1.36%.     

长链烷基甲基萘单磺酸盐和双磺酸盐分离研究

采用反相离子对高效液相色谱(HPLC)及电喷雾质谱(ESI-MS)研究了辛基甲基萘单、双磺酸盐的分离提纯效果.经过大量色谱分析实验,找到了最佳分析条件.紫外检测波长为230nm,流动相为甲醇和水的混合物,流速为0.8mL/min,采用梯度洗脱的方法进行分析.洗脱条件为线性梯度:0~40min,V(甲醇)∶V(水)=60∶40;40~50min,V(甲醇)∶V(水)=100∶0.在此优化条件下样品分离度高,分离效果好.用面积归一化法得到了样品各组分的相对含量,采用HPLC和ESI-MS对组分进行了分析和表征.建立了一种便捷、可靠的烷基甲基萘磺酸盐的分析表征方法以及单、双磺酸盐分离提纯效果的评价方法,得到了满意的结果.     

荔浦芋淀粉的级分及其凝胶色谱分析

用正丁醇结晶法分离得到荔浦芋淀粉的直链淀粉与支链淀粉,采用HPLC排阻凝胶色谱法测定荔浦芋直链淀粉与支链淀粉的纯度和相对分子量质量.结果得到,荔浦芋直链淀粉的纯度为100%,其保留时间为7.55min;荔浦芋支链淀粉的纯度为100%,其保留时间为6.35 min.直链淀粉的相对分子量质量为5300,支链淀粉的相对分子量质量为61500 .     

大连湾牡蛎蛋白的分离提取及分子量测定

以大连湾牡蛎为实验材料．首先采用冰醋酸粗提法提取牡蛎蛋白,然后用葡聚糖凝胶(Sephadex-G100)进行柱层析分离,SDS—聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离蛋白,Kodak凝胶成像分析仪分析及测定分子量．结果显示大连湾牡蛎中含有分子量为55kd的牡蛎特征蛋门,同时分离出其它4种蛋白质,分子量介于33．0～63.4kd之间．     

不同溶剂及配比对碳纳米管辅助薄层色谱拆分盐酸普萘洛尔的影响

 以羟丙基-β-环糊精、甲基-β-环糊精为手性固定相,氧化多壁碳纳米管为拆分辅助吸附添加剂,采用薄层色谱法拆分了盐酸普萘洛尔对映体。优化得到了最佳展开剂条件,并对展开剂中是否添加冰醋酸进行了比较。当以羟丙基-β-环糊精/氧化多壁碳纳米管为固定相制备薄层色谱板,用于拆分盐酸普萘洛尔时,最佳的展开剂条件为：乙腈/异丁醇（体积比为9:1）混合溶剂中添加体积分数为2%的冰醋酸。当以甲基-β-环糊精/氧化多壁碳纳米管为固定相制备薄层色谱板,用于拆分盐酸普萘洛尔时,最佳的展开剂条件为：乙腈/正丁醇（体积比为1：1）混合溶剂中添加体积分数为2%的冰醋酸。     

高速逆流色谱分离纯化灯盏细辛中的黄酮类化合物

采用高速逆流色谱技术快速分离纯化灯盏细辛中的黄酮类化合物,以石油醚-乙酸乙酯-甲醇 水(4:6:3.5:6.5,V/V)为溶剂系统,转速850 r/min,流速2.0 mL/min,检测波长254 nm。从500 mg粗提物中分离得到4个黄酮类化合物：黄芩素 (87 mg)、木犀草素 (35 mg)、槲皮素 (46 mg)和芹菜素 (92 mg),经高效液相色谱法分析,其纯度分别为94.6%、92.5%、98.2%、97.5%。研究结果表明,应用高速逆流色谱分离灯盏细辛中的黄酮类化合物快速、高效且纯度高。     

高效液相色谱法检测紫苏梗提取物活性成分及抗氧化效果

用乙酸乙酯、 氯仿、 正丁醇等有机试剂和水分别提取中草药紫苏梗的有效成分, 得到有机酸类、 三萜类和黄酮类化合物, 并研究其抗氧化效果. 结果表明: 紫苏梗正丁醇相中没食子酸的质量比为0.6 g/kg; 氯仿相中三萜类化合物齐墩果酸的质量比为0.9 g/kg; 紫苏梗提取物中黄铜类化合物质量比相对较高, 在乙酸乙酯相中为1.2 g/kg, 氯仿相中为1.1 g/kg; 紫苏梗各提取物对·OH自由基、 超氧自由基(·O-2)和DPPH·均有一定的清除能力, 其中1 mg/mL的乙酸乙酯相和氯仿相的清除能力最强, 分别为79%和73%、 62%和59%、 83%和80%, 对·OH自由基和DPPH·的清除能力相对较强, 即紫苏梗各提取物均具有显著的抗氧化效果.