DNA分子标记在果树上的应用

介绍了在果树上常用的DNA分子标记的原理和特点，并对其在果树的分子遗传图谱和指纹图谱的构建，品种鉴别、系谱分析和分类，基因定位与分子标记辅助选择等方面的应用进行了综述。     

GC/MS图谱中N,N′-二苯基脲的中性丢失

常温常压下苯胺与CO2在AlCl3催化作用下发生反应，对反应混合物用乙醇重结晶，获得无色针状晶体，GC／MS分析表明该晶体为异氰玻苯酯．用熔点测定、HPLC／MS／MS、FTIR、UV和^1H NMR等手段对此晶体进行分析，确定其为N，N′—二苯基脲．研究了N，N′—二苯基脲的质谱裂解机理，实验结果表明N，N′—二苯基脲质谱裂解中可能发生了中性丢失，丢失了中性分子苯胺，生成的异氰酸苯酯分子离子由于π电子共轭而致稳．     

对三点自交法构建分子标记连锁图谱的改进

对三点自交法构建分子标记连锁图谱进行了改进，使分子标记连锁图谱构建更加精确，并结合F2群体的有关数据进行了模拟计算，证实该方法的可行性，结果表明改进的方法比原有方法更加有效。     

致病性念珠菌DNA的AFLP指纹图谱

半知菌亚门中的念株菌(Candida)约有20个种是人体呼吸道,胃肠道,皮肤及生殖器官的常见腐生菌,它们还是AIDS患者念株菌性鹅口疮、食道炎及侵袭性感染常见的原因.通常的血清学鉴定方法是以不同菌体表面多糖抗原物质的差异为依据,但由于念珠菌有些菌体间抗原物质很相似,相互间有交叉反应,因此很难反映出实际的感染情况;而传统的表型分型法除了受环境因素和真菌本身变异的影响外,还受到实验本身重复性差,操作过程繁琐以及实验结果的判断有时并不十分明确等诸多因素的干扰.因此,建立一种稳定、快速、准确的致病性念珠菌基因分型鉴定方法在临床上对指导诊断和治疗具有重要的意义.由Zabeau等人1992年创立的AFLP(Amplified fragment length polymorphism)技术是目前国际上构建DNA指纹图谱的最新方法之一,该方法结合了RFLP(Restriction frag-ment length polymorphism)技术和RAPD(Random amplified polymorphic DNA)技术的特点,使用人工接头(Adapter)与限制性内切酶酶切的基因组DNA片段连接并以此为DNA模板,合成系列3’-末端随机变化数个碱基且与人工接头序列相互补的PCR引物进行PCR特异条件扩增,经电泳检测后可获得DNA指纹图谱.本研究针对临床上常见的8种致病性念珠菌,以Pst I酶切基因组DNA构建了致病性念株     

三七茎叶提取物中人参皂苷Rb3的分离及指纹图谱

以三七茎叶提取物为原料，采用反相液相色谱柱进行分离纯化，通过考察流动相组成、配比、上样量和流量对分离效果的影响，确定了适宜的工艺操作条件．在此奈件下得到了人参皂苷Rb3，纯度达99．37％．进而以提纯的皂苷单体为标准品，采用外标法对其进行定量分析，并测得原料中含有人参皂苷Rb3质量分数为38．25％．同时又采用了高效液相色谱-质谱联用技术，建立了三七茎叶提取物的指纹图谱．     

水稻剑叶蛋白质的双向电泳分析

以三系杂交稻不育系武金4A,保持系武金4B剑叶为材料,利用双向电泳技术,获得了孕穗期剑叶蛋白质双向电泳图谱。经考马斯亮兰染色,可辨别出蛋白质斑点数450个左右；经银染复染后,可辨别出约800个左右蛋白质点。蛋白质相对分子量约在14.0kDa～94.0kDa范围内,主要分布在14.0kDa～67.0kDa之间；等电点(pIs)约在3.5～9.5范围内,主要分布在5.0～7.0之间。     

毛细管气相色谱指纹图谱在广藿香质量控制中的应用

用毛细管气相色谱研究不同栽培品种广藿香挥发油的指纹图谱,用相对保留值和相对峰面积2个参数以及指纹图谱八强峰和指纹图谱分区2种方法加以分析.结果表明不同栽培品种广藿香的指纹图谱既有一定相似性,也有一定差异性.相似性表现为:指纹图谱各区出峰稳定,峰数一致,有5个共有峰在12个样品中均进入指纹图谱八强峰,参考峰均为指纹图谱八强峰中的最强峰.差异性则表现为:各区特征峰的峰形、相对峰面积值亦有不同,19和20号峰是湛江广藿香特有的指纹图谱八强峰,而14和17号峰却为石牌广藿香特有的指纹图谱八强峰.指纹图谱分区比较与指纹图谱八强峰的结论相一致.     

Genetic analysis and molecular mapping of a presenescing leaf gene psll in rice （Oryza sativa L.）

A rice psl1 （presenescing leaf） mutant was obtained from a japonica variety Zhonghua 11 via radiation of ^60Co-γ in M2 generation. Every leaf of the mutant began to wither after it reached the biggest length, while the leaves of the wild variety could keep green for 25--35 d. In this study, genetic analysis and gene mapping were carried out for the mutant identified. The SSR marker analysis showed that the mutant was controlled by a single recessive gene （psl1） located on chromosome 2. Fine mapping of the psl1 locus was conducted with 34 new STS markers developed around psl1 anchored region based on the sequence diversity between Nipponbare and 93-11. The psl1 was further mapped between two STS markers, STS2-19 and STS2-26, with genetic distances of 0.43 and 0.11 cM, respectively, while cosegregated with STS2-25. A BAC contig was found to span the psl1 locus, the region being delimited to 48 kb. This result was very useful for cloning of the psl1 gene.     

水稻半矮秆基因sd-g的精细定位

矮秆基因的发掘、研究和利用是水稻株型改良育种和植物生长发育分子生物学研究的重要基础. 利用新桂矮双矮与02428杂交产生的F₂群体对sd-g进行了精细定位. sd-g基因首先被定位在水稻第5染色体上微卫星标记RM440和RM163之间, 遗传距离分别是0. 5和2.5 cM. 为了进一步精细定位sd-g基因, 利用已经公布的水稻基因组序列, 在sd-g基因附近区域寻找微卫星序列并发展新的标记, 在RM440和RM163之间发展了9个微卫星标记. sd-g基因被进一步定位在SSR5-1和SSR5-51之间, SSR5-1与sd-g之间距0. 1 cM, SSR5-51与sd-g之间相距0. 3 cM, 而SSR418与sd-g表现为共分离. 以此为基础, 构建覆盖sd-g基因区域的BAC重叠群, sd-g基因被定位在AC105319约85 kb的区段上, 这为sd-g基因的图位克隆奠定了基础.     

中药血竭的化学模式识别研究

建立了10种中药血竭样品的HPLC(High performance liquid chromatgraphy)指纹图谱，并把HPLC指纹图谱信息进行数据化及数据标准化处理；用重叠率与相关系数两个参数，从两个方面定量地对这10种样品的HPLC指纹图谱进行了相似性评价；在此基础上用系统聚类分析法定性地对这10种样品进行了分类和鉴别．从而建立了一种相对完善的中药血竭的化学模式识别技术，为中药血竭的质量评价和分类鉴别提供了一个很好的方法和思路．